本发明专利技术涉及一株海洋珊瑚来源的绿藻及其分离、鉴定与应用。所述绿藻的保藏信息如下：保藏单位名称：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所；保藏日期：2023年6月7日；保藏编号：CGMCC No.40682；分类命名：Symbiochloris sp.。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及海洋珊瑚共生藻研究领域，具体涉及一株海洋珊瑚来源的绿藻及其分离、鉴定与应用。
技术介绍
1、珊瑚礁是由珊瑚等生物作用产生碳酸钙积累和生物骨壳及其碎屑沉积而成，其中珊瑚以及少数其他腔肠动物、软体动物与某些藻类的共生对珊瑚礁石灰岩基质的形成起重要作用。全球约110个国家拥有珊瑚礁资源，其总面积约占全球海域面积的0.1％-0.5％，但已记录的礁栖生物却占到海洋生物总数的30％。在目前已知的所有海洋生态系统中，珊瑚礁生态系统生物多样性最高，属高生产力生态系统，被誉为“海洋中的热带雨林”。珊瑚礁生态系统不仅为人类的生产和生活提供了各种生物资源，而且具有巨大的生态功能、生态价值、综合开发利用价值，对保障海洋生物多样性、生物生产力和生态平衡具有重要作用。特别是珊瑚礁生物资源已经成为现代海洋药物研发的热点资源。然而，由于遭受人为和自然的双重压力，世界范围内的珊瑚礁正面临严重的退化，中国珊瑚礁资源退化更为严重。其中珊瑚个体的造礁能力及抵抗环境压力的能力与其共生的藻类密切相关。珊瑚为其共生的藻类提供无机盐及生活场所，而共生的藻类通过光合作用为珊瑚提供营养。与珊瑚共生的藻类包括共生虫黄藻、虫绿藻、虫蓝藻等。这些珊瑚共生藻类在长期的进化过程中，与珊瑚宿主形成了互惠的共生关系，共同影响珊瑚生长、发育、造礁能力。在全球气候变化(特别是全球海水升温酸化)以及人类活动双重压力下，珊瑚共生藻会排出珊瑚体内，导致珊瑚白化，死亡及生态功能的丧失。因此，认识珊瑚与不同藻的共生关系，对珊瑚个体发育与繁殖、健康状况、珊瑚礁人工重建具有重要意义。
/>技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种珊瑚来源绿藻symbiochloris sp strain mj1069及其分离、鉴定与应用。为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
2、本专利技术提供一种海洋芽枝鹿角珊瑚来源绿藻mj1069，其特征在于所述绿藻mj1069的保藏信息如下：保藏单位名称：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所；保藏日期：2023年6月7日；保藏编号：cgmcc no.40682；分类命名：symbiochloris sp.。
3、本专利技术的另一实施方案提供了所述绿藻mj1069在防治和/或修复海洋酸化导致的珊瑚白化中的应用。
4、本专利技术的另一实施方案提供所述绿藻mj1069在珊瑚人工培育或珊瑚礁重建中的用途。
5、本专利技术的另一实施方案提供了所述绿藻mj1069的分离纯化和离体培养方法，其特征在于包括如下步骤：
6、s1、南海美济礁的芽枝鹿角珊瑚，先用灭菌海水冲洗芽枝鹿角珊瑚，再用珊瑚剪将其剪成小块状，再将珊瑚组织研磨，加入2ml灭菌海水，用40μm尼龙网过滤去除杂志，收集滤液；
7、s2、将1ml滤液置于25cm3细胞培养瓶(含有20ml的f/2液体培养基，含卡那霉素为50μg/ml、氨苄青霉素为100μg/ml、链霉素为50μg/ml、两性霉素b为2.5μg/ml)中进行预培养，培养温度为25℃，光照强度50μmol/(m2·s)，培养时间为10～15天；
8、s3、另取200μl的s1步骤滤液涂布到含有f/2培养基的固体平板(含有抗生素卡那霉素为50μg/ml、氨苄青霉素为100μg/ml、链霉素为50μg/ml、两性霉素b为2.5μg/ml)，于25℃培养30-60天，光照强度为50μmol/(m2·s)；
