【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物免疫，具体的，涉及ngpv vp2单克隆抗体及其制备方法和应用。
技术介绍
1、
2、新型鸭细小病毒、番鸭细小病毒和鹅细小病毒（ngpv）同属于细小病毒亚科依赖病毒属，为单股链状dna病毒。在电镜下番鸭细小病毒和鹅细小病毒的病毒粒子分为实心和空心两种形态，直径为20~24nm，无囊膜，正二十面体对称，衣壳由32个管桩排列的壳粒构成。番鸭细小病毒和鹅细小病毒在病毒大小、形态、基因组结构等都很相似；新型鸭细小病毒与番鸭细小病毒和鹅细小病毒基因组序列差别不大，各分离株都在5.1kb左右，三者基因组都包括2个开放阅读框，左侧开放阅读框（lorf）编码非结构蛋白，右侧开放阅读框（rorf）编码结构蛋白。非结构蛋白有2个，分别为ns1和ns2，肽链长度ns1>ns2，并且共用一个终止密码子；结构蛋白有3个，分别为vp1、vp2和vp3，肽链长度vp1>vp2>vp3，也具有同一个终止密码子。非结构蛋白重要功能为参与病毒复制和转录的调节。结构蛋白vp是病毒衣壳的组成成分，番鸭细小病毒结构蛋白vp1、vp2、vp3大小分别为91、78、58 kda；新型鸭细小病毒和鹅细小病毒结构蛋白vp1、vp2、vp3蛋白大小分别为87、70、60 kda。
3、单克隆抗体是由单一b细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体，其可通过杂交瘤细胞技术制备，且纯度高、成本低、特异性强、高效、无残留，可用于相应疾病预防与治疗。
技术实现思路
1、本
2、本专利技术的技术方案如下：
3、一种vp2重组基因，所述vp2重组基因的核苷酸序列如seq id no.1所示。即：
4、acggctcctgcaaaaaaaaatacagggaagcttactgaccattacccagtagttaagaagcctaaactcaccgaggaagt
5、cagtgcgggaggtggtagcagtgtcgtacaagacggaggagccaccgcggagggcaccgaacctgtggcagcatctgaaa
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7、tgcgattcccaatggatgggaaacacagtcatcacaaagaccaccagaacctgggtcctgccaagctacaacaatcacat
8、ctacaaagcaattaccagtggaacctctcaagatgcaaatgtccagtatgctggatacagtaccccctgggggtactttg
9、atttcaatcgcttccactgccacttctcccctagagactggcagagacttatcaacaaccactggggaatcaggcccaag
10、tctcttaaattcaagatcttcaatgttcaagtcaaggaagtcacaacgcaggatcagacaaagaccattgcaaacaatct
11、cacctcaacaatccaagtttttacggatgatgagcaccaactcccgtatgtcctgggctcggctacggaagggaccatgc
12、cgccgttcccgtcggatgtatatgccctgccgcagtacgggtactgcacaatgcacaccaaccagaatggagcacggttc
13、aatgaccgtagcgcattctactgcttagagtacttccctagtcagatgctgagaacaggtaacaactttgagttcacatt
14、tgactttgaagaagttcctttccacagcatgttcgctcattcacaggacttagacaggcttatgaaccccctagtggatc
15、aatacctctggaatttcaatgaggtagacagcaacagaaatgctcaatttaaaaaagctgtgaaaggggcttatggcacc
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17、aaactggaacatctggaataatgggaacaaggtgaatttaaaggacaggcagtatctcctacaacccggacctgtgtcag
18、ctactcacacagaaggggaggcttccagcatcccagctcagaatattttagggatagctaaagatccatacagatctggc
19、agcactacagcaggaataagtgatattatggtcacggacgagcaggaagtagcacccacgaatggagtagggtggaaacc
20、atatggtaggactgtaacgaatgaacaaaacactactacagctcctacaagttcagatctggatgttcttggagctttac
21、caggaatggtgtggcagaacagagatatatatctgcagggacctatttgggcaaaaataccgaagactgatggcaaattc
22、catccttctccaaatctcggaggatttggcctgcacaatccaccaccacaggtcttcatcaagaatacaccagtacctgc
23、agaccctccagtagaatatgtgaaccagaagtggaactcctacataactcaatactctacaggccagtgtacagtagaaa
24、tggtgtgggagctgagaaaagagaattcaaagagatggaacccagaaatccagttcaccagcaatttcagtaacagaact
25、agtataatgtttgcacctaatgaaactggtggatatgtagaagatagattgattggaaccagatatctaactcaaaatct
26、gtaa
27、本专利技术还提出了一种引物组，用于扩增得到所述vp2重组基因，包括正向引物和反向引物，
28、所述正向引物为5'-cgcggatccatggcagagggaggaggcggagc-3'；
29、所述反向引物为5'-ccgctcgagttaca本文档来自技高网...
【技术保护点】
1. 一种VP2重组基因，其特征在于，所述VP2重组基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.一种引物组，其特征在于，用于扩增得到权利要求1所述VP2重组基因，包括正向引物和反向引物，
3. 一种VP2重组蛋白，其特征在于，由权利要求1所述的VP2重组基因编码得到，所述重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
4.单克隆抗体，其特征在于，由权利要求3所述的重组蛋白制备得到。
5.根据权利要求4所述的单克隆抗体，其特征在于，包括以下单克隆抗体中的至少一种：
6.根据权利要求5所述的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体的重链恒定区为IgG1；轻链恒定区为Kappa型。
7.根据权利要求6所述的单克隆抗体，其特征在于，腹水抗体效价不低于8×106。
8.根据权利要求4~7任意一项所述的单克隆抗体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
9.根据权利要求8所述的单克隆抗体的制备方法，其特征在于，所述重组蛋白的免疫量为50~100mg；
10.如权利要求4~7任意
...【技术特征摘要】
1. 一种vp2重组基因，其特征在于，所述vp2重组基因的核苷酸序列如seq id no.1所示。
2.一种引物组，其特征在于，用于扩增得到权利要求1所述vp2重组基因，包括正向引物和反向引物，
3. 一种vp2重组蛋白，其特征在于，由权利要求1所述的vp2重组基因编码得到，所述重组蛋白的氨基酸序列如seq id no.2所示。
4.单克隆抗体，其特征在于，由权利要求3所述的重组蛋白制备得到。
5.根据权利要求4所述的单克隆抗体，其特征在于，包括以下单克隆抗体中的至少一种：
6.根据...
【专利技术属性】
技术研发人员：袁万哲，刘琳敏，雷白时，赵款，张武超，赵海成，未钰杨，刘丽，刘庆浩，
申请(专利权)人：河北农业大学，
类型：发明
国别省市：
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