本发明专利技术公开了一种从丹参中提取的新的酚酸类化合物丹酚酸Ｍ，该新化合物也可以从丹参注射液中提取，发明专利技术同时公开了分别从丹参和丹参注射液中该新化合物的提取方法。药理研究表明丹酚酸Ｍ具有心肌保护和抗氧化活性，因而具有进一步研制开发成有效的治疗心血管疾病药物的前景，且可以用于丹参注射液质量控制标准中。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种从丹参或丹参注射液中提取的新的酚酸类化合物，本专利技术还涉及这一新化合物的制备方法及其在制备治疗心血管疾病药物和丹参注射液质量控制中的用 途。
技术介绍
丹参注射液是中药材丹参经过现代工艺提取加工而成，用于心脑血管疾病预防和 治疗，主要应用于活血化瘀，通脉养心，冠心病胸闷和心绞痛，临床应用已有20余年，其中 的活性成分主要为以丹参素、丹酚酸B为主的酚酸类化合物，目前尚有大量有效成分未被 发现。 国内已有66个厂家拥有丹参注射液的药品批准文号，制备方法均参照部颁标准 WS3-B-3766-98-2004，其含测指标和鉴别指标均只有原儿茶醛一种有效成分，显然不能满 足提高中药注射液治疗标准的要求。
技术实现思路
为了全面提高丹参注射剂的安全性、有效性和质量可控性，深入研究其活性物质 基础，经过大量的实验研究，利用现代分离提取技术和结构确定手段，在丹参制剂中发现了 一种新的丹酚酸类化合物，药理研究表明化合物有很好的心肌保护活性和明显的抗氧化活 性。由于该新化合物与已发现的丹酚酸A、丹酚酸B等酚酸类结构相近，故将该化合物命名 为丹酚酸M，其结构式为式A所示 <formula>formula see original document page 4</formula> 式A 丹酚酸M化学名称为 3_(3，4_dihydroxyphenyl)_2_(3_(3_(3，4_dihydroxyphenyl)_2， 7_dihydroxy_2， 3_dihydrobenzofu:ran_4_yl)acryloyloxy)propanoic acid 5 (3- (3 ， 4- 二羟基苯基)-2- (3- (3_ (3 ， 4_ 二羟基苯基(-2 ， 7_ 二羟基_2 ， 3_ 二氢苯 并呋喃-4_)丙烯酰氧基)_丙酸。丹酚酸M :淡黄色粉末，高分辨质谱HR-ESI-MS给出分子量为510. 1053，分子式为C^H^Oll UV吸收光谱Amax(MeOH)nm(log e ) :324 (3. 2) ， 290 (3. 16)，旋光[a]25D = 8 (MeOH， lmg/ml); 红外光谱IR(KBr) ， Vmax/cm—1 :3387， 1696， 1612， 1518， 1448， 1265， 1172， 1072。 ESI-MS显示准分子离子峰为m/z509[M-H]—，表明该化合物分子量为510，多级质谱 碎片离子峰主要有m/z311[M-H-198]—，表明该化合物含有(3，4_二羟基)乳酸(丹参素) 结构片段； 核磁共振氢谱显示共有10个不饱和质子信号和5个饱和质子信号，其中S 7. 53 和S 6. 20 (J = 16. OHz)为一对双键质子信号。三个芳香质子S 6. 45 (bs) 、 S 6. 87 (d， J = 8. OHz) 、 S 6. 50 (m， J = 8. OHz)和另三个芳香质子S 6. 70 (bs) 、 S 6. 73 (d， J = 8. OHz)以 及S 6. 49 (dd， J = 8. 0， 1. 5Hz)分别属于两个ABX耦合系统，两个芳香质子信号S 7. 15和S 6. 82 (J = 8. OHz)属于AB偶合系统。信号S 3. 05 (dd， J = 14. 5， 4. OHz) 、 S 2. 94 (dd， J = 14. 5， 4. OHz)以及S 5. 09(dd，J = 4. OHz)构成OCHCH2片段。信号S 4. 38(bs)禾P S 5. 65(bs) 构成OCHCH片段，其中，信号S5.65对应的碳信号为S 108. 3，推测该碳信号为半縮醛或縮 醛。利用DMSO-de作为核磁共振溶剂，观察到羟基质子信号S7.47(bs)与该碳上质子信号S 5. 65的力」H COSY相关，证实了为半縮醛结构。利用2D-NMRCHJH COSY、HMQC、HMBC)，鉴定了该化合物的平面结构，并归属了所有 碳氢信号。查阅了国内外相关文献后确定该化合物为未见文献报道的新骨架化合物。 氢谱和碳谱数据归属如下 丹酚酸M氢谱和碳谱数据(CD3OD)，单位S :ppm<table>table see original document page 6</column></row><table> 本专利技术提供的该化合物的制备方法为 丹参药材加水煎煮，合并煎液，滤过，滤液减压浓縮。