System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 柴胡、白芍多糖组合物以及制备方法和应用技术_技高网

柴胡、白芍多糖组合物以及制备方法和应用技术

技术编号:41278938 阅读:14 留言:0更新日期:2024-05-11 09:30
本发明专利技术公开了柴胡、白芍多糖组合物以及制备方法和应用,属于中药大分子多糖技术领域。组合物包括质量比为(1:3)~(3:1)的柴胡多糖CHTD‑1和白芍多糖BSTD‑2。本发明专利技术采取水提醇沉法提取得柴胡、白芍多糖粗品,该方法得率高,不易改变多糖结构。粗多糖采用Sewage法除去蛋白。过DEAE‑52纤维素柱、Sephadex G‑100凝胶柱得精制多糖片段,分别为CHTD‑1、CHTD‑2、BSTD‑1、BSTD‑2。将多糖进行组合,其中多糖组合CB‑2(由CHTD‑1和BSTD‑2组成)效果最佳,药效学实验发现CB‑2多糖联合抗抑郁效果显著,提高多糖利用率,为抑郁症的治疗提供另一种可行的办法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种柴胡、白芍多糖组合物以及制备方法和应用,属于中药大分子多糖。


技术介绍

1、柴胡多糖作为柴胡的有效成分,现有研究证实其具有抗炎、调节免疫、抗溃疡、抗肿瘤和防辐射等多种作用。白芍现代药理作用主要包括:抗炎、镇痛、解热、解痉、抗抑郁、抗糖尿病,抗肿瘤、抗菌、抗病毒、抗氧化、还可以改善学习记忆能力、调节机体免疫、影响消化系统、影响心血管系统,对肝组织也有一定保护作用。

2、抑郁症是一种严重的精神障碍疾病。主要特征为情绪低落、悲伤、失望、兴趣下降、严重者甚至有自杀倾向。目前,抑郁症的发病机制尚不完全清楚,在抑郁症治疗中发挥主导作用的仍是西药,西药大多存在抗抑郁谱窄、副作用大、易复发和服用周期长等缺点,并且抑郁症发病机制复杂,针对某单一环节的药物治疗难以取得满意疗效。中医治疗情志病历史悠久,有关“郁证”的临床表现与现代抑郁症十分相似。中医学治疗抑郁症的主要方法为疏肝解郁。柴胡、白芍是疏肝解郁配伍的常用经典药对,但是其抗抑郁的药效物质尚未阐明,尤其是多糖组合发挥药理作用方面尚未报道,为本专利技术的创新点,同时也为解析中医配伍理论提供依据。


技术实现思路

1、本专利技术所要解决的技术问题是,提供一种柴胡、白芍多糖组合物,该组合具有协同抗抑郁作用。

2、同时,本专利技术提供一种柴胡、白芍多糖组合物的制备方法,采用传统中药柴胡、白芍作为原料,具有效果显著、毒副作用小、药理效应清晰、成本低等特点。

3、同时,本专利技术提供一种一种柴胡、白芍多糖组合物在制备抗抑郁药物中的应用。

4、为解决上述技术问题,本专利技术采用的技术方案为:

5、一种柴胡、白芍多糖组合物,包括质量比为(1:3)~(3:1)的柴胡多糖chtd-1和白芍多糖bstd-2。

6、柴胡多糖chtd-1和白芍多糖bstd-2的质量比为2:1。

7、柴胡多糖chtd-1的单糖组成为:半乳糖醛酸:木糖:半乳糖:葡萄糖醛酸=1:1.26:5.58:10.06。

8、白芍多糖bstd-2的单糖组成为:半乳糖醛酸:木糖:葡萄糖:半乳糖=1:1.81:6.38:9.96。

9、一种柴胡、白芍多糖组合物的制备方法,包括以下步骤:

10、s1,提取:

