本发明专利技术涉及一种基于结构型导电高分子材料技术的霍乱诊断用多通道芯片,属于测试领域。快速且廉价地对烈性传染病霍乱进行诊断是医疗技术进步的诸多企望之一,本案旨在提供相关助力。该芯片带有三个微储液池,本案要点是,芯片内含有呈并联构造的毛细管通道,该并联构造含有四条相互并联的微小通道,共有四个纤维状工作电极分别装设在所述四条微小通道内,该四个纤维状工作电极的表层物质分别是四种抗体物质,该四种抗体物质分别是霍乱TP0821抗体以及霍乱TP0319抗体以及霍乱TP0624抗体以及霍乱O139菌体蛋白抗体,所述纤维状工作电极其本体材质均是热分解导电高分子材质。本案芯片低成本、多通道。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种基于结构型导电高分子材料技术的霍乱诊断用多通道芯 片,属于测试领域。
技术介绍
霍乱是由霍乱弧菌引起的一种烈性传染病,属于国际检疫传染病,也是我 国传染病防治法规定的甲类传染病病原之一。该病发病急、传播快、涉及范围广,可引起局部和世界性的爆发流行为特征;是一种严重危害人类健康和生命 的传染病。霍乱弧菌是导致感染者严重腹泻的病原菌,作为国际检疫传染病一 —霍乱的病原诊断,以检出01群霍乱弧菌或0139群霍乱弧菌为准。长期以来,对霍乱弧菌的诊断都是采用传统的检验方法,即形态学、生理 生化特征及血清学鉴定以及噬菌体分型等,最快的也要十几个小时才能完成。 时间长、样本量大、准确率低,且一次只能获得一种致病菌种类和数量。近年 来,在传统的检测方法基础上,单克隆抗体和分子生物学技术越来越多地应用 到霍乱弧菌的研究中,相关测试方法的飞速发展为霍乱弧菌的检测提供了新的 强有力的手段。其中主要有胶体金标记免疫层析技术、实时荧光PCR技术、 基因传感器技术、间接免疫荧光技术、酶联免疫吸附技术和核酸序列分析技术 等。然而,上述方法中,病原体的分离费时费力,不适用快速批量诊断。由于 需要孵育、洗脱、显色等多重步骤, 一般需要数小时。核酸PCR检测诸法中, 实时荧光定量PCR敏感性高、特异性强,可以縮短检测窗口期,但需要较昂贵 的仪器设备,无法大面积推广,且分离核酸和进行PCR反应也需要数小时,故 无法快速检测。免疫胶体金试纸条可以在数分钟内获得结果,实现快速检测, 但一般只能达到半定量测定标准,敏感性差,成本高,也难以同时检测多种抗原。近年来发展很快的时间分辨荧光免疫分析方法和化学发光方法虽然灵敏度 高,但是仍需要繁琐的前处理,且检测价格昂贵。其中免疫分析技术是实现传 染病准确诊断的重要手段,通过测定病后2周血清抗菌"诊断蛋白"(抗原/抗体, 简称DP)含量,可以获取病原体的种类和数量。免疫分析本身有很强的选择性, 对传染病的早期诊断,判断疗效及预后等方面均有重要的意义。然而重大传染 病菌的检测非常复杂,传统的免疫分析通常只针对单一指标进行检测。由于一 种诊断蛋白可出现在不同病菌,或不同诊断蛋白可在同一致病菌同时出现,因此,开展高效的多重免疫分析方法(SMIAs),从生物相关性的角度真实地定量 反映各种致病菌的种类和数量;在早期预防和联检多种传染病、判断传染病菌 发展程度、观察和评价治疗效果等方面都具有重要的医学价值。01、 0139霍乱弧菌联检需要同时获取TP0821、 TP0319、 TP0624以及霍 乱弧菌0139菌体蛋白、甘露糖敏感血凝(rMSHA)等几种诊断蛋白含量,综合分析才能得到,其中,前四种蛋白含量的检测更具诊断意义。所述诊断蛋白TP0821、 TP0319、 TP0624、霍乱弧菌0139菌体蛋白,以 及,相应的TP0821抗体、TP0319抗体、TP0624抗体、0139菌体蛋白抗体,其技术含义在霍乱诊疗
是公知的。微流控芯片技术是将采样、预处理、加试剂、反应、分离、检测等集成在 一块几平方厘米的微芯片上进行的一门前沿技术,具有分析速度快、信息量大、 试剂消耗少、污染小、仪器简便以及检测速度和灵敏度倶佳等优点。微流控技 术代表着21世纪分析仪器的发展方向。目前基于微流控芯片的检测技术主要有 紫外吸收检测、激光诱导荧光检测、电导检测、伏安检测等。其中紫外吸收检 测和电导检测比较通用,但是其灵敏度较低;激光诱导荧光检测和伏安检测灵 敏度较高,但是测定对象不多,限制了它们的推广。而传感器中采用电化学检 测,体积小、自动化程度高,非常适合于现场分析。目前,在微流控芯片
