一种繁殖甘蓝型油菜自交不亲和系的方法技术

本发明专利技术属于油菜育种领域，具体涉及一种繁殖甘蓝型油菜自交不亲和系的方法。本发明专利技术针对甘蓝型油菜自交不亲和系因大量繁殖困难而限制自交不亲和杂种大面积推广的问题，利用ＮａＣｌ溶液＋蜜蜂辅助授粉和系统选择方法克服甘蓝型油菜自交不亲和系的繁殖障碍，采用早播、稀植、高肥等措施培育多分枝的大株型甘蓝型油菜自交不亲和系，采用品质分析和亲和性鉴定等选择方法得到甘蓝型油菜自交不亲和系原原种，进一步得到甘蓝型油菜自交不亲和系原种。本发明专利技术为甘蓝型油菜自交不亲和系的大量繁殖提出了一种简单，有效的方法，促进了甘蓝型油菜自交不亲和性杂种优势的利用。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于油菜育种领域，具体涉及一种繁殖甘蓝型油菜自交不亲和系的方法。
技术介绍
优质(低芥酸、低硫苷)+杂优(杂种优势)育种是国内外油菜育种的发展方向。 利用杂种优势的前提是有能够大量生产杂交种种子的系统(或途径)。自交不亲和系统具 有选育周期短、恢复源广、无不良细胞质效应等优点，是甘蓝型油菜杂种优势利用的一个 重要途径。二十世纪八十年代初，我国科学家就利用自交不亲和系、自交不亲和保持系禾C 自交不亲和恢复系得到了甘蓝型油菜自交不亲和三系杂交种(刘后利等，甘蓝型油菜自交 不亲和系保持系及其恢复系的选育初报，华中农学院学报，1981 (3): 9-17)，但是繁殖 甘蓝型自交不亲和系方法的缺乏限制了自交不亲和杂种在生产上的大面积推广。甘蓝型油 菜自交不亲和系自交和兄妹交都不结实。虽然可以利用剥蕾授粉法、电助授粉法、热助授 粉法和C02处理(傅廷栋主编，杂交油菜的育种与利用，武汉，湖北科学技术出版社， 1995)等方法来繁殖和保存甘蓝型油菜自交不亲和系，但这些方法费工费时、成本高、技 术要求严格，且实施比较困难，大面积应用受到限制。已有研究表明，利用适宜浓度的盐 水对花期的甘蓝型油菜自交不亲和系植株进行喷施，可以收到一定的效果。安彩泰等报道 了利用盐水(NaCl)溶液可以克服芸苔属作物的自交不亲和性(安彩泰等，用化学方、法 克服油菜等芸薹属作物自交不亲和性的研究，甘肃农业大学学报，1989 (4): 29-35); f疾 国佐等从单因子试验角度，报道了利用NaCl溶液克服甘蓝型油菜自交不亲和系不亲和'牲 的方法，但是对甘蓝型油菜自交不亲和系的繁殖的具体步骤并未涉及(候国佐等，NaCl 溶液克服甘蓝型油菜自交不亲和系不亲和性的研究种子，I卯9 (2): 9-11)。由于甘蓝型 油菜自交不亲和系的繁殖涉及一系列原原种和原种的培育及选择等关键步骤，而目前国内 外还没有这方面的报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术的缺陷，提出一种简单、有效繁殖甘蓝型油菜自交不 亲和系的方法，以解决甘蓝型油菜自交不亲和系的原原种和原种的大量繁殖问题，加快甘藍 型油菜自交不亲和性杂种优势的开发利用。