【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及分析检测，具体涉及一种检测血液中短链和中链氯化石蜡含量的方法。
技术介绍
1、公开该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
2、氯化石蜡(cps)又称多氯代烷烃，是正构烷烃直接氯化而成的一类工业产品，其碳链长度一般为10～30个碳原子，氯原子取代数1～13个不等(氯含量约30％～70％)。按照碳链的长度，可以将cps分为短链氯化石蜡(sccps，碳链长度为10～13)，中链氯化石蜡(mccps，碳链长度为14～17)和长链氯化石蜡(lccps，碳链长度为18～30)。cps因其挥发性低、阻燃、电绝缘性好及价廉等优点，广泛用于金属加工润滑剂、密封剂、橡胶、油漆、塑料添加剂、纺织品的阻燃剂、皮革加工以及涂料涂层等工业产品中。cps在加工过程中主要以物理添加的方式进入材料，使其极易从各类产品中通过挥发、磨损或者渗透释放到周围环境。研究表明，cps对水环境中的无脊椎动物具有非常大的毒性作用，更重要的是，它们可以通过食物链进行富集放大，进而对高等生物甚至人类造成健康风险。
3、近年来，有关cps在人体内暴露的情况得到越来越多的关注，评估污染物在人体内暴露水平的生物指示物主要有尿液、母乳、血液、胎盘等。血液是细胞间运输的媒介，直接与机体的各个组织和器官接触，因此开展人体血液中cps含量研究，测定其与人体直接相关的各项指标对保障人类健康具有指导意义。
4、现有技术中虽然公开了关于血液中
技术实现思路
1、为了克服上述问题，本专利技术提供了一种检测血液中短链和中链氯化石蜡含量的方法，本专利技术中采用速溶剂萃取法提取，酸性硅胶除脂，固相萃取柱净化，气相色谱-质谱检测的方法对血液中短链氯化石蜡和中链氯化石蜡进行定量测定。与传统检测方法相比，具有检测方法简单、检测时间短、节省溶剂、自动化程度高、方法稳定可靠且可以高通量进行检测的优点，适合大批量血液样品分析测定。
2、为实现上述技术目的，本专利技术采用如下技术方案：
3、一种检测血液中短链和中链氯化石蜡含量的方法，包括以下步骤：
4、(1)将血液样本离心分离出血清，精确吸取定量的血清样本加入装满硅藻土的萃取池中，后加入萃取剂进行加速萃取，得到萃取液；
5、(2)将萃取液加入酸性硅胶除脂，后将萃取液进行过滤浓缩，得提取液；
6、(3)将浓缩后的提取液用活化后的c18固相萃取柱富集和净化；
7、(4)用气相色谱-质谱检测净化后的提取液中短链和中链氯化石蜡的含量。
8、在一种或多种实施方式中，步骤(1)中，所述萃取剂为二氯甲烷和正己烷的混合溶液，二氯甲烷和正己烷的体积比为0.8～1.2:1，优选为1:1。
9、在一种或多种实施方式中，步骤(1)中，所述加速溶剂萃取过程中，萃取温度为140～160℃，萃取压力1200～1800psi，加热的时间为6～8min，静态萃取8～12min，萃取2～4个循环。
10、在一种或多种实施方式中，步骤(1)中，血清样本和萃取剂的体积比1:10～1:20。
11、在一种或多种实施方式中，步骤(2)得到的萃取液中加入酸的百分含量为40％的酸性硅胶，用于除去蛋白质以及脂肪类杂质。
12、在一种或多种实施方式中，步骤(2)中，萃取液利用无水硫酸钠小柱过滤。
13、在一种或多种实施方式中，步骤(3)中，c18固相萃取柱是在市售c18固相萃取柱的基础上填充弗罗里硅土。
14、在一种或多种实施方式中，步骤(3)中，c18固相萃取柱活化的方法为：利用正己烷润洗活化c18固相萃取柱。
15、在一种或多种实施方式中，步骤(3)中，活化后的c18固相萃取柱富集和净化的方法包括：先利用正己烷进行预淋洗，后利用二氯甲烷和正己烷的混合溶液继续淋洗并接取洗脱液，将洗脱液转移到k-d管中进行氮吹浓缩至40～60μl，转移至进样小瓶，后进行气相色谱-质谱检测。
16、优选的，预淋洗采用的正己烷与浓缩后的提取液的体积比为2.5～3.5:1，优选为3:1。
17、优选的，二氯甲烷和正己烷的混合溶液中二氯甲烷和正己烷的体积比为0.8～1.2:1，优选为1:1。
18、优选的，继续淋洗的二氯甲烷和正己烷的混合溶液与浓缩后的提取液的体积比为2.5～3.5:1，优选为3:1。
19、在一种或多种实施方式中，步骤(4)中，气相色谱条件：采用db-5ms毛细管色谱柱，进样口温度240～260℃，不分流模式进样1μl，柱箱初始温度为95～105℃，保持1min，然后以28～32℃/min升至160℃，恒温5min，最后以28～32℃/min升至310℃，恒温7min，总分析时间为20min；氦气作为载气，恒流模式，载气流速为：36cm/s，ch4做反应气；离子源温度190～210℃，传输线温度270～280℃。在本专利技术的气相色谱条件下，短链氯化石蜡(sccps)和中链氯化石蜡(mccps)能够通过对各单体定量离子与定性离子积分结果的比值来评价和校正，从而实现达到短链氯化石蜡和中链氯化石蜡的准确定性和定量。
20、本专利技术的有益效果在于：
