【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于基因工程，尤其涉及一种环状rnahsa_circ_0010023作为甲状腺乳头状癌标志物的应用方法。
技术介绍
1、甲状腺乳头状癌(ptc)是最常见的甲状腺癌类型，早期准确诊断对于提高患者生存率至关重要。然而，目前常用的诊断方法如细针穿刺细胞学检查(fnac)仍存在一定的假阴性和不确定性。环状rna(circrna)作为一类新型的非编码rna，在多种癌症中异常表达，并有望成为新型的肿瘤标志物。现有技术在甲状腺乳头状癌(ptc)的早期准确诊断方面存在以下技术问题：
2、1.诊断方法的限制
3、细针穿刺细胞学检查(fnac)是当前诊断甲状腺癌的常用方法之一，但该方法存在一定的局限性。fnac在一些情况下产生不确定的或假阴性结果，这导致诊断不准确，从而延误治疗。特别是在肿瘤较小或位于难以穿刺的位置时，fnac的准确性会受到影响。
4、2.缺乏特异性生物标志物
5、虽然一些生物标志物已被用于甲状腺癌的诊断，但许多标志物缺乏足够的特异性和灵敏度，这限制了它们在早期诊断中的应用。特别是在区分良性和恶性甲状腺结节方面，现有的标志物往往无法提供充分的诊断信息。
6、3.对早期和微小病灶的诊断挑战
7、甲状腺癌，特别是ptc，早期时仅表现为微小病灶，这些病灶通过常规影像学检查和fnac难以检测。这对早期诊断和治疗构成挑战，因为早期发现和治疗是提高患者生存率的关键。
8、4.个体化治疗方案的需求
9、甲状腺癌患者之间存在显著的生物学差异，这
10、5.非编码rna在癌症诊断中的潜力未被充分利用
11、近年来的研究揭示了非编码rna，特别是环状rna(circrna)在肿瘤发生发展中的重要作用。这些分子有望成为新型的肿瘤标志物，但目前对它们在甲状腺癌，特别是ptc中的表达和功能的研究还不充分，未能充分利用这些分子在早期诊断和治疗监测中的潜力。
12、现有技术在甲状腺乳头状癌的早期准确诊断方面面临诊断方法的局限性、缺乏特异性生物标志物、早期和微小病灶诊断挑战、个体化治疗方案需求以及非编码rna潜力未被充分利用等技术问题。
技术实现思路
1、针对现有技术存在的问题，本专利技术提供了一种环状rnahsa_circ_0010023作为甲状腺乳头状癌标志物的应用方法。
2、本专利技术是这样实现的，一种环状rnahsa_circ_0010023作为甲状腺乳头状癌标志物的应用方法，该方法具体包括：
3、s1：样本收集，收集ptc患者和健康对照者的血清样本，以及ptc组织和癌旁正常组织样本；
4、s2：circrna提取与检测：采用特定的rna提取方法从血清和组织样本中分离circrna，并利用实时荧光定量pcr(rt-qpcr)技术检测hsa_circ_0010023的表达水平；
5、s3：数据分析：比较ptc患者与健康对照者血清中hsa_circ_0010023的表达差异，以及ptc组织与癌旁正常组织中该circrna的表达情况；分析hsa_circ_0010023表达水平与ptc临床病理特征(如肿瘤大小、分期、淋巴结转移等)的相关性；
6、s4：验证与应用：通过扩大样本量进行验证研究，评估hsa_circ_0010023作为ptc辅助诊断标志物的敏感性和特异性；同时，探索其在ptc预后评估和治疗监测中的潜在应用价值。
7、进一步，所述s1具体包括：
8、s11：患者招募：与医院合作，招募已确诊为甲状腺乳头状癌(ptc)的患者，并收集其血清样本、ptc组织样本及相应的癌旁正常组织样本；同时，招募健康志愿者作为对照组，并收集其血清样本；
9、s12：样本处理：收集到的血清样本在离心后分装至无rna酶的冻存管中，组织样本则立即放入液氮中速冻，后转移至-80℃冰箱长期保存；所有样本的收集和处理均遵循严格的无菌操作规范，以防止rna降解。
10、进一步，所述s2具体包括：
11、(1)rna提取：使用专用的circrna提取试剂盒从血清和组织样本中提取总rna，该试剂盒能有效去除线性rna，富集circrna。提取过程中需遵循试剂盒的操作说明，确保rna的完整性和纯度；
12、(2)rt-qpcr检测：设计针对hsa_circ_0010023的特异性引物，并使用逆转录酶将rna逆转录为cdna；然后，利用实时荧光定量pcr仪进行pcr扩增，通过检测荧光信号的强度变化，实时监测pcr产物的生成量；最后，根据标准曲线计算hsa_circ_0010023的相对表达水平。
13、进一步，所述s3具体包括：
14、(1)表达差异分析：使用统计学软件对ptc患者和健康对照者血清中hsa_circ_0010023的表达水平进行差异分析，比较两组间的表达差异；同时，对ptc组织和癌旁正常组织中的表达情况进行类似的分析；
15、(2)相关性分析：收集ptc患者的临床病理资料，包括肿瘤大小、分期、淋巴结转移等信息；然后，利用相关性分析方法，探讨hsa_circ_0010023表达水平与这些临床病理特征之间的相关性。
