连接到杯芳烃上的生长因子结合化合物制造技术

本发明专利技术公开了具有多个连接到非肽有机骨架上的无环间苯二酸基团的生长因子结合化合物及其药物组合物。还教导了该生长因子结合化合物或生长因子结合组合物的给药和使用方法。这些新型的生长因子结合化合物可用于治疗血管生成、过度细胞增殖、肿瘤生长及其组合，并且抑制生长因子与细胞的结合和磷酸化。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】连接到杯芳烃上的生长因子结合化合物                    相关申请的交叉参考本申请要求2004年1月27日提交的美国临时申请第60/539,613号的优先权，其全文(包括任何图、表、核酸序列、氨基酸序列和附图)在此引入作为参考。本专利技术是借助政府资助，在National Institute of Health/NationalCancer Institute Grant第CA78038号资助的研究项目下进行的。联邦政府对本专利技术享有一定的权利。专利技术背景肿瘤生长至体积超过几立方毫米的能力依赖于在这些肿瘤的微环境中新血管的形成(Ferrara，N.Nat Rev Cancer，2002，2：795-803；Kerbel，R.S.Carcinogenesis，2000，21：505-15；Carmeliet，P.和Jain，R.K.Nature，2000，407：249-57；Yancopoulos，G.D.等人Nature，2000，407：242-8)。这种血管生成过程是由肿瘤分泌的几种关键生长因子引发的。这些生长因子不仅在内皮细胞上结合它们的受体并刺激它们的增殖(这引发新血管的形成)，还在保持血管完整性的佐细胞(例如周细胞)上结合受体(Ferrara，N.NatRev Cancer，2002，2：795-803；Kerbel，R.S.Carcinogenesis，2000，21：505-15；Carmeliet，P.和Jain，R.K.Nature，2000，407：249-57；Yancopoulos，G.D.等人Nature，2000，407：242-8；Helmlinger，G.，等人Nat Med，1997，3：177-82；Holash，J.等人Science，1999，284：1994-8)。最常被研究的生长因子包括血管内皮生长因子(VEGF)和血小板衍生生长因子(PDGF)。一些研究已经证实，这两种生长因子参与了血管生成过程，其中VEGF主要在引发新血管的形成中发挥关键作用，而PDGF参与了这些血管的维持(Bergers，G.等人J Clin Invest，2003，111：1287-95；Dvorak，H.F.J Clin-->Oncol，2002，20：4368-80；Ferrara，N.Curr Top Microbioi Immunol，1999，237：1-30；Dvorak，H.F.等人Curr Top Microbiol Immunol，1999，237：97-132；Eriksson，U.和Alitalo，K.Curr Top Microbiol Immunol，1999，237：41-57)。这种观察结果激起了人们对设计抑制VEGF及PDGF功能的方案(其最终目的是抑制血管生成和饿死肿瘤)的兴趣。已采用的方法是基于靶向这些生长因子作用机制中包含的生物化学步骤。这些方法包括使用这些生物因子的抗体来抑制VEGF和PDGF与其各自受体的结合。这些抗体之一，AVASTIN(其靶向VEGF)目前已被批准临床用于转移性结直肠癌患者(Zhang，W.等人Angiogenesis，2002，5：35-44；Ferrara，N.Semin Oncol，2002，29：10-4)。另一方法涉及PDGF和VEGF受体的酪氨酸激酶活性抑制剂的开发，从而抑制这些生长因子引发的下游信号转导途径(Kerbel，R.S.Carcinogenesis，2000，21：505-15；Jain，R.K.Semin Oncol，2002，29：3-9；Morin，M.J.Oncogene，2000，19：6574-83；Miao，R.Q.等人Blood，2002，100：3245-52；Laird，A.D.等人Cancer Res，2000，60：4152-60；Wedge，S.R.等人Cancer Res，2000，60：970-5)。这些试剂多数模拟ATP的结构，并且一些是目前在临床试验中有效的抗癌剂。然而，它们都还没有被FDA批准。AVASTIN(贝伐单抗(bevacizumab))(其将转移性结直肠癌患者的中位生存期提高5个月)的FDA批准，进一步证实了靶向血管生成过程的方案为一种癌症的治疗方法(Ferrara，N.Semin Oncol，2002，29：10-4)。然而，需要进行更多研究以充分开发该方法。例如，在其他临床试验中，AVASTIN不能延长转移性乳癌患者的寿命。对这种矛盾的活性的一种可能解释在于，晚期转移性乳癌可能通过其他生长因子避开了抗-VEGF血管生成疗法。实际上，对该意见的支持来自临床前研究，其表明早期乳癌主要分泌VEGF，而晚期乳癌还分泌其他生长因子(Relf，M.等人Cancer Res，1997，57：963-9)。此外，在动物胰腺癌模型中，SU5416，一种VEGF受体酪氨酸激酶抑制剂，抑制了胰腺癌的早期发展，但没有抑制-->晚期发展。