【技术实现步骤摘要】
本公开涉及基因工程和抗体领域，更具体而言涉及一种特异性结合tslp的抗体或其抗原结合片段及其用途。本申请开发了新的抗tslp抗体，并提供了该抗体在tslp相关的疾病的预防、诊断、治疗、追踪和/或预后检查中的用途。
技术介绍
1、胸腺基质淋巴细胞生成素(tslp)最初在小鼠胸腺基质细胞培养上清中发现，是b淋巴细胞生长因子，主要由上皮细胞表达。tslp属于il-2家族细胞因子，与il-7最为类似。il-2家族细胞因子包括il-2、il-4、il-7、il-9、il-15、il-21，它们都是球状蛋白，含有4个短链α螺旋，都在促进和维持t淋巴细胞群中发挥重要作用(expert rev clinimmunol.2014,10(11):1463–1474.nature communications,2017,8.)。最新的研究结果表明tslp是人体免疫屏障的“警报蛋白”，在皮肤角质细胞、肺部和肠道上皮细胞等表面屏障中调控免疫功能。tslp响应病原菌刺激，激活未成熟树突细胞、肥大细胞、嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞和淋巴细胞，使它们呈现2型极化表型。tslp信号异常会导致人体多种严重的健康问题，目前已经证明tslp与哮喘、特应性皮炎、特应性鼻炎、牛皮藓、慢性阻塞性肺病(copd)、嗜酸细胞性食管炎等疾病有关(nat immunol.2010,11(4):289–293.expert revclin immunol.2014,10(11):1463–1474.drugs(2020),80,449–458.adv immunol.2009；101:
2、il-2家族细胞因子结合各自特异性的受体亚基，以及共享γc这个共同受体亚基。但是tslp结合tslpr(crlf2)、il-7ralpha两个受体，不与γc受体结合(expert rev clinimmunol.2014,10(11):1463-1474.adv immunol.2009,101:1-25.)。tslp与tslpr和il-7ralpha的结合具有协同性。tslp与tslpr结合，亲和力约32nm。而tslp与il-7ralpha不直接结合(>100nm)。当tslp与tslpr结合形成tslp-tslpr复合物后才与il-7ralpha结合，亲和力约29nm(nature communications,2017,8.)。
3、tslp基因区域存在可变启动子，可表达出long form tslp(lftslp)和short formtslp(sftslp)两种蛋白(包含信号肽)。sftslp相比lftslp，n端被截短，仅保留“一个半”α螺旋结构。研究表明lftslp和sftslp的c末端均存在具有抗菌活性的mkk34抗菌肽，并且sftslp具有更加强大的抗菌活性。sftslp是tslp在人体正常组织中表达的主要形式，它只在正常口腔粘膜、皮肤表皮、唾液腺、肠道上皮细胞组成型表达，发挥抗菌活性；在炎症条件下，sftslp的表达量下降(在特应性皮炎和节段性回肠炎病理组织中检测到)。而lftslp在正常组织中不表达，仅在特应性皮炎、哮喘、溃疡性结肠炎、吸烟的口腔粘膜中表达(pharmaceuticals 2016,9,41)。当过敏原刺激上皮细胞后，细胞中tslp表达上调，从而产生th2生成倾向的微环境，分泌th2型细胞因子，生成炎症反应性th2细胞，进而触发过敏性炎症反应。研究表明，当tslp分子与tslpr和il-7r-α组成的异二聚体结合后，激活jak1和jak2，从而可激活信号转导子以及转录活化子5和3(stat5，3)，并启动下游基因的表达。tslp广泛出现在多种变态反应性疾病中，如过敏性鼻炎、过敏性哮喘、湿疹等。此外，在特应性皮炎、哮喘、嗜酸性食管炎患者中检测到多个tslp的snp突变，这些突变导致lftslp的高表达。并且这些突变具有家族遗传性(expert rev clin immunol.2014,10(11):1463–1474.)。因此开发针对lftslp的抗体，阻断lftslp异常表达导致的特应性皮炎、哮喘、嗜酸性食管炎、溃疡性结肠炎等疾病具有重要的意义。同时筛选获得不阻断c末端具有抗菌活性的mkk34抗菌肽有望保留tslp对抗外界细菌感染的能力。
4、目前已经上市的抗体tezepelumab结合在tslp的c末端，可能影响tslp的抗菌肽活性从而导致副作用。另外，研究表明同时阻断tslp与tslpr和il-7ralpha的tslp-trap分子在抑制tslp诱导的stat5方面比tezepelumab强20-30倍(nature communications,2017,8.)。因此，开发不同表位、生物学活性更强的tslp抗体有望增强药效，获得更好的临床治疗效果。
5、在本申请中对任何文献的引用或标识，并非承认这样的文献可用作本公开的现有技术。
技术实现思路