16、进一步，所述s4具体包括：
17、(1)验证研究：为了验证hsa_circ_0010023作为ptc标志物的可靠性，需扩大样本量进行验证研究；按照上述方法收集更多ptc患者和健康对照者的血清样本，并检测hsa_circ_0010023的表达水平；然后，通过统计分析评估其敏感性和特异性；
18、(2)预后评估与治疗监测：收集接受手术治疗的ptc患者的术前和术后血清样本，检测hsa_circ_0010023的表达水平变化；同时，收集患者的随访资料，包括复发、转移和生存情况等信息；通过分析hsa_circ_0010023表达水平与患者预后情况的相关性，探索其在预后评估和治疗监测中的潜在应用价值。
19、进一步，所述s1中，血清样本提供了非侵入性的途径来检测循环rna(circrna)。
20、进一步，所述s2中，实时荧光定量pcr(rt-qpcr)技术是一种高灵敏度和高特异性的方法，适用于定量分析rna水平。
21、本专利技术另一目的在于提供一种实施所述环状rnahsa_circ_0010023作为甲状腺乳头状癌标志物的应用方法的环状rnahsa_circ_0010023作为甲状腺乳头状癌标志物的应用研究系统，该系统包括：
22、样本收集模块，用于收集ptc患者和健康对照者的血清样本，以及ptc组织和癌旁正常组织样本；
23、circrna提取与检测模块，与样本收集模块连接，用于采用特定的rna提取方法从血清和组织样本中分本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种环状RNAhsa_circ_0010023作为甲状腺乳头状癌标志物的应用方法，其特征在于，该方法具体包括：
2.如权利要求1所述环状RNAhsa_circ_0010023作为甲状腺乳头状癌标志物的应用方法，其特征在于，所述S1具体包括：
3.如权利要求1所述环状RNAhsa_circ_0010023作为甲状腺乳头状癌标志物的应用方法，其特征在于，所述S2具体包括：
4.如权利要求1所述环状RNAhsa_circ_0010023作为甲状腺乳头状癌标志物的应用方法，其特征在于，所述S3具体包括：
5.如权利要求1所述环状RNAhsa_circ_0010023作为甲状腺乳头状癌标志物的应用方法，其特征在于，所述S4具体包括：
6.如权利要求1所述环状RNAhsa_circ_0010023作为甲状腺乳头状癌标志物的应用方法，其特征在于，所述S1中，血清样本提供了非侵入性的途径来检测循环RNA(circRNA)。
7.如权利要求1所述环状RNAhsa_circ_0010023作为甲状腺乳头状癌标志物的应用方法，
8.一种实施如权利要求1-7任意一项所述环状RNAhsa_circ_0010023作为甲状腺乳头状癌标志物的应用方法的环状RNAhsa_circ_0010023作为甲状腺乳头状癌标志物的应用研究系统，其特征在于，该系统包括：
9.一种计算机设备，其特征在于，所述计算机设备包括存储器和处理器，所述存储器存储有计算机程序，所述计算机程序被所述处理器执行时，使得所述处理器执行如权利要求1-7任意一项所述环状RNAhsa_circ_0010023作为甲状腺乳头状癌标志物的应用方法的步骤。
10.一种计算机可读存储介质，存储有计算机程序，所述计算机程序被处理器执行时，使得所述处理器执行如权利要求1-7任意一项所述环状RNAhsa_circ_0010023作为甲状腺乳头状癌标志物的应用方法的步骤。
...【技术特征摘要】
1.一种环状rnahsa_circ_0010023作为甲状腺乳头状癌标志物的应用方法，其特征在于，该方法具体包括：
2.如权利要求1所述环状rnahsa_circ_0010023作为甲状腺乳头状癌标志物的应用方法，其特征在于，所述s1具体包括：
3.如权利要求1所述环状rnahsa_circ_0010023作为甲状腺乳头状癌标志物的应用方法，其特征在于，所述s2具体包括：
4.如权利要求1所述环状rnahsa_circ_0010023作为甲状腺乳头状癌标志物的应用方法，其特征在于，所述s3具体包括：
5.如权利要求1所述环状rnahsa_circ_0010023作为甲状腺乳头状癌标志物的应用方法，其特征在于，所述s4具体包括：
6.如权利要求1所述环状rnahsa_circ_0010023作为甲状腺乳头状癌标志物的应用方法，其特征在于，所述s1中，血清样本提供了非侵入性的途径来检测循环rna(circrna)。
7.如权利要求1所述环状rn...
【专利技术属性】
技术研发人员：金萍，王玉君，汪凌昊，管高鹏，
申请(专利权)人：中南大学湘雅三医院，
类型：发明
国别省市：
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