【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及基因工程，具体涉及bmdpagt1基因抑制剂在制备抗bmnpv药物中的应用。
技术介绍
1、真核生物蛋白质的n-糖基化由多萜醇磷酸-n-乙酰氨基葡萄糖磷酸转移酶1(dolichyl-phosphate n-acetylglucosamine phosphotransferase 1，dpagt1)启动。n-糖基化所需的初始代谢物是n-乙酰葡糖胺基焦磷酸多酚(glcnac-pp-dolichol)，由dpagt1催化合成。dpagt1中的突变会导致一种罕见的先天性糖基化障碍，称为dpagt1-先天性糖基化紊乱。蛋白n-糖基化能影响多种细胞功能从而在发育和体内平衡中起关键作用，n-糖基化在蛋白质折叠、靶向、分泌、蛋白质-蛋白质相互作用和细胞信号转导具有重要作用，n-糖基化失调与各种疾病相关。
2、近年，病毒中的糖基化修饰功能被不断发掘，并且广泛应用在病毒防控、疾病预防及治疗等方面。一些病毒蛋白可以通过糖基化修饰来发挥重要的生物学功能，在感染过程中介导与宿主细胞的识别、结合和入侵，或帮助病毒逃避宿主免疫系统的清除。
3、杆状病毒(baculoviruses)是一类双链dna(double strand dna，dsdna)病毒，基因组大小在80-180kbp，可编码90-180个病毒蛋白。杆状病毒仅感染无脊椎动物，广泛应用于昆虫防治和真核表达系统中，且在基因治疗领域具有潜在功能。杆状病毒在感染过程中具有糖基化修饰作用，其中，苜蓿银蚊夜蛾核型多角体病毒(acmnpv)中的囊膜蛋白gp64，egt，g
4、糖蛋白参与蛋白质结构的形成，并在与膜的相互作用中起关键作用，例如膜融合、核衣壳出芽和obs的释放。有研究表明，与bmnpv易感品系相比，bmnpv抗性品系中糖基化相关酶类的含量明显上升，并且可能通过改变病毒gp64的n-连接聚糖而发挥作用，从而调控病毒的增殖复制。此外，acmnpv gp64的n-糖基化对其在细胞内的运输、致病性以及bv的感染性非常重要。因此探究糖基化修饰关键基因dpagt1在病毒入侵过程中的作用及其调控机制，对bmnpv的防控和治疗具有重要的意义。
技术实现思路
1、有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种bmdpagt1基因抑制剂在制备抗bmnpv药物中的应用。
2、为达到上述目的，本专利技术提供如下技术方案：
3、1、bmdpagt1基因抑制剂在制备抗bmnpv药物中的应用。
4、本专利技术优选的，所述bmdpagt1基因抑制剂为基于crispr/cas9系统构建的bmdpagt1基因敲除载体。
5、本专利技术优选的，所述bmdpagt1基因的核苷酸序列为seq id no.1所示。
6、本专利技术优选的，所述基于crispr/cas9系统构建的bmdpagt1敲除载体包含ie1启动子启动表达的cas9和u6启动子启动表达的sgrna。
7、本专利技术优选的，所述sgrna的引导序列如seq id no.2和seq id no.3所示。
8、本专利技术优选的，所述bmdpagt1基因抑制剂为衣霉素。
9、本专利技术优选的，所述衣霉素的浓度为10μg/ml。
10、本专利技术的有益效果在于：本专利技术提供了一种糖基化转移酶基因bmdpagt1及bmdpagt1基因抑制剂在制备抗bmnpv药物中的应用。在bmn细胞中敲除和过量表达bmdpagt1基因，证明bmdpagt1基因是bmnpv增殖所必需的。同时，通过构建bmdpagt1基因敲除的细胞系或衣霉素抑制bmdpagt1的表达，降低bmnpv gp64的糖基化水平，可以抑制bvs的出芽和水平扩散，本专利技术为完善病毒与宿主的相互作用机制奠定基础，为解析家蚕抗病毒的机制和病毒防控和治疗提供了靶标基因。
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1.BmDPAGT1基因抑制剂在制备抗BmNPV药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述BmDPAGT1基因抑制剂为基于CRISPR/Cas9系统构建的BmDpagt1基因敲除载体。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述BmDpagt1基因的核苷酸序列为SEQ IDNo.1所示。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述基于CRISPR/Cas9系统构建的BmDpagt1敲除载体包含IE1启动子启动表达的Cas9和U6启动子启动表达的sgRNA。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述sgRNA的引导序列如SEQ ID No.2和SEQ ID No.3所示。
6.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述BmDPAGT1基因抑制剂为衣霉素。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述衣霉素的浓度为10μg/mL。
【技术特征摘要】
1.bmdpagt1基因抑制剂在制备抗bmnpv药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述bmdpagt1基因抑制剂为基于crispr/cas9系统构建的bmdpagt1基因敲除载体。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述bmdpagt1基因的核苷酸序列为seq idno.1所示。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述基于crispr/cas9...
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