更重要地是，在相同模型中用SU6668(其同时抑制VEGF和PDGF受体酪氨酸激酶)进行的治疗，引起晚期胰腺癌在发展晚期的消退(Bergers，G.等人J Clin Invest，2003，111：1287-95)，这表明抗-VEGF治疗法的失败可能是由于其仅抑制血管的开始而不能抑制血管维持。对该意见的进一步支持来自最近的研究，其中在成神经细胞瘤细胞移植到小鼠肾脏上的动物模型中，AVASTIN抑制了新血管的生成，但是对于抑制已经形成的血管是无效的(Huang，J.等人Proc Natl Acad Sci美国，2003，100：7785-90)。综上所述，目前对血管生成过程的理解暗示，同时靶向引发血管开始的生长因子(即，VEGF)和维持血管的生长因子(即，PDGF)是比仅靶向一种生长因子更有效的癌症治疗方法。专利技术概述本专利技术的一个目的是设计一类化合物，其与VEGF和/或PDGF结合，并抑制这些生长因子与其各自的细胞表面受体结合。例如，发现化合物GFB204是VEGF-和PDGF-刺激的其受体酪氨酸激酶磷酸化和信号传导(Erk1/2，Akt和STAT3)的有效和选择性抑制剂。这种试剂还有效地抑制了体外内皮细胞移动和毛细血管网形成，以及在裸鼠异种移植物中体内的血管生成和人类肿瘤生长。本专利技术的进一步目的是提供上述类型的化合物的药物组合物及其施用方法。附图简述图1显示了本专利技术的GFB204的结构，其含有连接到非肽有机骨架(scaffold)上的无环间苯二酸基团，以及GFB-111的结构。图2A-2C表明，GFB204在小鼠成纤维细胞中抑制125I-VEGF和125I-PDGF但不抑制125I-EGF结合到它们的受体上。分别用125I-VEGF、125I-PDGF和125I-EGF(50000cpm/孔)与浓度递增的GFB204一起培养Flk-1/NIH 3T3、NIH 3T3和EGFR/NIH 3T3细胞。在如“材料和方法”-->中所述，在测定125I计数之前将细胞在4℃培养0.5小时，然后用PBS洗涤三次并用裂解缓冲剂洗涤三次。使用过量冷VEGF、PDGF和EGF获得非特异性结合水平。图2A-2C分别显示了PD本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种生长因子结合化合物，其包含多个连接到非肽有机骨架上的无环间苯二酸基团。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】US 2004-1-27 60/539,6131.一种生长因子结合化合物，其包含多个连接到非肽有机骨架上的无环间苯二酸基团。2.根据权利要求1所述的生长因子结合化合物，其中每个所述无环间苯二酸基团用酸性团或疏水基官能化。3.根据权利要求1所述的生长因子结合化合物，其中所述非肽有机骨架是杯芳烃。4.根据权利要求1所述的生长因子结合化合物，其中所述非肽有机骨架是杯[4]芳烃。5.根据权利要求1所述的生长因子结合化合物，其中所述多个间苯二酸基团连接到符合结构(I)的非肽有机骨架上：其中每个R1独立地选自：-->其中每个R2独立地选自：6.根据权利要求1所述的生长因子结合化合物，其中所述化合物选自GFB201、GFB202、GFB203、GFB204、GFB205、GFB206、GFB207、GFB208、GFB209、GFB210、GFB211、GFB212、GFB213、GFB214、GFB215、GFB216、GFB217、GFB218和GFB219。7.根据权利要求1所述的生长因子结合化合物，其中所述化合物靶向血小板衍生生长因子、血管内皮生长因子或其两者。8.一种药物组合物，其包含一种或多种生长因子结合化合物或任何所-->述生长因子结合化合物的可药用盐及可药用载体；其中所述生长因子结合化合物包含多个连接到非肽有机骨架上的无环间苯二酸基团。9.根据权利要求8所述的药物组合物，其中每个所述无环间苯二酸基团用酸性团或疏水基官能化。10.根据权利要求8所述的药物组合物，其中所述非肽有机骨架是杯芳烃。11.根据权利要求8所述的药物组合物，其中所述非肽有机骨架是杯[4]芳烃。12.根据权利要求8所述的药物组合物，其中所述多个间苯二酸基团连接到符合结构(I)的非肽有机骨架上：其中每个R1独立地选自：其中每个R2独立地选自：-->13.根据权利要求8所述的药物组合物，其中每种所述生长因子结合化合物选自GFB201、GFB202、GFB203、GFB204、GFB205、GFB206、GFB207、GFB208、GFB209、GFB210、GFB211、GFB212、GFB213、-->GFB214、GFB215、GFB216、GFB217、GFB218和GFB219。14.根据权利要求8所述的药物组合物，其中每种所述生长因子结合化合物靶向血小板衍生生长因子、血管内皮生长因子或其两者。15.根据权利要求8所述的药物组合物，其进一步包含生物活性剂。16.一种治疗患有下述疾病的患者的方法，所述疾病包括过度细胞增殖、过度血管生成、肿瘤或上述任何疾病的组合，其中所述方法包括施用有效量的药物组合物，其中所述药物组合物包含至少一种生长因子结合化合物或任何所述生长因子结合化合物的可药用盐及可药用载体；或一种或多种生长因子化合物，其中所述生...

【专利技术属性】
技术研发人员：SM塞卜蒂，AD汉密尔顿，R贾殷，
申请(专利权)人：南佛罗里达大学，耶鲁大学，
类型：发明
国别省市：US[美国]