【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于医药分析，具体涉及一种利用hplc测定对甲苯胺中杂质含量的方法。
技术介绍
1、对甲苯胺主要作为染料中间体，亦可作为药品中间体。根据对甲苯胺工艺路线，在制备中间体过程中会产生工艺副产物杂质邻硝基甲苯、间硝基甲苯、对硝基甲苯和间甲苯胺，而目前尚未有利用hplc分离检测对甲苯胺中的邻硝基甲苯、间硝基甲苯、对硝基甲苯和间甲苯胺的方法，因此，提供一种快速、有效、准确可靠的利用hplc分离检测对甲苯胺中杂质含量的方法迫在眉睫，对于原料制剂的生成和贮存具有重要意义，且可提高患者的用药安全性。
技术实现思路
1、针对现有技术存在的上述问题，本专利技术所要解决的技术问题在于提供一种利用hplc测定对甲苯胺中杂质含量的方法，能够快速、有效、准确可靠的分离检测对甲苯胺中杂质含量，提高患者的用药安全性。
2、为了解决上述问题，本专利技术所采用的技术方案如下：
3、一种利用hplc测定对甲苯胺中杂质含量的方法，具体步骤如下：
4、1)配制对照品溶液和供试品溶液；
5、2)设置高效液相检测条件；采用以十八烷基键合硅胶为填充剂的色谱柱；流动相为流动相a和流动相b的混合溶液，用流动相进行梯度洗脱；其中，流动相a为1％磷酸氢二钾溶液与磷酸的混合溶液，流动相b为乙腈；
6、3)分别吸取供试品溶液和对照品溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图，观察并计算对甲苯胺中杂质的含量。
7、进一步的，步骤1)中，供试品溶液的制备方法为：精密称取对甲
8、进一步的，步骤2)中，色谱柱长250mm，内径4.6mm，填料粒径5μm。
9、进一步的，步骤2)中，色谱柱的柱温为40℃。
10、进一步的，步骤2)中，1％磷酸氢二钾溶液与磷酸的体积比为1000:2。
11、进一步的，步骤2)中，流动相a与流动相b的体积比65:35。
12、进一步的，步骤2)中，按如下方法用流动相进行梯度洗脱：先将流动相a与流动相b以65:35的体积比洗脱30min，然后以40:60的体积比洗脱至45min，洗脱完毕；其中，梯度洗脱的流速为1.0ml/min。
13、进一步的，步骤2)中，流动相在检测运行时的流速为1.0ml/min。
14、进一步的，步骤3)中，供试品溶液和对照品溶液的进样量为10μl。
15、进一步的，步骤3)中，液相色谱仪的检测波长为210nm。
16、有益效果：相比于现有技术，本专利技术的优点为：
17、(1)本专利技术在210nm检测波长下，对于杂质峰，邻硝基甲苯峰面积小于等于对照溶液的主峰面积的0.2倍，间硝基甲苯峰面积小于等于对照溶液的主峰面积的0.2倍，对硝基甲苯峰面积小于等于对照溶液的主峰面积的0.2倍，间甲苯胺峰面积小于等于对照溶液的主峰面积的0.2倍，单个杂质峰面积小于等于对照溶液的主峰面积的0.2倍，各杂质峰面积的和小于等于对照溶液主峰面积。对甲苯胺与各杂质之间能很好分离，溶剂峰不干扰主成分及杂质的检测。
18、(2)本专利技术在各条件下破坏样品经峰纯度检测，光谱纯度均大于990，各条件下破坏产生的杂质均能与主峰很好地分离，有关物质检测专属性良好；同时对色谱条件参数发生微小变化时对对甲苯胺有关物质杂质分离与检查结果没有影响，耐用性良好。
19、(3)本专利技术使用hplc能够快速、有效、准确和可靠的分离检测出对甲苯胺中的有关物质，有利于提高对甲苯胺的产品质量，提高患者用药安全性。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种利用HPLC测定对甲苯胺中杂质含量的方法，其特征在于，具体步骤如下：
2.根据权利要求1所述的利用HPLC测定对甲苯胺中杂质含量的方法，其特征在于，步骤1)中，供试品溶液的制备方法为：精密称取对甲苯胺置容量瓶中，加入溶剂稀释定容成每1mL含对甲苯胺0.5mg的溶液；对照品溶液的制备方法为：精密量取供试品溶液置容量瓶中，加溶剂稀释定容成每1mL含对甲苯胺5μg的溶液；其中，所述溶剂为流动相A与流动相B的体积比为65:35的混合溶液。
3.根据权利要求1所述的利用HPLC测定对甲苯胺中杂质含量的方法，其特征在于，步骤2)中，色谱柱长250mm，内径4.6mm，填料粒径5μm。
4.根据权利要求1所述的利用HPLC测定对甲苯胺中杂质含量的方法，其特征在于，步骤2)中，色谱柱的柱温为40℃。
5.根据权利要求1所述的利用HPLC测定对甲苯胺中杂质含量的方法，其特征在于，步骤2)中，1％磷酸氢二钾溶液与磷酸的体积比为1000:2。
6.根据权利要求1所述的利用HPLC测定对甲苯胺中杂质含量的方法，其特征在于，步骤2)中，流
7.根据权利要求1所述的利用HPLC测定对甲苯胺中杂质含量的方法，其特征在于，步骤2)中，按如下方法用流动相进行梯度洗脱：先将流动相A与流动相B以65:35的体积比洗脱30min，然后以40:60的体积比洗脱至45min，洗脱完毕；其中，梯度洗脱的流速为1.0mL/min。
8.根据权利要求1所述的利用HPLC测定对甲苯胺中杂质含量的方法，其特征在于，步骤2)中，流动相在检测运行时的流速为1.0mL/min。
9.根据权利要求1所述的利用HPLC测定对甲苯胺中杂质含量的方法，其特征在于，步骤3)中，供试品溶液和对照品溶液的进样量为10μL。
10.根据权利要求1所述的利用HPLC测定对甲苯胺中杂质含量的方法，其特征在于，步骤3)中，液相色谱仪的检测波长为210nm。
...【技术特征摘要】
1.一种利用hplc测定对甲苯胺中杂质含量的方法，其特征在于，具体步骤如下：
2.根据权利要求1所述的利用hplc测定对甲苯胺中杂质含量的方法，其特征在于，步骤1)中，供试品溶液的制备方法为：精密称取对甲苯胺置容量瓶中，加入溶剂稀释定容成每1ml含对甲苯胺0.5mg的溶液；对照品溶液的制备方法为：精密量取供试品溶液置容量瓶中，加溶剂稀释定容成每1ml含对甲苯胺5μg的溶液；其中，所述溶剂为流动相a与流动相b的体积比为65:35的混合溶液。
3.根据权利要求1所述的利用hplc测定对甲苯胺中杂质含量的方法，其特征在于，步骤2)中，色谱柱长250mm，内径4.6mm，填料粒径5μm。
4.根据权利要求1所述的利用hplc测定对甲苯胺中杂质含量的方法，其特征在于，步骤2)中，色谱柱的柱温为40℃。
5.根据权利要求1所述的利用hplc测定对甲苯胺中杂质含量的方法，其特征在于，步骤2)中，1％磷酸氢二钾溶液与磷酸的体积比为10...
【专利技术属性】
技术研发人员：许逸清，牛犇，贾志祥，赵杰，田娟，
申请(专利权)人：江苏联环药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。