本专利技术通过以下技术方案实现一种甘蓝型油菜自交不亲和系的快速繁殖方法，其步骤如下 1、 一种甘蓝型油菜自交不亲和系的快速繁殖方法，其步骤如下(1) 在中国长江中下游的冬油菜地区于每年的8月下旬至9月上旬隔离条件下播种甘蓝 型油菜自交不亲和系S-1300,设株、行距分别为2米和1米，培育尽可能多分枝的大侏型甘蓝型油菜自交不亲和系，于该自交不亲和系的蕾薹期用60目的尼龙纱帐套住每一个 甘蓝型油菜自交不亲和系S-1300单株，在尼龙纱帐内配置蜜蜂辅助授粉；对该自交不亲 和系的主花序套袋，使其自交，鉴定该自交不亲和系植株的亲和性；(2) 在甘蓝型油菜自交不亲和系S-1300的开花期，对隔离条件下的甘蓝型油菜自交不 亲和系S-1300植株每天上午喷施3%NaCi溶液1次，累计喷20-30次(每天1次)；(3) 在甘蓝型油菜自交不亲和系S-1300的成熟期分单株收获所述自交不亲和系的种子， 按亲和指数=籽粒数/花朵数的公式计算亲和指数，淘汰亲和指数大于2的植株，分析每一 单株种子的芥酸和硫苷含量，选芥酸含量小于1%、硫苷含量小于30umol/g植株的种子《乍 为原原种，保存在-2(TC冰箱中备用，得到甘蓝型油菜自交不亲和系原原种；(4) 在下一个繁殖季节继续在隔离条件下播种步骤(3)的原原种，并在所述的自交不亲 和系的开花期每天上午喷施3。/。的NaCl溶液l次，共喷20-30次，配置蜜蜂辅助授粉，收 获得到作为生产上应用的甘蓝型油菜自交不亲和系原种。本专利技术的优点在于1、 本专利技术属于一种繁殖甘蓝型油菜自交不亲和系的方法，克服了传统繁殖甘蓝型油 菜自交不亲和系方法的困难，其操作简单，且不受气候条件的影响。2、 通过培育分枝数多的甘蓝型油菜自交不亲和植株， 一次就可以得到足够多的If、 原种种子，供多年繁殖原种使用，不需要每年生产原原种，也不需要每年检查原原种的亲 和性，从而简化了育种的工序，节约了育种的时间，大大提高育种的效率。3、 本专利技术的方法采取-20'C冰箱保存甘蓝型油菜自交不亲和系的种子，克服了原If、 种年年繁殖引起的自交衰退，并保证了原原种的纯度。避免了田间杂油菜花粉影响甘蓝型油菜自交不亲和系植株的不亲和性。更详细的技术方案见《具体实施方式》。附图说明图1:是本专利技术的技术路线图。4图2:在隔离棚内未采用本专利技术方法的甘蓝型油菜自交不亲和系S-UOO几乎不结籽。图3:采用本专利技术的方法繁殖甘蓝型油菜自交不亲和系S-1300的效果对比，图左边为NaCl 溶液加蜜蜂辅助授粉处理的S-1300，表现为正常结籽；图右边为未处理的S-1300(对 照)，表现为几乎不结籽，花而不实。图4:用本专利技术繁殖的甘蓝型油菜自交不亲和系S-1300原种用于杂交油菜制种现场。具体实施例方式实施例l(1)采用早播的方式(即比中国长江中下游地区冬油菜正常播种时间的9月下旬至10 月上旬提前20天左右，即播种期定为每年的8月下旬至9月上旬)在隔离棚条件下播禾中 甘蓝型油菜自交不亲和系S-1300 (S-1300来源见马朝芝等，甘蓝型油菜双低自交不亲和 系的选育，华中农业大学学报，1998， 17(3): 211-213)。设计株距为2米，行距为1米， 底肥为有机肥拌和化学肥料，施用量为常规栽培方法的3倍(常规栽培方法每公顷化学月巴 料施用量为碳酸氢铵300-375kg，过磷酸钙225-375kg，草木灰2250kg或硫酸钾75-150kg ， 硼砂7.5kg，参见杨文钰，屠乃美主编，作物栽培学各论，中国农业出版社，2003,212-213)， 培育分枝多的大株型甘蓝型油菜自交不亲和系。