【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及核苷酸工程，特别涉及一种重组胶原贻贝粘蛋白及其表达方法和应用。
技术介绍
1、贻贝是一种广泛分布于沿海和近海的甲壳类海洋生物，一种海洋软体动物，属于双壳贝类，俗称“青口”和“淡菜”，遍布世界各沿海国家。贻贝种类繁多，经济价值较高，其中紫贻贝、翡翠贻贝和后壳贻贝是主要的养殖品种。贻贝富含蛋白质、脂肪、碳水化合物、钙、磷、铁、核黄素、烟酸等营养元素，而且具有很高的药用价值。
2、天然的贻贝粘蛋白是从贻贝中提取得到。贻贝粘蛋白（mussel adhesiveprotein，map），也称为贻贝足丝蛋白，是海洋贻贝足丝腺分泌的一类能够在水环境中牢固粘附于礁石、船体等不同材料表面的复合蛋白簇，不仅具有高强度、高韧性、极强的防水性和广泛的基材粘附性，还具有良好的生物相容性和可降解性。贻贝粘蛋白富含赖氨酸，在生理ph值下带正电荷，可以促进细胞的爬行和替代，促进创面或溃疡面愈合，形成微观生物膜，保护创面免受外界细菌感染，且其贻贝粘蛋白不易引起人体的免疫反应，生物相容性好。
3、然而，天然的贻贝粘蛋白产量极低，成本昂贵，难以满足工业需求。目前，已经研究并鉴定至少13种贻贝粘蛋白，包括8种粘性蛋白，即map-1、map-2、map-3f、map-3s、map-4、map-5、map-6、map-7，以及5种足丝纤维骨架蛋白，即precol-d、precol-p、precol-ng、ptmp-1和tmp-1。其中，map-5的生物活性物质多巴含量最高，约30%，其次map-3生物活性物质多巴含量约20%，map-
4、而胶原蛋白是生物高分子是哺乳动物体内含量最多、分布最广的功能性蛋白，其在医疗器械和医疗美容等领域具有广泛应用，同时与人体细胞有良好的生物兼容性。然而，目前胶原蛋白仅作为“填充”材料，发挥了“支架”基础功能，但缺少细胞牵引，组织修复，湿环境黏附等功能，无法有效用于组织修复，缝合等场合。
5、如何提供一种兼具胶原蛋白与贻贝粘蛋白的优点的新蛋白成为一个新的研究方向。
技术实现思路
1、现有技术中，如何提供一种兼具胶原蛋白与贻贝粘蛋白的优点的新蛋白成为一个新的研究方向，因此，本专利技术提供一种重组胶原贻贝粘蛋白及其表达方法和应用于解决上述问题。
2、第一方面，本专利技术提供了一种重组胶原贻贝粘蛋白，所述重组胶原贻贝粘蛋白由胶原蛋白ⅲ型的氨基酸片段（a）和贻贝粘蛋白5型的氨基酸片段（b）重组而成，其序列特征是aba或者bab。所述胶原蛋白ⅲ型的氨基酸片段序列如seq id no.1所示，所述贻贝粘蛋白5型的氨基酸片段的序列如seq id no.2所示。
3、在一种实现方式中，所述重组胶原贻贝粘蛋白的氨基酸序列如seq id no.3所示。
4、在一种实现方式中，编码所述重组胶原贻贝粘蛋白的核苷酸序列如seq id no.4所示。
5、在一种实现方式中，所述重组胶原贻贝粘蛋白的氨基酸序列如seq id no.5所示。
6、在一种实现方式中，所述重组胶原贻贝粘蛋白的氨基酸序列如seq id no.7所示。
7、在一种实现方式中，所述重组胶原贻贝粘蛋白的氨基酸序列如seq id no.9所示。
8、在一种实现方式中，编码所述重组胶原贻贝粘蛋白的核苷酸序列如seq id no.10所示。
9、第二方面，本专利技术还提供了一种表达重组胶原贻贝粘蛋白的重组载体，所述重组载体包括初始载体和编码上述的重组胶原贻贝粘蛋白的核苷酸，所述初始载体为大肠杆菌或酵母。
10、第三方面，本专利技术还提供了一种重组胶原贻贝粘蛋白的表达方法，用于表达上述的重组胶原贻贝粘蛋白，其包括以下具体步骤：
11、s1、编码核苷酸序列：编码重组胶原贻贝粘蛋白的多肽的核苷酸序列；
12、s2、构建重组载体：将上述核苷酸序列与原始载体进行重组，获得重组载体；
