【技术实现步骤摘要】
本披露涉及用于细胞培养的组合物、制备该组合物的方法、使用该组合物高效培养细胞的方法。
技术介绍
1、多种细胞治疗方法，例如car-t，tcr-t已被用于治疗疾病。而未经或已经基因工程化的细胞的获取需要高效的细胞培养工艺，包括能够实现细胞大量扩增，并保持细胞高活率和早期记忆表型，以及低耗竭表型的培养基。本文提供了满足此需要的组合物及其方法。
技术实现思路
1、本文提供了一种能够高效扩增细胞的组合物。在一个方面，所述组合物包含texmacs和t-vivo，所述texmacs和t-vivo的体积比为1:0.1-10；所述组合物具有高于texmacs或t-vivo的免疫细胞扩增倍数。在一些实施方案中，培养细胞至少约2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13天。在一些实施方案中，将细胞置于37.0±1.0°c、5.0±1.0% co2条件下培养。在一些实施方案中，采用所述组合物培养t细胞9、11或13天后，其扩增倍数较texmacs或t-vivo提高至少50%、60%、70%、80%、90%、100%、150%、200%、250%、300%、350%、400%、450%、500%及以上。在一些实施方案中，所述texmacs和t-vivo的体积之和占组合物体积的50%以上。在一些实施方案中，所述texmacs和t-vivo的体积之和占组合物体积的65%以上。在一些实施方案中，所述texmacs和t-vivo的体积之和占组合物体积的80%以上。在一些实施方案中，所述组合物是由texm
2、在一个方面，本披露提供了一种组合物，其包含培养基基质，所述培养基基质包含texmacs和t-vivo，所述texmacs和t-vivo的体积之和占培养基基质体积的50%以上，所述texmacs和t-vivo的体积比为1:0.1-10。在一些实施方案中，所述texmacs和t-vivo的体积之和占培养基基质体积的65%以上。在一些实施方案中，所述texmacs和t-vivo的体积之和占培养基基质体积的80%以上。在一些实施方案中，所述培养基基质是由texmacs和t-vivo组成的。在一些实施方案中所述texmacs和t-vivo的体积比为1:0.1-5。在一些实施方案中，所述texmacs和t-vivo的体积比为1:0.25-4。在一些实施方案中，所述texmacs和t-vivo的体积比为1:0.5-4。在一些实施方案中，所述texmacs和t-vivo的体积比约为1:0.1、1:0.25、1:0.5、1:1、1:2或1:4。
3、在一些实施方案中，如前任一项所述的组合物，其中所述组合物包含添加于培养基基质的补充剂，所述补充剂包含选自由无机盐、糖、维生素、白蛋白、脂质、氨基酸、细胞因子和抗氧化剂组成的组中的一种或多种成分。在一些实施方案中，所述补充剂包含选自由氨基酸、细胞因子和抗氧化剂组成的组中的一种或多种成分。在一些实施方案中，所述补充剂是或包含氨基酸和细胞因子。在一些实施方案中，所述补充剂是或包含氨基酸、细胞因子和抗氧化剂。
4、在一些实施方案中，如前任一项所述的组合物，所述细胞因子包含选自由il-1、il-2、il-3、il-4、il-6、il-7、il-9、il-10、il-12、il-13、il-15、il-17、il-18、il-21、il-22、干扰素和肿瘤坏死因子组成的组中的一种或多种成分。在一些实施方案中，所述细胞因子包含选自由il-2、il-7和il-15组成的组中的一种或多种成分。在一些实施方案中，所述细胞因子是或包含il-2。在一些实施方案中，所述细胞因子是或包含il-2和il-7。在一些实施方案中，所述细胞因子是或包含il-7和il-15。在一些实施方案中，所述细胞因子是或包含il-2、il-7和il-15。
5、在一些实施方案中，如前任一项所述的组合物，所述组合物中补充添加的所述il-2的浓度为10-1000 iu/ml。在一些实施方案中，所述组合物中补充添加的所述il-2的浓度为60-200 iu/ml。在一些实施方案中，所述组合物中补充添加的所述il-2的浓度为约100iu/ml。在一些实施方案中，如前任一项所述的组合物，所述组合物中补充添加的所述il-2的浓度为10-1000 iu/ml，所述l-7的浓度为100-5000 iu/ml，所述il-15的浓度为0-500iu/ml。在一些实施方案中，所述组合物中补充添加的所述il-2的浓度为60-200 iu/ml，所述il-7的浓度为500-1000 iu/ml，所述il-15的浓度为25-100 iu/ml。在一些实施方案中，所述组合物中补充添加的所述il-2的浓度为约100 iu/ml，所述il-7的浓度为约700 iu/ml，所述il-15的浓度为约46 iu/ml。