于甘蓝型油菜自交不亲和系S-1300的蕾 薹期(现蕾至初花)用60目的尼龙纱帐套住每一个甘蓝型油菜自交不亲和系S-1300单株， 在尼龙纱帐内配置蜜峰辅助传粉；对主花序进行套袋，使其自交，以鉴定该自交不亲和系 植株的亲和性；(2) 在甘蓝型油菜自交不亲和系S-1300的开花期(从油菜的始花期至终花期)对种植 在隔离条件下的甘蓝型油菜自交不亲和系S-1300植株每天上午喷施1次3%的NaCl溶液， 累计喷20-30次；(3) 在成熟期分单株收获所述甘蓝型油菜自交不亲和系S-1300的种子，计算亲和指数 (计算公式为亲和指数=籽粒数/花朵数，方法参见华中农学院作物育种组油菜科研纟且，甘蓝型油菜自交不亲和系的选育简报，中国油料，1975， (4): 77~84)，淘汰亲和指数犬 于2的植株，同时分析每一单株上种子的芥酸、硫苷含量，选择芥酸含量小于1%、硫劳 含量小于30umol/g的植株的种子作为原原种，保存在-20'C冰箱中备用，得到甘蓝型油菜自交不亲和系原原种；(4)取步骤(3)的原原种少量种子，在下一个繁殖季节中继续播种于隔离条件T， 于甘蓝型油菜自交不亲和系S-1300的蕾薹期(现蕾至初花)用60目的尼龙帐套住隔离棚， 以阻止外面的花粉进入；在甘蓝型油菜自交不亲和系S-1300的开花期(始花至终花)的每天上午喷施3%的NaCl溶液1次，共喷20-30次(每天1次)，配置蜜蜂以辅助本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种甘蓝型油菜自交不亲和系的快速繁殖方法，其步骤如下：　（１）在中国长江中下游的冬油菜地区于每年的８月下旬至９月上旬隔离条件下播种甘蓝型油菜自交不亲和系Ｓ－１３００，设株、行距分别为２米和１米，培育尽可能多分枝的大株型甘蓝型油菜自交不 亲和系，于该自交不亲和系的蕾薹期用６０目的尼龙纱帐套住每一个甘蓝型油菜自交不亲和系Ｓ－１３００单株，在尼龙纱帐内配置蜜蜂辅助授粉；对该自交不亲和系的主花序套袋，使其自交，鉴定该自交不亲和系植株的亲和性；　（２）在甘蓝型油菜自交不亲和系 Ｓ－１３００的开花期，对隔离条件下的甘蓝型油菜自交不亲和系Ｓ－１３００植株每天上午喷施３％ＮａＣｌ溶液１次，累计喷２０－３０次；　（３）在甘蓝型油菜自交不亲和系Ｓ－１３００的成熟期分单株收获所述自交不亲和系的种子，按亲和指数＝籽粒数／ 花朵数的公式计算亲和指数，淘汰亲和指数大于２的植株，分析每一单株种子的芥酸和硫苷含量，选芥酸含量小于１％、硫苷含量小于３０ｕｍｏｌ／ｇ植株的种子作为原原种，保存在－２０℃冰箱中备用，得到甘蓝型油菜自交不亲和系原原种；　（４）在下一个繁 殖季节继续在隔离条件下播种步骤（３）的原原种，并在所述的自交不亲和系的开花期每天上午喷施３％的ＮａＣｌ溶液１次，共喷２０－３０次，配置蜜蜂辅助授粉，收获得到作为生产上应用的甘蓝型油菜自交不亲和系原种。...

【技术特征摘要】
1、一种甘蓝型油菜自交不亲和系的快速繁殖方法，其步骤如下(1)在中国长江中下游的冬油菜地区于每年的8月下旬至9月上旬隔离条件下播种甘蓝型油菜自交不亲和系S-1300，设株、行距分别为2米和1米，培育尽可能多分枝的大株型甘蓝型油菜自交不亲和系，于该自交不亲和系的蕾薹期用60目的尼龙纱帐套住每一个甘蓝型油菜自交不亲和系S-1300单株，在尼龙纱帐内配置蜜蜂辅助授粉；对该自交不亲和系的主花序套袋，使其自交，鉴定该自交不亲和系植株的亲和性；(2)在甘蓝型油菜自交不亲和系S-1300的开花期，对隔离条件下的甘蓝型油菜自交不亲和系S-1300植株每天上午喷施3％NaCl...

【专利技术属性】
技术研发人员：马朝芝，高长斌，傅廷栋，涂金星，沈金雄，
申请(专利权)人：华中农业大学，
类型：发明
国别省市：83[中国|武汉]