9、s4、挑取所述固体培养基长出的藻落到灭菌的asp-8a培养液中培养至对数生长期，获得微藻种子液；
10、s5、将s2经过预培养的微藻种子液接种到灭菌的f/2培养液中进行培养，培养10天后，继续涂布于含有f/2培养基的固体平板(含有抗生素卡那霉素为50μg/ml、氨苄青霉素为100μg/ml、链霉素为50μg/ml、两性霉素b为2.5μg/ml)，于25℃培养30-60天，光照强度为50μmol/(m2·s)进行分离。
11、s6、待s3、s4、s5固体平板长出藻落，再进行划线分离培养，于25℃培养30-60天，光照强度为50μmol/(m2·s)，直至长处单克隆藻落，再进行后续鉴定。
12、本专利技术根据珊瑚与共生藻的特点和相应生理机制，针对性地对芽枝鹿角珊瑚共生藻——绿藻mj1069，进行了分离，纯化和体外培养，根据其紧密地共生关系，在培养初期不进行杂质的去除，以保证藻体能逐渐适应体外培养的环境，在进入指数增长期后，再进行分离纯化，得到了纯净的共生绿藻mj1069。本专利技术为推进共生藻生理功能，珊瑚与共生藻的共生关系研究，为保护珊瑚礁生态系统，提供全新的藻种。
13、本专利技术所述绿藻m1069在以f/2培养基为基础营养盐培养基培养时，藻细胞呈球状，最大细胞直径达15μm，最小细胞直径才5μm，直径在5-15μm之间，每个细胞内有多个周生叶绿体，具有1个细胞核，具有1个蛋白核；细胞壁为100nm左右。另外，该微藻可通过静孢子囊繁殖，静孢子囊大小在5-20μm之间，具有较厚的细胞壁，内部包含多个静孢子。在生理特性中，该藻表现出明显的耐酸性，能够在低ph 5.0下正常生长。这些特性是该藻在未来研究中的重点，能为珊瑚共生关系、海洋酸化下珊瑚保护提供很好的科研材料，在海洋酸化背景下珊瑚白化的恢复过程中或许具有潜在应用价值。
14、与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：本专利技术提供的绿藻m1069与已报道的珊瑚共生藻及已发表的其它微藻藻种相比在新态特征及进化方面具有显著差异，为一藻类新种。通过本专利技术的分离培养方法，实现了该微藻在实验室的纯化培养，该藻为研究海洋藻类功能以及该藻与珊瑚可能的共生关系提供了良好的研究材料，该藻也可能在珊瑚人工培育、珊瑚礁重建、新型藻类材料等方面具有应用潜力。
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【技术保护点】
1.一种海洋芽枝鹿角珊瑚来源绿藻MJ1069，其特征在于所述绿藻MJ1069的保藏信息如下：保藏单位名称：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所；保藏日期：2023年6月7日；保藏编号：CGMCC No.40682；分类命名：Symbiochloris sp.。
2.权利要求1所述的绿藻MJ1069在防治和/或修复海洋酸化导致的珊瑚白化中的应用。
3.权利要求1所述的绿藻MJ1069在珊瑚人工培育或珊瑚礁重建中的应用。
4.权利要求1所述绿藻MJ1069的分离纯化和离体培养方法，其特征在于包括如下步骤：
【技术特征摘要】
1.一种海洋芽枝鹿角珊瑚来源绿藻mj1069，其特征在于所述绿藻mj1069的保藏信息如下：保藏单位名称：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所；保藏日期：2023年6月7日；保藏编号：cgmcc no.40682；分类命名：symbi...
【专利技术属性】
技术研发人员：魏力，王荣，冯梦，高祥琛，朱涵，
申请(专利权)人：海南师范大学，
类型：发明
国别省市：
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