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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于基因检测,具体涉及一种鉴定人源细胞和小鼠源细胞的方法。
技术介绍
1、细胞作为一种独特的产品,具有自我复制的能力,使得商家有可能进行自行复制后再销售。实验室经常用人源细胞和小鼠源细胞,可以用于制造疫苗,例如流感疫苗和covid-19疫苗。研究人员可以使用这些细胞来生产病毒蛋白,并将其注入动物模型进行动物试验;还可以使用这些细胞来创建三维肿瘤模型,以便更好地理解肿瘤的行为和生长方式。此外,这些细胞也可用于开发抗癌药物,以及对已有的药物进行筛选和测试。总之,人源细胞和小鼠源细胞在实验室中具有广泛的应用价值,对于疾病的研究和治疗具有重要意义。
2、然而,在实验室中,小鼠细胞系的使用频率紧随人源细胞之后,两种来源的细胞难免发生交叉污染的问题,如细胞传代的次数、培养环境的控制以及潜在的交叉污染等,这些都难以得到确切的保障。确保细胞的来源对于实验研究的成功至关重要。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种鉴定人源细胞和小鼠源细胞的方法,通过str技术解决人源细胞和小鼠源细胞难以鉴定的问题。
2、本专利技术的目的可以通过以下技术方案实现:
3、一种鉴定人源细胞和小鼠源细胞的方法,包括如下步骤:
4、步骤一:采用市售基因组dna提取试剂盒获取待鉴定细胞的基因组dna;
5、步骤二:分别筛选6个小鼠源细胞str位点和6个人源细胞的str位点,根据str位点设计引物,将基因组dna进行pcr扩增;
6、步骤三
7、进一步地,荧光标记为fam、hex、tamra和rox中的任意一种。
8、进一步地,引物带荧光标记的正向引物和正常的ssr反向引物。
9、进一步地,6个小鼠源细胞str位点为2-3、4-2、5-5、8-1、11-2和13-2。
10、进一步地,2-3的正向引物的序列如seq id no:1所示,ssr反向引物的序列如seqid no:2所示;
11、4-2的正向引物的序列如seq id no:3所示,ssr反向引物的序列如seq id no:4所示;
12、5-5的正向引物的序列如seq id no:5所示,ssr反向引物的序列如seq id no:6所示;
13、8-1的正向引物的序列如seq id no:7所示,ssr反向引物的序列如seq id no:8所示;
14、11-2的正向引物的序列如seq id no:9所示,ssr反向引物的序列如seq id no:10所示;
15、13-2的正向引物的序列如seq id no:11所示,ssr反向引物的序列如seq id no:12所示;
16、进一步地,6个人源细胞的str位点为d21s11、d2s1138、d3s1358、d5s818、d7s820和d8s1179。
17、进一步地,d21s11的正向引物的序列如seq id no:13所示,ssr反向引物的序列如seq id no:14所示;
18、d2s1138的正向引物的序列如seq id no:15所示,ssr反向引物的序列如seq idno:16所示;
19、d3s1358的正向引物的序列如seq id no:17所示,ssr反向引物的序列如seq idno:18所示;
20、d5s818的正向引物的序列如seq id no:19所示,ssr反向引物的序列如seq idno:20所示;
21、d7s820的正向引物的序列如seq id no:21所示,ssr反向引物的序列如seq idno:22所示;
22、d8s1179的正向引物的序列如seq id no:23所示,ssr反向引物的序列如seq idno:24所示。
23、本专利技术的有益效果:
24、本专利技术鉴定人源细胞和小鼠源细胞的方法,通过对小鼠源细胞和人源细胞的str位点进行筛选,设计出带有荧光标记的正向引物和正常的ssr反向引物,从而对待筛选细胞的基因组dna进行pcr扩增,通过凝胶电泳条带分布和str位点的峰的判断,便于准确、直观的判断待检测细胞的来源;如果其中一个位点出现两个等位基因峰,还可判断待检测细胞存在污染,从而有助于试验研究的顺利进行。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种鉴定人源细胞和小鼠源细胞的方法,其特征在于,包括如下步骤:
2.根据权利要求1所述的一种鉴定人源细胞和小鼠源细胞的方法,其特征在于,所述引物为带荧光标记的正向引物和正常的SSR反向引物。
3.根据权利要求2所述的一种鉴定人源细胞和小鼠源细胞的方法,其特征在于,所述荧光标记为FAM、HEX、TAMRA和ROX中的任意一种。
4.根据权利要求2所述的一种鉴定人源细胞和小鼠源细胞的方法,其特征在于,6个小鼠源细胞STR位点为2-3、4-2、5-5、8-1、11-2和13-2。
5.根据权利要求2所述的一种鉴定人源细胞和小鼠源细胞的方法,其特征在于,6个人源细胞的STR位点为D21 S11、D2S1138、D3S1358、D5S818、D7S820和D8S1179。
6.根据权利要求4所述的一种鉴定人源细胞和小鼠源细胞的方法,其特征在于,2-3的正向引物的序列如SEQ ID NO:1所示,SSR反向引物的序列如SEQ ID NO:2所示;
7.根据权利要求5所述的一种鉴定人源细胞和小鼠源细胞的方法,其特征在于
...【技术特征摘要】
1.一种鉴定人源细胞和小鼠源细胞的方法,其特征在于,包括如下步骤:
2.根据权利要求1所述的一种鉴定人源细胞和小鼠源细胞的方法,其特征在于,所述引物为带荧光标记的正向引物和正常的ssr反向引物。
3.根据权利要求2所述的一种鉴定人源细胞和小鼠源细胞的方法,其特征在于,所述荧光标记为fam、hex、tamra和rox中的任意一种。
4.根据权利要求2所述的一种鉴定人源细胞和小鼠源细胞的方法,其特征在于,6个小鼠源细胞str位点为2-3、4-2、5-5、8-1、11-2和13-2。
5.根据权利要求2所述...
【专利技术属性】
技术研发人员:雍金贵,彭建军,何青,周淮玉,郑宏玲,
申请(专利权)人:通用生物安徽股份有限公司,
类型:发明
国别省市:
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