11、分别称取1.5kg柴胡或白芍药材粗粉,放置于20l蒸馏烧瓶,按照料液比为1:10加入15l蒸馏水;待液体沸腾后,加热回流2h,过滤药液;药渣按照同样的料液比和加热时间重复操作两次;弃去药渣,合并三次的药液,利用旋转蒸发仪将药液浓缩至粘稠能挂壁,呈半流体状态;将浓缩好的药液放置于5l容器中,加入4l 95%乙醇,搅拌后沉淀48h,抽滤得到沉淀,将沉淀晾干24h,烘箱中烘干,分别得到柴胡粗多糖和白芍粗多糖;

12、s2,去除蛋白:

13、按照氯仿:正丁醇=4:1的比例配制sewage试剂;分别将柴胡、白芍粗多糖粉末制成水溶液,浓度为10mg/ml,转移至500ml分液漏斗,加入等量sewage试剂,震荡,静置过夜,取上层水溶液,萃取三次,合并萃取液,浓缩,冷冻干燥,获得柴胡、白芍脱蛋白多糖;

14、s3,富集纯化

15、称取柴胡脱蛋白多糖1g,蒸馏水溶解后,抽滤,将滤液倒入deae-52纤维素阴阳离子柱中,用蒸馏水以及0.3m nacl溶液,分别洗脱,通过硫酸苯酚显色法鉴别洗脱液是否含多糖;收集多糖溶液,旋转蒸发仪浓缩至50ml,浓缩液倒入方盒中,液体厚度为1cm,放入冰箱冷冻层冷冻24h;将冷冻好的多糖样品放入冻干机中,冻干,收集样品;分别得到多糖组分水洗部分ch-1和盐洗部分ch-0.3;白芍脱蛋白多糖1g同理进行富集,分别得到多糖组分水洗部分bs-1和盐洗部分bs-0.3;

16、s4,sephadex g-100凝胶富集:

17、称取300mg柴胡多糖ch-1,蒸馏水溶解,超声5min,抽滤,上样,sephadex g-100凝胶柱层析,用蒸馏水、0.4m nacl溶液洗脱,用自动收集器各收集满100只试管,取双数号试管进行苯酚硫酸显色反应,且在490nm处测定其吸光度值,绘制多糖洗脱曲线,分别获得水洗脱部分chtd-1、盐洗脱部分chtd-2;干燥后获得柴胡多糖chtd-1;透析并干燥后获得柴胡多糖chtd-2;

18、300mg白芍多糖bs-1同理进行富集,分别获得水洗脱部分bstd-1、盐洗脱部分bstd-2;干燥后获得白芍多糖bstd-1;透析并干燥后获得白芍多糖bstd-2;

19、s4,取柴胡多糖chtd-1和白芍多糖bstd-2进行配比,获得组合物。

20、s1中,旋转蒸发仪浓缩的压力为60pa,自来水冷凝,水浴温度为55℃,转速为30r/min。

21、s3中,旋转蒸发仪浓缩的压力为60pa,自来水冷凝,水浴温度为55℃,转速为3000r/min;冻干机预设参数为压力29pa,温度-40℃,冻干48h。

22、s3中,deae-52纤维素阴阳离子柱的规格:60cm×3.5cm,填料500g。

23、s4中,sephadex g-100凝胶柱层析的规格:60cm×3.5cm,填料500g。

24、一种柴胡、白芍多糖组合物在制备抗抑郁药物中的应用。

25、课题组获得国家自然科学基金资助(基于“血清药化-药代动力学-代谢组学”的柴胡-白芍药对抗抑郁的药效物质及机制研究,no:81803711),对柴胡-白芍药对、柴胡、白芍提取物进行了抗抑郁作用评价,发现柴胡、白芍多糖具有显著的抗抑郁活性。