,利用霍乱多种特征抗体同时检测、快速诊断霍乱的技术尚未见报道;另一方面,该领域现有技术中多采用昂贵的黄金来作为测试传感器核心元件也就是工作电极的基本材料,这种昂贵金属材质的使 用,增加了相关芯片的制造成本,鉴于芯片所侦测的相关传染病所具有的公知 的危险性,相关疾病侦测用微流控芯片内的黄金回收工作存在不安全因素,相 关不安全因素会增加黄金回收工作的难度、增加黄金回收操作的成本,进而可 能因经济上得失权衡方面的实际考虑,造成贵重资源黄金的流失,显然,这一 技术缺陷也有待消除。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是,在微流控芯片技术这样一个总的技术框架 内,研发出一种廉价的能够利用霍乱多种特征抗体进行同时检测的应用于快速 诊断烈性传染病霍乱的专用微流控芯片。本专利技术通过如下方案解决所述技术问题,该方案提供的装置是一种基于结 构型导电高分子材料技术的霍乱诊断用多通道芯片,该霍乱诊断用多通道芯片 是微流控芯片,该微流控芯片的结构包括贴合装设在一起的两片板状物,所述 两片板状物分别是微流控芯片的盖片以及微流控芯片的基片,在所述两片板状 物之间的相互贴合的位置上装设有毛细管通道,以及,三个微储液池,毛细管通道的一端经由Y字形三联通道分别与其中的两个微储液池联通,毛细管通道 的另一端与余下的一个微储液池联通,以及,依序分别装设在所述毛细管通道 内不同位置上的工作电极以及对电极以及参比电极,所述工作电极由导电性电 极以及包覆在所述导电性电极上的抗体物质表层构成,本案特别之处在于,所 述毛细管通道的构造呈并联构造,所述呈并联构造的毛细管通道由四个微小通 道并联构成,以及,所述工作电极的数量是四个,该四个工作电极的装设位置 分别位于所述四个微小通道内,以及,该四个工作电极其表层结构中的抗体物 质分别是四种抗体物质,该四种抗体物质分别是霍乱TP0821抗体以及霍乱TP0319抗体以及霍乱TP0624抗体以及霍乱O139菌体蛋白抗体,以及,每一个工作电极其形貌均呈纤维状,所述形貌呈纤维状的工作电极其本体材质是热 分解导电高分子材质。所述抗体物质包含为固定所述各霍乱抗体而引入其中的 辅助性介质,所述辅助性介质例如巯基丁二胺铜修饰介质,所述导电性电极可 以首先利用所述辅助性介质进行表面修饰处理,之后在其上包覆抗体物质表层, 抗体物质表层与所述辅助性介质浑然一体。结构中涉及的对电极以及参比电极均为微小尺寸的电极,其电极形状均可 以是任意选定的形状,所述任意选定的形状例如方片形状、矩形片状、条状或 圆形片状等等。本案芯片中的工作电极呈纤维状,电极的纤维状形貌表明它能够与所述管 道尤其是毛细管级的管道或曰微小通道很好地适配,基于此,该形貌工作电极 能够直接安置于管道内的位置,这一结构特点也有助于强化工作电极与流经其 周边的被测物液流之间的接触。本案微流控芯片结构中涉及若干个微储液池,所述微储液池是用于过渡性 储液的微池或微囊,其中的每一个微储液池的微型的内腔其形状均可以是任意 选定的形状,所述内腔形状例如微型的圆柱形空腔状、微型的方柱形空腔状、 微型的椭圆形空腔状或微型的球形空腔状等等。本案装置当然还可以进一步包 括一些附件,所述附件例如多道电化学工作站以及微流动泵等等,所述多道电 化学工作站的技术含义以及微流动泵的技术含义是公知的。本案微流控芯片结 构中涉及的各个工作电极以及对电极以及参比电极等,可以分别经由相应的专 用串线与所述多道电化学工作站的相应接口进行联接。所述专用串线是用来将 各所述电极与所述多道电化学工作站的各相应接口进行相互本文档来自技高网...
【技术保护点】
基于结构型导电高分子材料技术的霍乱诊断用多通道芯片,该霍乱诊断用多通道芯片是微流控芯片,该微流控芯片的结构包括贴合装设在一起的两片板状物,所述两片板状物分别是微流控芯片的盖片以及微流控芯片的基片,在所述两片板状物之间的相互贴合的位置上装设有毛细管通道,以及,三个微储液池,毛细管通道的一端经由Y字形三联通道分别与其中的两个微储液池联通,毛细管通道的另一端与余下的一个微储液池联通,以及,依序分别装设在所述毛细管通道内不同位置上的工作电极以及对电极以及参比电极,所述工作电极由导电性电极以及包覆在所述导电性电极上的抗体物质表层构成,其特征是,所述毛细管通道的构造呈并联构造,所述呈并联构造的毛细管通道由四个微小通道并联构成,以及,所述工作电极的数量是四个,该四个工作电极的装设位置分别位于所述四个微小通道内,以及,该四个工作电极其表层结构中的抗体物质分别是四种抗体物质,该四种抗体物质分别是霍乱TP0821抗体以及霍乱TP0319抗体以及霍乱TP0624抗体以及霍乱O139菌体蛋白抗体,以及,每一个工作电极其形貌均呈纤维状,所述形貌呈纤维状的工作电极其本体材质是热分解导电高分子材质。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:李榕生,干宁,杨欣,李天华,王峰,王鲁雁,巫远招,孔祖萍,任元龙,姜晶晶,陈仙雄,
申请(专利权)人:宁波大学,
类型:发明
国别省市:97[中国|宁波]
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