【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及癌症治疗和诊断领域，具体涉及识别胃癌细胞的适体。
技术介绍
1、胃癌是起源于胃黏膜上皮的一种恶性肿瘤，在我国的西北与东部沿海地区胃癌发病率比南方地区明显为高。绝大多数胃癌属于腺癌，早期无明显症状，或出现上腹不适、嗳气等非特异性症状，常与胃炎、胃溃疡等胃慢性疾病症状相似，标志物匮乏，易被忽略且诊断困难，因此，目前我国胃癌的早期诊断率仍较低。同时，胃癌的预后与胃癌的病理分期、部位、组织类型、生物学行为以及治疗措施有关。
2、核酸适体(aptamer)是一种可以特异性地与靶标结合的单链核苷酸(dna或rna分子)，分子量小，易设计合成，可折叠形成特定构象特异性结合生物靶标，也因此被美誉为“化学抗体”。通过以活细胞为靶标的体外指数富集的配体系统进化技术(cell-selex)能够有效从大量随机文库中筛选得到特异性识别靶标的核酸适体。核酸适体具备合成简单、易修饰、化学性质稳定、免疫原性低、成本低廉等优点，可作为良好的发新型高效稳定的分子探针，在癌症的早期诊断和精准靶向治疗、药物治疗以及生物化学传感等领域极具前景。
3、因此，为了解决胃癌早期诊断困难的问题，筛选具有特异性识别胃癌细胞的核酸适体，发现胃癌标志物，对肿瘤的早期诊断及预后治疗具有重要意义。
技术实现思路
1、本专利技术通过cell-selex技术筛选方法，以人胃癌细胞株mgc803为靶标细胞，以正常人结肠上皮细胞株ges-1作对照细胞，进行细胞间差异筛选，根据流式监测结果选择筛选第10轮的文库p
2、本专利技术公开了多种特异性识别恶性肿瘤细胞mgc803的核酸适体，核酸序列如序列表seq id no.1-19所示，具体为:
3、apstts-1a:agcagcgtggaggata tggtgtggtttgctgaggtggg ctca tggacgtgct(seqid no.1)；
4、apstts-1b:agcacgtggaggata tggtgtggtttgctgaggtggg ctca tggacgtgct(seqid no.2)；
5、apstts-1c:agcacgtata tggtgtggtttgctgaggtggg ctcacgtgct(seq id no.3)；
6、apstts-1d:ata tggtgtggtttgctgaggtggg ct(seq id no.4)；
7、apstts-2a:aggagcagcgtggaggataaggatctagggcggattcagggttaacttccagcgtgctcc(seq id no.5)；
8、apstts-2b:tggaggata aggatctagggcggattcagggttaacttcca(seq id no.6)；
9、apstts-2c:tggaggtta aggatctagggcggattcagggttaacttcca(seq id no.7)；
10、apstts-2d:aagtta aggatctagggcggattcagggttaactt(seq id no.8)；
11、apstts-5a:agcagcgtggaggataaaccggtctgtcggtgggtttagaagtccgaattacgttgct(seq id no.9)；
12、apstts-5b:agcgtggaggataaaccggtctgtcggtgggtttagaagtccgaattacgtt(seq idno.10)；
13、apstts-5c:tggaggataaaccggtctgtcggtgggtttagaagtccgaattacgttgct(seq idno.11)；
14、apstts-5d:tggaggataaaccggtctgtcggtgggtttagaagtccg(seq id no.12)；
15、apstts-5f:ataaaccggtctgtcggtgggttta(seq id no.13)；
16、apstts-8a:tggagttgattaggggaagtgtgttgtatctggtaatcggctc(seq id no.14)；
17、apstts-8b:agttgattaggggaagtgtgttgtatctggtaatcggct(seq id no.15)；
18、apstts-8c:agccgattaggggaagtgtgttgtatctggtaatcggct(seq id no.16)；