1、针对上述诸问题，本公开提供了抗体、其制备方法、组合物等。本公开提供的益处广泛地适用于抗体治疗和诊断领域，并且能够与各种靶标反应的抗体联合使用。本专利技术提供了能够特异性结合tslp的抗体或其抗原结合片段，优选嵌合单克隆抗体或人源化单克隆抗体。
2、一方面，本公开提供了一种分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段特异性结合tslp，且包含重链可变区和轻链可变区，
3、所述重链可变区包含：
4、cdrl1，包含与seq id no：16和22之一具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％序列同一性的序列，或由seq id no：16和22之一组成；和/或，
5、cdrl2，包含与seq id no：17和23之一具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％序列同一性的序列，或由seq id no：17和23之一组成；和/或，
6、所述cdrl3包含与seq id no：18和24之一具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％序列同一性的序列，或由seq id no：18和24之一组成。
7、进一步，在本专利技术的一些实施方案中，所述抗体或片段，其中，
8、所述cdrh1包含与seq id no：13和19之一具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％序列同一性的序列，或由seq id no：13和19之一组成；和/或，
9、所述cdrh2包含与seq id no：14和20之一具本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段特异性结合TSLP，且包含重链可变区和轻链可变区，
2.如权利要求1所述的抗体或片段，其中所述轻链可变区包含与SEQ ID NO：8、10之一具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％序列同一性的序列或者由SEQ ID NO：8、10之一组成；
3.如前述权利要求中任一项所述的抗体或片段，还包含重链恒定区，其中该重链恒定区包含与SEQ ID NO：11具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％序列同一性的序列或者由SEQ ID NO：11组成；
4.如前述权利要求中任一项所述的抗体或片段，其中包含：
5.如前述权利要求中任一项所述的抗体或片段，其中包含：
6.如前述权利要求中任一项所述的抗体或片段，其中所述片段为Fab片段、Fab’片
7.如权利要求6所述的抗体或片段，其中所述人源化抗体包含：
8.如权利要求7所述的抗体或片段，其中所述人源化抗体包含：
9.一种分离的核酸分子，其中包含编码如权利要求1-8中的任一项中所述的抗体或片段的核酸序列。
10.如权利要求1-8中任一项所述的抗体或片段、如权利要求9所述的核酸分子、在TSLP表达相关疾病中的用途，TSLP表达相关疾病是自身免疫性疾病，所述自身免疫性疾病选自下组：系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、银屑病关节炎、中轴型脊椎关节炎、重症肌无力、多发性肌炎、银屑病、天疱疮、白癫风、多发性硬化症、嗜睡症、视神经脊髓炎、一型糖尿病、甲亢、甲减、克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、乳糜泻、自身免疫性胃炎、原发性胆道胆管炎、自身免疫性肝炎和狼疮性肾炎。
...【技术特征摘要】
1.一种分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段特异性结合tslp，且包含重链可变区和轻链可变区，
2.如权利要求1所述的抗体或片段，其中所述轻链可变区包含与seq id no：8、10之一具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％序列同一性的序列或者由seq id no：8、10之一组成；
3.如前述权利要求中任一项所述的抗体或片段，还包含重链恒定区，其中该重链恒定区包含与seq id no：11具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％序列同一性的序列或者由seq id no：11组成；
4.如前述权利要求中任一项所述的抗体或片段，其中包含：
5.如前述权利要求中任一项所述的抗体...
【专利技术属性】
技术研发人员：董洁娴，王小龙，张建军，周加滔，苏杭，洪坡，黄丽玫，刘月红，张慧，凌俐，
申请(专利权)人：华润生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：
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