13、s3、表达：将上述重组载体转入表达系统中进行表达，筛选成功转入的菌株，经过破碎、离心、纯化处理后得到目的蛋白。
14、第四方面，本专利技术还提供了上述的重组胶原贻贝粘蛋白在制备医用生物粘合剂、喷涂剂和/或化妆品产品中的应用。
15、有益效果：本专利技术提供的重组胶原贻贝粘蛋白将胶原蛋白和贻贝粘蛋白序列相结合，得到新的蛋白，使其兼具胶原蛋白与贻贝粘蛋白的优点，具有高粘合性、良好生物兼容性和创口修复功能，且无致敏源性，可应用于制作角膜或结膜手术的医用生物粘合剂、皮肤修复中的喷涂剂和化妆品原料。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种重组胶原贻贝粘蛋白，其特征在于，所述重组胶原贻贝粘蛋白由胶原蛋白Ⅲ型的氨基酸片段（A）和贻贝粘蛋白5型的氨基酸片段（B）重组而成，其序列特征是ABA或者BAB；所述胶原蛋白Ⅲ型的氨基酸片段序列如SEQ ID NO.1所示，所述贻贝粘蛋白5型的氨基酸片段的序列如SEQ ID NO.2所示。
2.根据权利要求1所述的重组胶原贻贝粘蛋白，其特征在于，所述重组胶原贻贝粘蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。
3.根据权利要求2所述的重组胶原贻贝粘蛋白，其特征在于，编码所述重组胶原贻贝粘蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。
4.根据权利要求1所述的重组胶原贻贝粘蛋白，其特征在于，所述重组胶原贻贝粘蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示。
5.根据权利要求1所述的重组胶原贻贝粘蛋白，其特征在于，所述重组胶原贻贝粘蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.7所示。
6.根据权利要求1所述的重组胶原贻贝粘蛋白，其特征在于，所述重组胶原贻贝粘蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.9所示。
7.根据权
8.一种表达重组胶原贻贝粘蛋白的重组载体，其特征在于，所述重组载体包括初始载体和编码权利要求1~7任意一项所述的重组胶原贻贝粘蛋白的核苷酸，所述初始载体为大肠杆菌或酵母。
9.一种重组胶原贻贝粘蛋白的表达方法，其特征在于，用于表达权利要求1~7任意一项所述的重组胶原贻贝粘蛋白，其包括以下具体步骤：
10.重组胶原贻贝粘蛋白在制备医用生物粘合剂、喷涂剂和/或化妆品产品中的应用，其特征在于，采用权利要求1~7任意一项所述的重组胶原贻贝粘蛋白。
...【技术特征摘要】
1.一种重组胶原贻贝粘蛋白，其特征在于，所述重组胶原贻贝粘蛋白由胶原蛋白ⅲ型的氨基酸片段（a）和贻贝粘蛋白5型的氨基酸片段（b）重组而成，其序列特征是aba或者bab；所述胶原蛋白ⅲ型的氨基酸片段序列如seq id no.1所示，所述贻贝粘蛋白5型的氨基酸片段的序列如seq id no.2所示。
2.根据权利要求1所述的重组胶原贻贝粘蛋白，其特征在于，所述重组胶原贻贝粘蛋白的氨基酸序列如seq id no.3所示。
3.根据权利要求2所述的重组胶原贻贝粘蛋白，其特征在于，编码所述重组胶原贻贝粘蛋白的核苷酸序列如seq id no.4所示。
4.根据权利要求1所述的重组胶原贻贝粘蛋白，其特征在于，所述重组胶原贻贝粘蛋白的氨基酸序列如seq id no.5所示。
5.根据权利要求1所述的重组胶原贻贝粘蛋白，其特征在于，所述重组胶原贻贝粘蛋白的...
【专利技术属性】
技术研发人员：李腾，沈杰，
申请(专利权)人：深圳易致生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。