【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及免疫学和再生医学领域，具体地涉及促进骨形成和血管生成的中性粒细胞及其制备方法和应用。
技术介绍
1、随着对免疫系统研究的深入，近几年通过免疫细胞调控组织再生修复已成为研究热点。有研究表明免疫反应是调控组织再生的重要因素。其中免疫细胞促进修复的作用被逐渐认识到。然而，目前对修复型免疫细胞的认识主要集中在巨噬细胞。而中性粒细胞被普遍认为是组织损伤发生时清除坏死组织，引发炎症反应的免疫细胞，对其促修复功能的研究较少，导致如何更好地利用免疫细胞的调控作用促进组织修复还不够清楚。修复型中性粒细胞对临床修复受损组织可能存在重要影响。
2、目前有研究人员利用巨噬细胞外泌体促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化。不过，利用巨噬细胞外泌体可以促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化未经过动物实验验证，临床效果的稳定性难以保证。
3、此外，也有报道利用人羊膜间充质干细胞的免疫调节作用优化骨缺损微环境，促血管化骨再生的m2巨噬细胞聚集，分泌促血管新生和成骨活性因子，刺激内源性骨再生。不过，所使用的人羊膜间充质干细胞来源是无传染性疾病剖宫产新鲜胎盘组织，其来源少，且涉及到剖宫产患者的知情同意及伦理要求，因此其临床推广和应用受到限制。
4、
技术介绍
中的信息仅仅在于说明本专利技术的总体背景，不应视为承认或以任何形式暗示这些信息构成本领域一般技术人员所公知的现有技术。
技术实现思路
1、为解决现有技术中的至少部分技术问题，本专利技术提供一种修复型中性粒细胞的分类、诱导活化
2、本专利技术的一个方面，提供一种促进血管生成的中性粒细胞或其分离物，所述中性粒细胞为cd45+ly6g+cd54+cd274+glut1+细胞亚群，其在物理电刺激诱导后促进血管生成。
3、在某些实施方案中，根据本专利技术所述的促进血管生成的中性粒细胞或其分离物，其中，所述血管生成包括下述性质之一：
4、(1)血管调控相关基因的表达量或相关蛋白的量升高；
5、(2)总管长度、连接点数量和管腔数目至少之一增多；
6、(3)血管延伸长度增加或出芽增多；
7、(4)血管管腔体积增大。
8、在某些实施方案中，根据本专利技术所述的促进血管生成的中性粒细胞或其分离物，其中，所述血管调控相关基因包括cxcl16、mmp9、vegf、proliferin和osteopontin中的至少之一。
9、在某些实施方案中，根据本专利技术所述的促进血管生成的中性粒细胞或其分离物，其中，所述分离物包括细胞裂解物、分泌物，或其组分。
10、本专利技术的一个方面，提供一种用于促进血管生成的组合物，其包含本文所述的促进血管生成的中性粒细胞或其分离物。
11、在某些实施方案中，根据本专利技术所述的用于促进血管生成的组合物，其中，所述血管生成包括体外管腔生成、体内组织修复早期血管化或其成熟。
12、本专利技术的一个方面，提供本文所述的促进血管生成的中性粒细胞或其分离物在制备用于促进血管生成的组合物中的用途。
13、本专利技术的一个方面，提供一种体外促进血管生成的方法，其包括使本文所述的促进血管生成的中性粒细胞或其分离物在体外与细胞接触的步骤。
14、在某些实施方案中，根据本专利技术所述的体外促进血管生成的方法，其中，所述血管生成包括体外管腔生成。
15、在某些实施方案中，根据本专利技术所述的促进血管生成的中性粒细胞或其分离物的制备方法，其包括分离或筛选cd45+ly6g+cd54+cd274+glut1+细胞亚群的步骤，或通过基因工程手段在中性粒细胞内过表达cd54、cd274和glut1的步骤。
16、在某些实施方案中，根据本专利技术所述的促进血管生成的中性粒细胞或其分离物，其中，所述中性粒细胞分离自骨髓。
17、在某些实施方案中，根据本专利技术所述的促进血管生成的中性粒细胞或其分离物，其中，所述中性粒细胞分离自外周血。
18、在某些实施方案中，根据本专利技术所述的促进血管生成的中性粒细胞或其分离物，其中，所述物理电刺激为20μa-70μa。
19、本专利技术的一个方面，提供一种促进骨形成的中性粒细胞或其分离物，所述中性粒细胞为cd45+ly6g+cd54+cd274+glut1+细胞亚群，其在物理电刺激诱导后促进骨形成。
20、在某些实施方案中，根据本专利技术所述的中性粒细胞或其分离物，其中，所述骨形成包括下述性质之一：
21、(1)骨再生或加快骨再生速度；
22、(2)新的骨骼的形成；
23、(3)骨体积分数增加；
24、(4)骨密度增加。
25、在某些实施方案中，根据本专利技术所述的中性粒细胞或其分离物，其中，所述骨形成进一步包括增加血管调控相关基因的表达量或相关蛋白的量。
26、在某些实施方案中，根据本专利技术所述的中性粒细胞或其分离物，其中，所述血管调控相关基因包括cxcl16、mmp9、vegf、proliferin和osteopontin中的至少之一。
