细菌感染的治疗制造技术

本发明专利技术涉及表现出抗菌活性的多肽和编码该多肽的核酸，其中多肽包含衍生于脱脂载脂蛋白的肽的重复。本发明专利技术进一步提供所述多肽、衍生物、类似物或核酸作为药物的应用，还提供它们在预防或治疗细菌感染的方法中或物体和表面中的应用。本发明专利技术进一步延伸到用多肽包被的物体，例如接触透镜。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】细菌感染的治疗本专利技术涉及具有抗菌活性的多肽及其衍生物或类似物，和编码该多肽的核酸。本专利技术进一步提供所述多肽、衍生物、类似物或核酸作为药物的应用，还提供在治疗方法中的应用。本专利技术进一步延伸到由多肽包被的物体。抗微生物肽是先天免疫系统的关键组分，其一般含有20-40个氨基酸，具有净正电荷，并且在非哺乳动物种属中大部分目前已被鉴定出来。后者限制它们在人或哺乳动物中作为治疗剂的有效性，原因在于此类大肽商业生产中的困难，和所述肽由于它们的非人源性导致的副作用风险。直到2003年，Trieste国际抗微生物肽数据库(http://www.bbcm.units.it/～tossi/amsdb.html)中列出的大约800条序列中，只有33条序列是人源性的，并且其中只有3条在长度上少于20个氨基酸。也已经开发了一些短的合成的抗微生物肽。然而，这些肽由于它们的非人源性而具有抗原或毒性作用相关风险的缺点。已经将此类肽特征性地分成6组(Bradshaw，J.P.，Biodrugs，2003：17：235-240)，其中下述3类研究得最多(Bowman H.G.，Journal of InternalMedicine，2003：254：197-215)：(i)缺少半胱氨酸并通常在溶液中带有α-螺旋两性分子结构的线性肽，例如，人LL-37(SEQ ID No.19)：-LLGDFFRKSKEKIGKEFKRIVQRIKDFLRN LVPRTES；(ii)具有3个二硫键的肽，其使得肽具有扁平的二聚β-折叠，例如，人α-防卫素(α-defensin)：-HNP-1(SEQ ID No.20)(iii)对诸如脯氨酸、精氨酸、色氨酸或组氨酸的某些氨基酸具有特别偏爱-->的肽，例如，猪PR-39(SEQ ID No.21)：-RRRPRPPYLPRPRPPPFFPPRLPPRIPPGF PPRFPPRFP；或牛indolicidin(SEQ ID No.22)：-ILPWKWPWWP WRR。许多抗微生物肽具有溶解细菌的能力。然而，还不清楚细胞溶解是否是造成所述抗微生物作用的机制(Bowman，如前文)。另外，许多抗菌肽具有净正电荷，并具有带有可以帮助肽进入细菌膜的铰合部的两亲性的元件。然而，这些特征对许多肽都是普遍的，其包括，例如，多肽激素(Bowman，如前文)。因此，目前还没有完全理解抗微生物肽授予它们的抗微生物功能的机制。尽管已经发现一些肽还行使抗病毒作用，但是这被认为是这些肽的任何膜分裂作用的次要的副作用(Bowman，如前文)。已经在科学文献中描述的许多抗菌肽具有强的阳离子特征，并通常由精氨酸和赖氨酸残基组成。然而，并不是所有含有精氨酸和赖氨酸的肽都具有抗微生物活性。例如，Azuma等(Peptides，21：327-330(2000))报道了由apoE133-162(LRVRLASHLRKLRKRLLRDADDLQKRLAVY；SEQ ID No.47)组成的30-mer(长度30个氨基酸)单聚体肽具有抗微生物活性，其活性与抗生素庆大霉素的活性相当。然而，作者发现取代在肽的136、142、147和150位点的个别精氨酸减弱了抗菌活性，而且在142和147位点的残基看起来最重要。另外，当Azuma设计接近该区域的较短的肽时，抗菌活性下降了。例如，Azuma’s肽apoE134-151(长度18个氨基酸)尽管含有142和147两个位点的精氨酸，仍然全然不具有活性。同样地，Azuma证明了肽apoE134-155(长度22个氨基酸)具有非常低的抗菌活性，和肽apoE134-159(长度26个氨基酸)具有极大减少的抗菌活性。因此，Azuma证明了将肽的长度从30个氨基酸分别减少到26个氨基酸、和22个氨基酸，导致肽的抗菌功效的相当多的减少。他们还发现将肽的长度进一步减少到18个氨基酸导致抗菌功效的完全丧失。最终，Azuma等只研究了apoE衍生肽的抗菌活性，并且没有评估任何其它抗微生物作用。因此，看起来Azuma等没有办法利用它们的apoE133-162肽的潜在抗菌活性，并且证明简单构建阳离子的肽不能必定地保证它将表现出抗菌功效。