曼氏无针乌贼内壳茜素红Ｓ标记方法技术

本发明专利技术公开了曼氏无针乌贼内壳茜素红Ｓ标记方法，其包括：①麻醉步骤：选取待标记的曼氏无针乌贼放入浓度为４０ｐｐｍ至７０ｐｐｍ的ＭＳ－２２２麻醉剂溶液中０．５分钟至４分钟；②标记步骤：用注射器将染色液注入经步骤①处理的曼氏无针乌贼的内壳。由于本发明专利技术使用了ＭＳ－２２２麻醉剂溶液对曼氏无针乌贼进行了麻醉处理，使其在接受注射时基本无应激，既便于操作又减少了对其的伤害。并且，采用了染色液注射的方式，锐角插入注射，有利于染色液均布在内壳上，并且特别适用于无针乌贼属。另外，本发明专利技术的方法在乌贼复苏后，无需暂养除去浮色，可以立即放流。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种水生动物的标记方法，特别涉及。
技术介绍
曼氏无针乌贼曾是我国渔场的四大渔业之一，对温度的适应性较强，在我国沿海 分布很广，是一种经济价值很高的传统渔业种类。由于过度捕捞和生态恶化，自20世纪70 年代以来，先后出现了衰退现象。上世纪八十年代有报道李星颉等对曼氏无针乌贼资源及 增殖的初步研究，而国外有对商乌贼的生物学及养殖方面的报道。至今，有关科研机构已初 步解决了曼氏无针乌贼生殖调控、人工繁育、苗种培育与养成技术，为曼氏无针乌贼资源养 护提供了重要的基础。为了在人工繁育后对自然种群进行养护，需要一种效果稳定、操作简 单的标记方法，以利于在理论上对放流效果进行评估，进而优化放流增殖方案。目前头足类 的放流工作的特点只注重向海区放流，而忽视放流效果，跟踪示踪等技术的研究却相对滞 后。目前国内外还没有关于曼氏无针乌贼标记技术的公开报道。现有技术如中国专利技术专利 《一种标志金乌贼的方法》，专利号ZL200610070448. 6，公开了一种标志金乌贼的方法，其特 征是将孵化后的金乌贼暂养5-20天，将染色剂溶于淡水，向盛有乌贼和海水的容器中放入 制得的染色剂的水溶液，使上述海水中染色剂的浓度为60-80卯m，浸泡染色20-28小时。所 述的染色剂为茜素络合指示剂。本专利技术的方法操作简便，鉴别方法简单，无毒无损伤，并可 一次性进行大量染色处理且不易退色，是一种标志金乌贼的好方法。然而，其标记效果不明 显，并且标记浮色会短期残留于体表，将经过该方法标记的乌贼放流到自然海域影响其本 身的保护色，不利于其自然环境中的存活，并且该方法通过浸染金乌贼的针部而对其内壳 尾端进行染色标记，这种方法对于无针乌贼属的个体将不再适用。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供曼氏无针乌贼内壳茜素红S标记方法，以此解决曼氏无针乌 贼放流标记的技术问题，并且该方法简单实用、安全快速，并且不应激，标记物的色彩不残 留于体表，对曼氏无针乌贼的本身保护色影响相对较小，有利于自然放流环境下的存活，无 需暂养，可以直接放流。本专利技术曼氏无针乌贼内壳茜素红S标记方法，其包括如下步骤①麻醉步骤选取待标记的曼氏无针乌贼放入浓度为40卯m至70ppm的MS-222麻醉剂溶液中0. 5分钟至4分钟； ②标记步骤用注射器将染色液注入经步骤①处理的曼氏无针乌贼的内壳。 为了优化上述技术方案，还采取的步骤②的染色液为茜素红S的水溶液，浓度为 50ppm至350ppm;茜素红S注射的量控制在注射时布满内壳；注射器的针头与曼氏无针乌 贼内壳表面呈锐角插入；注射器在使用前在90%至95%的酒精中消毒10分钟至15分钟。 标记后，将曼氏无针乌贼放入清洁海水中复苏。 与现有技术相比，本专利技术的优点在于 本专利技术使用了 MS-222麻醉剂溶液对曼氏无针乌贼进行了麻醉处理，使其在接受 注射时基本无应激，即便于操作又减少了对其的伤害。并且，采用了染色液注射的方式，锐 角插入注射，有利于染色液均布在内壳上，并且特别适用于无针乌贼属。另外，本专利技术的方 法在乌贼复苏后，无需暂养除去浮色，可以立即放流。具体实施例方式以下结合附实施例对本专利技术作进一步详细描述。 实施例l :首先将11111注射器置于90%至95%的酒精中消毒10分钟至15分钟。之 后取出并吸取51ppm的茜素红S(ARS， C14H7Na07 H20)溶液0. 5ml 。将一头胴长为1. 1cm的 曼氏无针乌贼个体放入浓度为60ppm的MS-222麻醉剂溶液中约0. 5min后立即取出置于铺 有浸水毛巾的操作台上。