19、apstts-8d:agttgattaggggaagtgtgttgtatctggtaatcaact(seq id no.17)；
20、apstts-8e:tgattaggggaagtgtgttgtatctggtaatca(seq id no.18)；
21、apstts-6a：aggataaaaacggcgttgagcttcaggatacgtttttatct(seq id no.19)。
22、(注：序列名称中的数字为测序的核酸适体丰度排名，小写字母则代表该核酸适体的不同变体；核酸适体序列中小写字母为突变碱基位点。)
23、所述序列任意一个位置连接或者多个位置同时连接包括化学基团、荧光素、抗肿瘤药物、放射性元素、生物酶、生物素以及纳米材料等相关修饰或改造。所述核酸序列包括以下二级结构中的任意一种或几种，只要是与本专利技术的核酸适体序列相同的，不论二级结构如何，都应认为落入本专利技术的保护范围中。且与本专利技术的核酸适体序列有个别碱基的修改，相似度在80％以上的，与本专利技术的核酸适体有相同或极其相似的应用的，对整体功能没影响的其他序列，也应该被认为落入本专利技术的保护范围中。
24、本专利技术进一步提供所述核酸适体或核酸适体的衍生物在制备肿瘤相关细胞捕获、富集和纯化试剂中的应用。
25、本专利技术进一步提供所述核酸适体或核酸适体的衍生物在制备用于肿瘤成像或肿瘤检测识别的诊断探针或显影剂中的应用。
26、其中所述肿瘤为直肠癌、胃癌、卵巢癌或乳腺癌。
27、本专利技术进一步提供所述核酸适体或核酸适体的衍生物在制备诊断或治疗胃癌试剂中的应用。
28、本专利技术进一步提供所述核酸适体或核酸适体的衍生物在制备荧光腔镜手术中引导胃癌病灶及转移灶的切除指示试剂中的应用，优选所述切除指示试剂为icg类分子修饰的核酸适体或衍生物。
29、本专利技术还提供一种胃癌诊断或治疗试剂，其含有所述核酸适体或核酸适体的衍生物。
30、本专利技术还提供一种用于胃癌细胞捕获、富集或纯化的试剂，其含有所述核酸适体或核酸适体的衍生物。
31、如本专利技术上述的胃癌细胞捕获、富集或纯化的试剂，其为偶联有所述核酸适体或本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种识别胃癌细胞的核酸适体，其序列如SeqNo：1-19所示。
2.权利要求1所述核酸适体的衍生物，其特征在于：所述核酸适体的衍生物为如下(1)-(6)中任一种：
3.根据权利要求2所述的衍生物，其特征在于：
4.权利要求1所述的核酸适体或权利要求2-3任一所述的核酸适体的衍生物在制备肿瘤相关细胞捕获、富集和纯化试剂中的应用。
5.权利要求1所述的核酸适体或权利要求2-3任一所述的核酸适体的衍生物在制备用于肿瘤成像或肿瘤检测识别的诊断探针或显影剂中的应用。
6.如权利要求4或5的应用，其中所述肿瘤为直肠癌、胃癌、卵巢癌或乳腺癌。
7.权利要求1所述核酸适体或权利要求2-3任一所述的核酸适体的衍生物在制备诊断或治疗胃癌的试剂中的应用。
8.权利要求1所述核酸适体或权利要求2-3任一所述的核酸适体的衍生物在制备荧光腔镜手术中引导胃癌病灶及转移灶的切除指示试剂中的应用，优选所述切除指示试剂为ICG类分子修饰的核酸适体或衍生物。
9.一种胃癌诊断或治疗试剂，其含有权利要求1所述核酸适体或权
10.一种用于胃癌细胞捕获、富集或纯化的试剂，其含有权利要求1所述的核酸适体或权利要求2-3任一所述的核酸适体衍生物。
11.如权利要求10所述的试剂，其为偶联有权利要求1所述的核酸适体或权利要求2-3任一所述的核酸适体衍生物的磁性纳米颗粒。
...【技术特征摘要】
1.一种识别胃癌细胞的核酸适体，其序列如seqno：1-19所示。
2.权利要求1所述核酸适体的衍生物，其特征在于：所述核酸适体的衍生物为如下(1)-(6)中任一种：
3.根据权利要求2所述的衍生物，其特征在于：
4.权利要求1所述的核酸适体或权利要求2-3任一所述的核酸适体的衍生物在制备肿瘤相关细胞捕获、富集和纯化试剂中的应用。
5.权利要求1所述的核酸适体或权利要求2-3任一所述的核酸适体的衍生物在制备用于肿瘤成像或肿瘤检测识别的诊断探针或显影剂中的应用。
6.如权利要求4或5的应用，其中所述肿瘤为直肠癌、胃癌、卵巢癌或乳腺癌。
7.权利要求1所述核酸适体或权利要求2...
【专利技术属性】
技术研发人员：谭蔚泓，邴涛，孟辉，武晓秋，符婷，
申请(专利权)人：中国科学院基础医学与肿瘤研究所筹，
类型：发明
国别省市：
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