因此，Azuma’s肽授予它的抗菌本质的机制是全然不清楚的。本专利技术的一个专利技术人早先已经确定某些多肽具有抗病毒活性。他的研-->究的这些结果在PCT/GB2004/005438和PCT/GB2004/005360中有描述。这些抗病毒多肽包含肽的串联重复、及其变体：apoE141-149(LRKLRKRLL-SEQ ID No.1)和apoB3359-3367(RLTRKRGLK-SEQ ID No.2)，以及与SEQID No.1或SEQ ID No.2序列接近地相关修饰的重复。这些肽衍生于或包括这些脱脂载脂蛋白E和B的LDL受体/HSPG受体结合区。然而专利技术人不希望被任何假说局限，他们认为这些抗病毒多肽通过许多机制行使它们的抗病毒作用是可能的，其中影响病毒附着的机制是特别赞成的机制。专利技术人表明从这些脱脂载脂蛋白的LDL受体/HSPG受体结合区衍生的肽的二聚体化(作为串联重复或其变体)对抗病毒作用是重要的。尽管事实上，抗病毒试剂与抗菌试剂并不相关，原因在于它们分别对病毒和细菌的不同作用模式，但是基于上文所讨论的抗病毒肽，专利技术人决定研究多肽是否具有任何抗菌特性。为了这一目的，他们已经研究了这些肽表现的溶菌或其它作用是否可能作用于细菌，即使这些作用在研究病毒时看起来并不会发生。特别地，专利技术人想知道从这些脱脂载脂蛋白的LDL受体/HSPG受体结合区衍生的肽的重复(例如串联重复)的构建是否可以具有抗菌作用。特别地，他们想知道apoE141-149区域的重复是否可以出乎意料地允许apoE133-162的抗菌特性(在Azuma等中公开，如前文)在更短的多肽中重新获得。使他们感到震惊的是，他们发现如下文定义的多肽表现出抗菌活性。按照本专利技术的第一方面，提供多肽或者其衍生物或类似物用于制备治疗细菌感染或污染的药物的应用，其中所述多肽包括从脱脂载脂蛋白的硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(HSPG)受体结合区衍生的肽的重复。通过术语“其衍生物或类似物”，我们意指一种其中的氨基酸残基被具有相似的侧链或肽骨架特征的残基(无论是天然氨基酸、非天然氨基酸或氨基酸模拟物)取代的多肽。另外，所述肽的一端或两端可以通过N和C-末端保护基进行保护，例如，具有与乙酰基或酰胺基相似特征的基团。应该理解一旦最终多肽形成或在重复肽(例如9-mer)的发展过程中，氨基酸序列可以被改变、剪截或修饰。本专利技术的多肽包含至少两个从脱脂载脂蛋白的HSPG受体结合区衍生的肽的重复。应该理解所述多肽可以包含同一肽的重复(即同一肽的同-->源二聚体或多聚体)。备选地，所述多肽可以包含两个或更多相关肽的重复(即包含两个或更多的肽单体的肽类型的异源二聚体或多聚体)。如果多肽包含不同的肽，应该理解所述肽将共享它们作为或衍生于脱脂载脂蛋白的HSPG受体结合区的特征。按照本专利技术的多肽应该包括作为串联重复以本领域技术人员已知的方式将N末端结合到C末端的此类肽的二聚体或多聚体。因此，除非文中另外指示，否则，当我们在本文中提及“串联重复”时，我们是指作为或衍本文档来自技高网...

【技术保护点】
多肽、或者其衍生物或类似物在制造用于治疗细菌感染的药物中的应用，所述多肽、或者其衍生物或类似物包括从脱脂载脂蛋白的硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（ＨＳＰＧ）受体结合区衍生的肽的重复。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】GB 2004-2-27 0404374.11.多肽、或者其衍生物或类似物在制造用于治疗细菌感染的药物中的应用，所述多肽、或者其衍生物或类似物包括从脱脂载脂蛋白的硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(HSPG)受体结合区衍生的肽的重复。2.按照权利要求1的应用，其中所述肽是衍生于脱脂载脂蛋白B或脱脂载脂蛋白E的硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(HSPG)受体结合区。3.按照任一前述权利要求的应用，其中所述肽是衍生于脱脂载脂蛋白BLDL受体结合结构域B簇、或衍生于脱脂载脂蛋白ELDL受体结合结构域B簇。4.按照任一前述权利要求的应用，其中所述多肽包括至少2个RKR基序。5.按照任一前述权利要求的应用，其中所述多肽包括下述...

【专利技术属性】
技术研发人员：C多布森，KA克拉彻，
申请(专利权)人：A一二有限公司，
类型：发明
国别省市：GB[英国]