将注射器针头从乌贼个体背部下端向头部方向以与水平面约15。 角斜着剌穿表皮，针头进入表皮约0. 3cm，当感觉到针尖与内壳摩擦声音时，即表明已将针 头穿透乌贼个体背部内表皮并与内壳接触。轻轻推动注射器将ARS溶液注入表皮下，随着 ARS的注入并在内壳表面扩散，应当将注射量控制在正好覆盖住内壳为宜，以减少染色液应 多余溢出而污染其他软组织。拔出针头，并立即将标记个体放入清洁海水中复苏。 实施例2 :首先将11111注射器置于90%至95%的酒精中消毒10-15min。之后取 出并吸取350ppm的ARS溶液0. 5ml。将一头胴长为3. 5cm的乌贼个体放入浓度为60ppm 的MS-222麻醉剂溶液中约2.0min后立即取出置于铺有浸水毛巾的操作台上。将注射器 针头从乌贼个体背部前端向尾部方向以与水平面约15°角斜着剌穿表皮，针头进入表皮约 0. 8cm，当感觉到针尖与内壳摩擦声音时，即表明已将针头穿透乌贼个体背部内表皮并与内 壳接触。轻轻推动注射器将ARS溶液注入表皮下。拔出针头，并立即将标记个体放入清洁 海水中复苏。 实施例3 :首先将11111注射器置于90%至95%的酒精中消毒10-15min。之后取 出并吸取150ppm的ARS溶液0. 5ml。将一头胴长为6. 2cm的乌贼个体放入浓度为60ppm 的MS-222麻醉剂溶液中约3.5min后立即取出置于铺有浸水毛巾的操作台上。将注射器 针头从乌贼个体背部前端向尾部方向以与水平面约15°角斜着剌穿表皮，针头进入表皮约 1.2cm，当感觉到针尖与内壳摩擦声音时，即表明已将针头穿透乌贼个体背部内表皮并与内 壳接触。轻轻推动注射器将ARS溶液注入表皮下。拔出针头，并立即将标记个体放入清洁 海水中复苏。 实验结果表明，将120只胴长为2cm至3cm的乌贼个体利用内壳ARS标记方法标 记，48h后解剖发现标记溶液已经与内壳结合，养殖两个月后至成体并开始产卵。期间每 隔10天左右取样测量被标记个体的生物学指标如全长、胴长、胴宽、体重、壳长、壳宽、壳重 等，并与空白组乌贼个体进行比较，结果表明两者并无显著性差异，说明该标记方法对乌贼 的生长发育及繁殖并无影响，染色液停留在最初标记处，新生长出来的内壳部分仍然为自 然的白色。排除养殖过程中的正常死亡及取样个体的影响，该标记方法下乌贼的成活率在 99%以上且标记保持率为100%。 本专利技术的优点目前国内外关于头足类标记技术的报道仅有郝振林(2007年)利 用荧光染色剂——茜素络合指示剂(ALC)对金乌贼内壳进行标记的研究工作，通过将金乌贼在ALC溶液中浸染其针部而对其内壳尾端进行染色标记，这种方法对于无针乌贼属的个体将不再适用。国内外还没有关于无针乌贼标记技术的公开报道，本标记方法不仅可以弥补国内外关于无针乌贼标记技术的空白，且可以解决所有的头足类的标记难题。该标记方法操作简单方便快捷，且死亡率低，标记色保持率为100 % ， 一般情况下可用肉眼从乌贼个体背部透过表皮看到标记色的存在，通过解剖出内壳来观察，则可观察到内壳末端呈椭圆形的红色标记。 尽管已结合优选的实施例描述了本专利技术，然其并非用以限定本专利技术，任何本领域技术人员，在不脱离本专利技术的精神和范围的情况下，能够对在这里列出的主题实施各种改变、同等物的置换和修改，因此本专利技术的保护范围当视所提出的权利要求限定的范围为准。本文档来自技高网...

【技术保护点】
曼氏无针乌贼内壳茜素红Ｓ标记方法，其特征是：包括如下步骤：①麻醉步骤：选取待标记的曼氏无针乌贼放入浓度为４０ｐｐｍ至７０ｐｐｍ的ＭＳ－２２２麻醉剂溶液中０．５分钟至４分钟；②标记步骤：用注射器将染色液注入经步骤①处理的曼氏无针乌贼的内壳；所述的染色液为茜素红Ｓ的水溶液。

【技术特征摘要】
曼氏无针乌贼内壳茜素红S标记方法，其特征是包括如下步骤①麻醉步骤选取待标记的曼氏无针乌贼放入浓度为40ppm至70ppm的MS-222麻醉剂溶液中0.5分钟至4分钟；②标记步骤用注射器将染色液注入经步骤①处理的曼氏无针乌贼的内壳；所述的染色液为茜素红S的水溶液。2. 如权利要求1所述的曼氏无针乌贼内壳茜素红S标记方法，其特征是步骤②，茜素红S的水溶液浓度为50卯m至350卯m...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴常文，张建设，郭宝英，董智勇，
申请(专利权)人：浙江海洋学院，
类型：发明
国别省市：33[中国|浙江]