6、在一些实施方案中，如前任一项所述的组合物，其中所述氨基酸是l-丙氨酰基-l-谷氨酰胺。在一些实施方案中，所述组合物中补充添加的所述l-丙氨酰基-l-谷氨酰胺的浓度为1 mm-5 mm。在一些实施方案中，所述组合物中补充添加的所述l-丙氨酰基-l-谷氨酰胺的浓度为约2 mm。
7、在一些实施方案中，如前任一项所述的组合物，其中所述抗氧化剂是n-乙酰-l-半胱氨酸。在一些实施方案中，所述组合物中补充添加的所述n-乙酰-l-半胱氨酸的浓度为0.5 mg/ml-2 mg/ml。在一些实施方案中，所述组合物中补充添加的所述n-乙酰-l-半胱氨酸的浓度为0.5 mg/ml-1 mg/ml。在一些实施方案中，所述组合物中补充添加的所述n-乙酰-l-半胱氨酸的浓度为约0.8 mg/ml。
8、在一些实施方案中，如前任一项所述的组合物，其包含培养基基质，所述培养基基质包含texmacs和t-vivo，所述texmacs和t-vivo的体积之和占培养基基质体积的80%以上，所述texmacs和t-vivo的体积比为1:0.25-1。在一些实施方案中，所述培养基基质是由texmacs和t-vivo组成的，所述第texmacs和t-vivo的体积比为1:0.25-1。在一些实施方案中，所述培养基基质是由texmacs和t-vivo组成的，所述texmacs和t-vivo的体积比为约1:0.5。
9、在一个方面，本披露提供一种培养基的制备方法，所述方法包括如前任一项所述的培养基基质与补充剂混合。
10、在一个方面，本披露提供一种培养细胞的方法，所述方法包括在如前任一项所述的组合物中孵育细胞。
11、在一个本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种组合物，其包含培养基基质，所述培养基基质包含TexMACS和T-VIVO，所述TexMACS和T-VIVO的体积之和占培养基基质体积的50%以上，所述TexMACS和T-VIVO的体积比为1:0.25-4。
2.如权利要求1所述的组合物，所述TexMACS和T-VIVO的体积之和占培养基基质体积的80%以上。
3.如权利要求1所述的组合物，所述培养基基质是由TexMACS和T-VIVO组成的。
4.如权利要求1所述的组合物，其中所述TexMACS和T-VIVO的体积比为1:0.5-4。
5.如权利要求1至4任一项所述的组合物，其中所述组合物包含添加于培养基基质的补充剂，所述补充剂包含选自由氨基酸、细胞因子和抗氧化剂组成的组中的一种或多种成分。
6.如权利要求5所述的组合物，所述细胞因子包含IL-2。
7.如权利要求5所述的组合物，所述细胞因子包含IL-2、IL-7和IL-15。
8.如权利要求5所述的组合物，其中所述氨基酸是L-丙氨酰基-L-谷氨酰胺。
9.如权利要求5所述的组
10.一种培养T细胞的方法，所述方法包括在如权利要求1-9任一项所述的组合物中孵育细胞。
...【技术特征摘要】
1.一种组合物，其包含培养基基质，所述培养基基质包含texmacs和t-vivo，所述texmacs和t-vivo的体积之和占培养基基质体积的50%以上，所述texmacs和t-vivo的体积比为1:0.25-4。
2.如权利要求1所述的组合物，所述texmacs和t-vivo的体积之和占培养基基质体积的80%以上。
3.如权利要求1所述的组合物，所述培养基基质是由texmacs和t-vivo组成的。
4.如权利要求1所述的组合物，其中所述texmacs和t-vivo的体积比为1:0.5-4。
5.如权利要求1至4任一...
【专利技术属性】
技术研发人员：王武成，李锦绣，王婷，刘泓君，甘雨润，
申请(专利权)人：上海药明巨诺生物医药研发有限公司，
类型：发明
国别省市：
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