21、(1)本专利技术中采用加速溶剂萃取法提取，酸性硅胶除脂，固相萃取柱净化，气相色谱质谱检测的方法对血液中短链氯化石蜡和中链氯化石蜡进行定量测定。与传统检测方法相比，具有检测方法简单、检测时间短、节省溶剂、自动化程度高、方法稳定可靠且可以高通量进行检测的优点，适合大批量血液样品分析测定。
22、(2)本专利技术中固相萃取柱为市售c18固相萃取柱的基础上填充弗罗里硅土组合而成，相较于传统的复合层析柱，缩小了净化柱的大小，极大的降低了溶剂的使用量，可以快速批量处理样品。
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1.一种检测血液中短链和中链氯化石蜡含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.如权利要求1所述的检测血液中短链和中链氯化石蜡含量的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述萃取剂为二氯甲烷和正己烷的混合溶液，二氯甲烷和正己烷的体积比为0.8～1.2:1，优选为1:1。
3.如权利要求1所述的检测血液中短链和中链氯化石蜡含量的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述加速溶剂萃取过程中，萃取温度为140～160℃，萃取压力1200～1800psi，加热的时间为6～8min，静态萃取8～12min，萃取2～4个循环。
4.如权利要求1所述的检测血液中短链和中链氯化石蜡含量的方法，其特征在于，步骤(1)中，血清样本和萃取剂的体积比为1:10～1:20。
5.如权利要求1所述的检测血液中短链和中链氯化石蜡含量的方法，其特征在于，步骤(3)中，C18固相萃取柱是在市售C18固相萃取柱的基础上填充弗罗里硅土。
6.如权利要求1所述的检测血液中短链和中链氯化石蜡含量的方法，其特征在于，步骤(3)中，C18固相萃取柱活化的方法为：利用正己烷润洗活
7.如权利要求1所述的检测血液中短链和中链氯化石蜡含量的方法，其特征在于，步骤(3)中，活化后的C18固相萃取柱富集和净化的方法包括：先利用正己烷进行预淋洗，后利用二氯甲烷和正己烷的混合溶液继续淋洗并接取洗脱液，将洗脱液转移到K-D管中进行氮吹浓缩至40～60μL，转移至进样小瓶，后进行气相色谱-质谱检测。
8.如权利要求7所述的检测血液中短链和中链氯化石蜡含量的方法，其特征在于，预淋洗采用的正己烷与浓缩后的提取液的体积比为2.5～3.5:1，优选为3:1；
9.如权利要求7所述的检测血液中短链和中链氯化石蜡含量的方法，其特征在于，继续淋洗的二氯甲烷和正己烷的混合溶液与浓缩后的提取液的体积比为2.5～3.5:1，优选为3:1。
10.如权利要求1所述的检测血液中短链和中链氯化石蜡含量的方法，其特征在于，步骤(4)中，气相色谱条件：采用DB-5MS毛细管色谱柱，进样口温度240～260℃，不分流模式进样1μL，柱箱初始温度为95～105℃，保持1min，然后以28～32℃/min升至160℃，恒温5min，最后以28～32℃/min升至310℃，恒温7min，总分析时间为20min；氦气作为载气，恒流模式，载气流速为：36cm/s，CH4做反应气；离子源温度190～210℃，传输线温度270～280℃。
...【技术特征摘要】
1.一种检测血液中短链和中链氯化石蜡含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.如权利要求1所述的检测血液中短链和中链氯化石蜡含量的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述萃取剂为二氯甲烷和正己烷的混合溶液，二氯甲烷和正己烷的体积比为0.8～1.2:1，优选为1:1。
3.如权利要求1所述的检测血液中短链和中链氯化石蜡含量的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述加速溶剂萃取过程中，萃取温度为140～160℃，萃取压力1200～1800psi，加热的时间为6～8min，静态萃取8～12min，萃取2～4个循环。
4.如权利要求1所述的检测血液中短链和中链氯化石蜡含量的方法，其特征在于，步骤(1)中，血清样本和萃取剂的体积比为1:10～1:20。
5.如权利要求1所述的检测血液中短链和中链氯化石蜡含量的方法，其特征在于，步骤(3)中，c18固相萃取柱是在市售c18固相萃取柱的基础上填充弗罗里硅土。
6.如权利要求1所述的检测血液中短链和中链氯化石蜡含量的方法，其特征在于，步骤(3)中，c18固相萃取柱活化的方法为：利用正己烷润洗活化c18固相萃取柱。
7.如权利要求1所述的检测血液中短链和中链氯化石蜡含量的方法，其...
【专利技术属性】
技术研发人员：李慧娟，李慧芝，陈金鹏，赵燕芳，陈向荣，李娜，陈相峰，
申请(专利权)人：山东省分析测试中心，
类型：发明
国别省市：
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