【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及的领域，具体而言，涉及一种具有仿生级联能力的fecozn-nc纳米酶的制备方法和一种l-半胱氨酸(l-cys)的比色检测方法。
技术介绍
1、l-cys作为人体内重要的α-氨基酸，在新陈代谢、解毒和免疫等方面起着重要作用。此外，l-cys可以作为阿尔兹海默症、发育不良、帕金森等疾病的生物标识，对疾病的诊断和预防起着重要作用。因此，开发灵敏的l-cys的检测方法，对相关疾病的诊断和人体健康具有重要意义。
2、比色法因为操作简单、现象明显和灵敏快捷等优点在分析检测领域受到广泛关注。通过酶催化底物显色，随后加入不同种类或者不同含量的分析物，使检测体系的颜色发生变化是构建比色检测体系的基本策略。然而，天然酶价格昂贵、储量少和稳定性差等固有缺陷阻碍了其实际应用。纳米酶是一种具有类酶活性的纳米材料，其来源广泛，价格低廉，稳定性良好，是天然酶的良好替代品。迄今为止，模拟氧化酶、过氧化物酶、过氧化氢酶和超氧化物酶等酶活性的纳米酶已经被成功开发。特别是模拟氧化酶活性的纳米酶，由于可以避免外源性过氧化氢(h2o2)的使用而备受青睐。然而，只具有单一氧化酶活性的纳米酶，在催化过程中会产生内源性的h2o2，具有单一氧化酶活性的纳米酶无法将产生的h2o2分解，会导致h2o2的积累，积累的h2o2不仅会和底物竞争催化位点，还会影响检测体系的稳定性，从而导致检测效果不理想。如何消除类氧化酶纳米酶催化过程中产生的内源性h2o2带来的负面影响是目前亟需解决的问题。
技术实现思路
1、本专利
2、为了实现本专利技术的目的，首先提供了fecozn-nc纳米酶的制备方法，具体制备步骤如下：
3、(1)制备zif-8：将20ml六水合硝酸锌(zn(no3)2·6h2o)的甲醇溶液倒入20ml 2-甲基咪唑(2-meim)的甲醇溶液中并在室温下搅拌12h，随后将上述溶液转移至特氟隆内衬不锈钢高温反应釜当中，在100℃反应4h，离心分离得到zif-8；
4、(2)制备zif-8@zif-67-fe：将六水合硝酸钴(co(no3)2·6h2o)和七水合硫酸亚铁(feso4·7h2o)分散在150ml的甲醇溶液中搅拌2h。同时，将步骤(1)得到的zif-8和2-meim分散在150ml的甲醇溶液中，持续搅拌0.5h。将co(no3)2·6h2o和feso4·7h2o的甲醇溶液倒入zif-8和2-meim的甲醇溶液中搅拌12h，离心分离得到zif-8@zif-67-fe；
5、(3)fecozn-nc纳米酶的合成：将步骤(2)中得到的zif-8@zif-67-fe置于管式炉中，在氩气气氛下煅烧2h，升温速度为2℃/min，得到fecozn-nc纳米酶。
6、优选地，步骤(1)中zn(no3)2·6h2o和2-meim的摩尔比为1∶4。
7、优选地，步骤(2)中加入feso4·7h2o的摩尔量为0.5～2.5mmol。
8、优选地，步骤(3)中煅烧温度为600～1000℃。
9、本专利技术还提供了一种基于仿生级联fecozn-nc纳米酶的l-cys比色检测方法，具体包括以下步骤：
10、①将20μl的fecozn-nc纳米酶和15μl的3，3′，5，5′-四甲基联苯胺(tmb)加入2ml的醋酸缓冲溶液中，在一定温度下培育10min；
11、②使用紫外分光光度计记录步骤①中溶液在652nm处的吸光度值，计为a0；
12、③向步骤②中的溶液中加入100μl不同浓度的l-cys；
13、④使用紫外分光光度计记录步骤③中溶液在652nm处的吸光度值，计为ai；
14、⑤根据加入l-cys前后吸光度变化δa652％(δa652％＝(a0-ai)/a0)和加入l-cys的浓度确定线性方程；
15、优选地，步骤①中fecozn-nc纳米酶的浓度为5～40μg/ml。
16、优选地，步骤①中醋酸缓冲溶液的ph为3～5。
17、优选地，步骤①中培育温度为10～60℃。
18、与之前的技术相比，本专利技术具有以下有益效果：
19、本专利技术提供了一种具有仿生级联能力的fecozn-nc纳米酶的制备方法。通过仿生级联反应，避免了外源性h2o2的使用，与此同时，克服了内源性h2o2带来的消极影响。
20、本专利技术基于fecozn-nc纳米酶的仿生级联能力，提供了一种稳定、灵敏、经济的l-cys检测方法。该方法具有灵敏度高、稳定性强选择性高等优点。实验结果显示，该比色检测方法对l-cys检测的线性范围为5～50μm，检测限低至0.4815μm。
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1.一种具有仿生级联能力的FeCoZn-NC纳米酶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中Zn(NO3)2·6H2O和2-MeIm的摩尔比为1∶4。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中加入FeSO4·7H2O的摩尔量为0.5～2.5mmol。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中煅烧温度为600～1000℃。
5.权利要求1中具有仿生级联能力的FeCoZn-NC纳米酶在L-半胱氨酸(L-Cys)比色检测中的应用，其特征在于，具体包括以下步骤：
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤①中FeCoZn-NC纳米酶的浓度为5～40μg/mL。
7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤①中醋酸缓冲溶液的pH为3～5。
8.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤①中培育温度为10～60℃。
【技术特征摘要】
1.一种具有仿生级联能力的fecozn-nc纳米酶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中zn(no3)2·6h2o和2-meim的摩尔比为1∶4。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中加入feso4·7h2o的摩尔量为0.5～2.5mmol。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中煅烧温度为600～1000℃。
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