【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及铜肽、六肽-9和生物素酰三肽-1检测，尤其涉及一种化妆品中铜肽、六肽-9和生物素酰三肽-1的检测方法。
技术介绍
1、肽是由氨基酸通过肽键链接形成的一类化合物，是具有生物学功能的蛋白质片段。由于氨基酸种类的多样性和肽链空间构象的高自由度，使得肽具备生物学作用的多样性，活性肽的开发与应用为个人护理用品开辟了一个新的领域。
2、铜肽(copper glycyl-histidine-tripeptide，ghk-cu)是由甘氨酰组氨酰赖氨酸三肽(glycyl histidine tripeptide，ghk)与二价铜结合的化合物，其水溶液呈蓝色，所以又名“蓝铜肽”。ghk是一种活性三肽，它由pickart及其研究团队于1973年首先从人血浆中分离得到。进一步研究发现三肽结构与铜有很强的亲和力，很容易形成配合物ghk-cu，并发现相比单一的ghk结构，ghk-cu复合物具有更好的生物活性。蓝铜肽在护肤中最大的应用领域在于抗衰老。可以促进胶原蛋白、弹性蛋白再生，紧致肌肤，增加弹性，减少皱纹。另外，铜肽也具有较好的防脱发功能，在防脱发化妆品中发挥重要的作用。其通过刺激血管内皮生长因子的生成、，使毛囊附近的血管增大，从而增加毛发的营养供应，促进毛发生长，使发根变粗，增加毛发厚度；另外，铜肽也可以通过抑制转化生长因子β1的生成、防止毛囊过早从生长期向退行期转变，达到防脱的作用。同时，铜肽可以刺激碱性成纤维细胞生长因子生成，可刺激血管的形成和促进毛发的生长。
3、六肽-9由6个氨基酸组成，是一种非常稳定的胶原
4、生物素酰三肽-1是一种把维生素h和matrikine系列信号肽ghk相结合的三肽。生物素酰三肽-1具有增加细胞外基质如胶原蛋白iv和层粘连蛋白5合成，延缓毛囊衰老，改善毛囊结构的作用；有利于头发固着在真皮毛囊内，从而达到防脱发的功效。
5、目前，关于化妆品中铜肽、六肽-9、生物素酰三肽-1的检测方法还未见文献报道。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是针对现有技术中的不足，提供一种化妆品中铜肽、六肽-9和生物素酰三肽-1的检测方法，采用高效液相色谱串联质谱的系统。
2、为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案是：
3、提供一种化妆品中铜肽、六肽-9和生物素酰三肽-1的检测方法，包括如下步骤：
4、步骤一，精密称取铜肽、六肽-9、生物素酰三肽-1标准品，分别用水溶解，配制标准储备溶液；
5、精密称取空白试样，加水溶解，配制空白基质提取液；
6、采用所述空白基质提取液稀释所述标准储备溶液，配制基质标准中间溶液；
7、分别精密量取所述基质标准中间溶液，采用所述空白基质提取液稀释，配制基质标准系列溶液；
8、步骤二，精密称取样品，加水，涡旋，分散均匀，超声提取，放至室温，用水定容至刻度，离心，过滤，作为供试品溶液备用；
9、步骤三，采用高效液相色谱-质谱系统进行检测。
10、进一步地，所述空白试样为空白膏霜基质试样、空白油基基质试样、空白凝胶基质试样、空白水基质试样中的一种。
11、进一步地，所述配制空白基质提取液的具体过程为：精密称取空白试样0.2-0.5g，置于具塞比色管中，加水15-30ml，涡旋30-60s，分散均匀，超声提取20-30min，放至室温，用水定容至刻度，以10000-15000r/min转速离心5-10min，过0.22μm滤膜。
12、进一步地，所述步骤二具体为：称取样品0.2-0.5g，置于具塞比色管中，加水15-30ml，涡旋30-60s，分散均匀，超声提取20-30min，放至室温，用水定容至刻度，以10000-15000r/min转速离心5-10min，过0.22μm滤膜，作为供试品溶液备用。
13、进一步地，步骤三中，色谱条件为：
14、色谱柱：capcellpakadme色谱柱，150mm×2.1mm，2.0μm；流动相：a为0.1v/v％甲酸水溶液，b为乙腈；流速：0.15-0.25ml/min；柱温：25-30℃；进样量：1-5μl；梯度洗脱。
15、更进一步地，梯度洗脱程序如下：
16、
17、进一步地，步骤三中，质谱条件为：
18、离子源：电喷雾离子源(esi源)；毛细管电压：3500v；裂解电压：380v；气帘气温度：250℃；气帘气流速：11l/min；雾化器压力：20psi；鞘气温度：250℃；鞘气流速：14l/min；扫描方式：正离子扫描；监测模式：正离子多反应监测模式(mrm)。
19、更进一步地，以丰度比较高且干扰较少的离子作为定量离子，其余作为定性离子：
20、
21、本专利技术采用以上技术方案，与现有技术相比，具有如下技术效果：
22、本专利技术首次建议了同时测定化妆品中的铜肽、六肽-9、生物素酰三肽-1的方法，可对膏霜、乳液、水剂、凝胶、油基和冻干基质类化妆品中含铜肽、六肽-9和生物素酰三肽-1原料的测定，方法操作简单、分析快速、专属性强、分离度高，有利于快速应对现有市售产品铜肽、六肽-9和生物素酰三肽-1成分添加的监管。
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1.一种化妆品中铜肽、六肽-9和生物素酰三肽-1的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述空白试样为空白膏霜基质试样、空白油基基质试样、空白凝胶基质试样、空白水基质试样中的一种。
3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述配制空白基质提取液的具体过程为：精密称取空白试样0.2-0.5g，置于具塞比色管中，加水15-30mL，涡旋30-60s，分散均匀，超声提取20-30min，放至室温，用水定容至刻度，以10000-15000r/min转速离心5-10min，过0.22μm滤膜。
4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述步骤二具体为：称取样品0.2-0.5g，置于具塞比色管中，加水15-30mL，涡旋30-60s，分散均匀，超声提取20-30min，放至室温，用水定容至刻度，以10000-15000r/min转速离心5-10min，过0.22μm滤膜，作为供试品溶液备用。
5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤三中，色谱条件为：
6.根据权利要
...【技术特征摘要】
1.一种化妆品中铜肽、六肽-9和生物素酰三肽-1的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述空白试样为空白膏霜基质试样、空白油基基质试样、空白凝胶基质试样、空白水基质试样中的一种。
3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述配制空白基质提取液的具体过程为：精密称取空白试样0.2-0.5g，置于具塞比色管中，加水15-30ml，涡旋30-60s，分散均匀，超声提取20-30min，放至室温，用水定容至刻度，以10000-15000r/min转速...
【专利技术属性】
技术研发人员：许勇，韩晶，郑荣，彭兴盛，
申请(专利权)人：上海市食品药品检验研究院，
类型：发明
国别省市：
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