27、在某些实施方案中，根据本专利技术所述的中性粒细胞或其分离物，其中，所述分离物包括细胞裂解物、分泌物，或其组分。
28、在某些实施方案中，根据本专利技术所述的中性粒细胞或其分离物，其中，通过包括下述中的至少一种产生所述电刺激：带电基质、导电基质、直流电、交流电、脉冲电、磁电、压电或铁电活性材料。
29、本专利技术的一个方面，提供一种用于促进骨形成的组合物，其包含本文所述的促进骨形成的中性粒细胞或其分离物。
30、本专利技术的一个方面，提供根据本专利技术所述的促进骨形成的中性粒细胞或其分离物在制备用于促进骨形成的组合物中的用途。
31、在某些实施方案中，根据本专利技术所述的促进骨形成的中性粒细胞或其分离物的制备方法，其中，包括使用试剂分离或筛选cd45+ly6g+cd54+cd274+glut1+细胞亚群的步骤，或通过基因工程手段在中性粒细胞内过表达cd54、cd274和glut1的步骤。
32、在某些实施方案中，根据本专利技术所述的促进骨形成的中性粒细胞或其分离物的制备方法，其中，所述试剂包括抗体。
33、在某些实施方案中，根据本专利技术所述的促进骨形成的中性粒细胞或其分离物，其中，所述中性粒细胞分离自骨髓。
34、在某些实施方案中，根据本专利技术所述的促进骨形成的中性粒细胞或其分离物，其中，所述中性粒细胞分离自外周血。
35、在某些实施方案中，根据本专利技术所述的促进骨形成的中性粒细胞或其分离物，其中，所述物理电刺激为20μa-70μa。
36、本专利技术的一个方面，提供一种用于促进骨修复的细胞组合物，其包括免疫细胞或其分离物和/或内皮细胞或其分离物。
37、在某些实施方案中，根据本专利技术所述的细胞组合物，其中，所述免疫细胞为中性粒细胞。
38本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种促进血管生成和/或骨形成的中性粒细胞或其分离物，其特征在于，所述中性粒细胞为CD45+Ly6G+CD54+CD274+GLUT1+细胞亚群，其在物理电刺激诱导后促进血管生成。
2.根据权利要求1所述的促进血管生成和/或骨形成的中性粒细胞或其分离物，其特征在于，所述血管生成包括下述性质之一：
3.根据权利要求2所述的促进血管生成和/或骨形成的中性粒细胞或其分离物，其特征在于，所述分离物包括细胞裂解物、分泌物，或其组分。
4.根据权利要求1-3任一项所述的促进血管生成和/或骨形成的中性粒细胞或其分离物，其特征在于，通过选自带电基质、导电基质、直流电、交流电、脉冲电、磁电、压电和铁电活性材料中的至少一种产生所述电刺激；
5.一种用于促进血管生成和/或骨形成的组合物，其特征在于，其包含权利要求1-4任一项所述的中性粒细胞或其分离物。
6.一种体外促进血管生成的方法，其特征在于，使权利要求1-4任一项所述的中性粒细胞或其分离物在体外与细胞接触的步骤；
7.根据权利要求1-4任一项所述的中性粒细胞或其分离物的制备
8.根据权利要求1-4任一项所述的中性粒细胞或其分离物的用途，其特征在于，所述用途包括：制备用于促进血管生成的药物，或制备用于促进骨形成的组合物中的用途。
9.TESP在制备用于激活包含权利要求1-4任一项所述的中性粒细胞或其分离物的电刺激骨愈合敷料中的用途；
10.电疗装置联合中性粒细胞亚群在用于制备促进血管生成和/或骨愈合的装置或系统中的用途，其特征在于，所述电疗装置包括能够提供物理电刺激的模块或组件，其中，所述模块或组件设置为能够提供20μA-70μA的物理电刺激，从而活化中性粒细胞亚群，促进血管生成和/或骨愈合，其中，所述中性粒细胞亚群为权利要求1-4任一项所述的中性粒细胞或其分离物。
...【技术特征摘要】
1.一种促进血管生成和/或骨形成的中性粒细胞或其分离物，其特征在于，所述中性粒细胞为cd45+ly6g+cd54+cd274+glut1+细胞亚群，其在物理电刺激诱导后促进血管生成。
2.根据权利要求1所述的促进血管生成和/或骨形成的中性粒细胞或其分离物，其特征在于，所述血管生成包括下述性质之一：
3.根据权利要求2所述的促进血管生成和/或骨形成的中性粒细胞或其分离物，其特征在于，所述分离物包括细胞裂解物、分泌物，或其组分。
4.根据权利要求1-3任一项所述的促进血管生成和/或骨形成的中性粒细胞或其分离物，其特征在于，通过选自带电基质、导电基质、直流电、交流电、脉冲电、磁电、压电和铁电活性材料中的至少一种产生所述电刺激；
5.一种用于促进血管生成和/或骨形成的组合物，其特征在于，其包含权利要求1-4任一项所述的中性粒细胞或其分离物。
6.一种体外促进血管生成的方法，其特征在于，使权利要求1-4任一项所述的中性粒细胞或其分离物在体外与细胞接...
【专利技术属性】
技术研发人员：张学慧，邓旭亮，游富平，李会，周岩，郑晓娜，郭亚茹，
申请(专利权)人：北京大学口腔医学院，
类型：发明
国别省市：
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