26、本专利技术对柴胡-白芍多糖特定比例组合协同抗抑郁进行研究。

27、本专利技术提供一种柴胡、白芍多糖组合物以及制备方法和应用。本专利技术所采取的技术方案是一种多糖组合的抗抑郁作用。水提醇沉法进行提取得柴胡、白芍多糖粗品,该方法得率高,不易改变多糖结构。粗多糖采用sewage法除去蛋白、色素。过deae-52纤维素柱、sephadex g-100凝胶柱得精制多糖片段,分别为chtd-1、chtd-2、bstd-1、bstd-2。将多糖组分chtd-1、chtd-2、bstd-1、bstd-2进行组合,即:chtd-1联合bstd-1(cb-1)、chtd-1联合bstd-2(cb-2)、chtd-2联合bstd-1(cb-3)、chtd-2联合bstd-2(cb-4),进行抗抑郁实验,其中多糖组合cb-2效果最佳,并进行了结构初步表征,多糖cb-2由chtd-1和bstd-2组成。用hplc-elsd法测其图谱显示单峰且峰形对称,表明该纯化多糖组分均一且纯度较高。

28、本专利技术的有益效果是:采用水提醇沉提取多糖,多糖含量高。利用deae-52纤维素、sephadex g-100凝胶获得多糖组分,药效学实验发现多糖联合抗抑郁效果显著,提高了均一多糖的利用率,为抑郁症的治疗提供了另一种可行的办法。

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【技术保护点】

1.柴胡、白芍多糖组合物,其特征在于,包括质量比为(1:3)~(3:1)的柴胡多糖CHTD-1和白芍多糖BSTD-2。

2.根据权利要求1所述的组合物,其特征在于,柴胡多糖CHTD-1和白芍多糖BSTD-2的质量比为2:1。

3.根据权利要求1所述的组合物,其特征在于,柴胡多糖CHTD-1的单糖组成为:半乳糖醛酸:木糖:半乳糖:葡萄糖醛酸=1:1.26:5.58:10.06。

4.根据权利要求1所述的组合物,其特征在于,白芍多糖BSTD-2的单糖组成为:半乳糖醛酸:木糖:葡萄糖:半乳糖=1:1.81:6.38:9.96。

5.根据权利要求1~4任意一项所述的组合物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,S1中,旋转蒸发仪浓缩的压力为60pa,自来水冷凝,水浴温度为55℃,转速为30r/min。

7.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,S3中,旋转蒸发仪浓缩的压力为60pa,自来水冷凝,水浴温度为55℃,转速为3000r/min;冻干机预设参数为压力29pa,温度-40℃,冻干48h。

8.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,S3中,DEAE-52纤维素阴阳离子柱的规格:60cm×3.5cm,填料500g。

9.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,S4中,Sephadex G-100凝胶柱层析的规格:60cm×3.5cm,填料500g。

10.根据权利要求1~4任意一项所述的组合物在制备抗抑郁药物中的应用。

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【技术特征摘要】

1.柴胡、白芍多糖组合物,其特征在于,包括质量比为(1:3)~(3:1)的柴胡多糖chtd-1和白芍多糖bstd-2。

2.根据权利要求1所述的组合物,其特征在于,柴胡多糖chtd-1和白芍多糖bstd-2的质量比为2:1。

3.根据权利要求1所述的组合物,其特征在于,柴胡多糖chtd-1的单糖组成为:半乳糖醛酸:木糖:半乳糖:葡萄糖醛酸=1:1.26:5.58:10.06。

4.根据权利要求1所述的组合物,其特征在于,白芍多糖bstd-2的单糖组成为:半乳糖醛酸:木糖:葡萄糖:半乳糖=1:1.81:6.38:9.96。

5.根据权利要求1~4任意一项所述的组合物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

6.根据权利要求5所述的制备...

【专利技术属性】
技术研发人员:张洪财王文姌胡明旭张淑香陈雁雁马育轩周鹏顾媛媛
申请(专利权)人:黑龙江中医药大学
类型:发明
国别省市:

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