乙醇沉淀，滤过，滤液回收乙醇，蒸馏水稀释，过制备液相分离、纯化，冷冻干燥后得到淡黄色粉末，即为该化合物。 制备液相分离条件流动相由0. 05%甲酸-水(A)和乙腈(B)组成，梯度洗脱程序为0 28min，A-B(82 : 18，v/v) ;28 60min， A-B (82 : 18 65 : 35， v/v)，流速4mL/min，分离用半制备色谱柱为Zorbax SB_C18 (9. 4mmX 25cm， 5 y m)，保留时间tR = 22. lmin。 丹酚酸M也可以直接在根据部颁标准制备的丹参注射液中分离得到，分离条件可参考上述条件。 ZORBAX StableBond (SB)反相HPLC系列色谱柱在低pH下具有超常稳定性和重现性。其独特的单官能团硅烷空间保护键合相在低pH下不被水解，还可以耐受很高的温度，最高900C。其中的SB-Cw半制备柱(9.4mmX25cm)适用于低毫克级物质的制备，根据待分离物质的量，可是选择合适的C18半制备型和制备型色谱柱。 专利技术效果 本专利技术提供了一种新的酚酸类化合物丹酚酸M，由于其化学结构是新的且具有心肌保护和抗氧化活性，因而具有进一步研制开发成有效的治疗心血管疾病药物的前景，且可以用于丹参注射液质量控制标准中。说明书附图 丹参注射液的LC-MS指纹图谱具体实施例方式下面结合实施例对本专利技术做进一步详细的描述，但不以此限制本专利技术。 实施例1.丹酚酸M的制备方法 以丹参药材为原料取丹参1500g，加水8倍量煎煮三次，第一次2小时，第二 、三次各1. 5小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓縮至7 50m 1 。加乙醇沉淀二次，第一次使含醇量为75%，第二次使含醇量为85%，每次均冷藏放置后滤过，滤液回收乙醇，并浓縮至约250ml，加蒸馏水至400ml，混匀，静置，滤过。使用半制备色谱柱为ZorbaxSB-C^(9.4mmX25cm，5i!m)分离、纯化，冷冻干燥后得到淡黄色粉末，即获得该化合物50.lmg。流动相由0.05%甲酸-水(A)和乙腈(B)组成，梯度洗脱程序为0 28min，A-B(82 : 18，v/v) ;28 60min， A-B(82 : 18 65 : 35， v/v)，流速4ml/min，分离用，保留时间tK = 22. lmin。 实施例2.丹酚酸M的制备方法 以丹参药材为原料取丹参1500g，加6倍量水煎煮三次，每次1. 5小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓縮至750ml。加乙醇沉淀二次，各使含醇量为75%，静置后滤过，滤液回收乙醇，并浓縮至约250ml浸膏。浸膏蒸馏水稀释，静置，滤过。使用半制备色谱柱分离、纯化，冷冻干燥后得到本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种酚酸类化合物丹酚酸Ｍ，其结构式为： ＊＊＊。
【技术特征摘要】
一种酚酸类化合物丹酚酸M，其结构式为F2009101548417C0000011.tif2. —种制备丹酚酸M的方法，其特征在于取丹参注射液，过半制备色谱柱分离、纯化， 冷冻干燥后得到淡黄色粉末，即获得该化合物。流动相由0. 05%甲酸-水和乙腈组成，梯度洗脱程序为0 — 28min — 60min :乙腈 18%— 18%— 35X，流速4ml/min，分离用半制备色谱柱为Zorbax SB_C18(9. 4mmX25cm)， 保留时间tK = 22. lmin。3. —种制备丹酚酸M的方法，其特征在于丹参药材加6-8倍量水煎煮二 三次，每 次1. 5 2小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓縮。乙醇沉淀二次，是每次含醇量在75% 85% ，滤过，滤液回收乙醇，蒸馏水稀释，静置过滤，过制备液相分离、纯化，冷冻干燥后得到 淡黄色粉末，即为该化合物；制备液相分离条件为流动相由0. 05%甲酸-水和乙腈组成，梯度洗脱程序为 0 — 28min — 60min，乙腈18% — 18%— 35%，流速4ml/min，分离用半制备色谱柱为 SB-C18，9. 4mmX25cm，5iim，保留时间tK = 22. lmin。4. 权利要求2所述的一种制备丹酚酸M的方法，其特征在于取丹参1500g，加水8倍 量煎煮三次，第一次2小时，第二、三次各1.5小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓縮至750ml ; 加乙醇沉淀二次，第一次使含醇量为75%，第二次使含醇量为85%...
【专利技术属性】
技术研发人员：瞿海斌，程翼宇，范骁辉，徐金钟，莫必琪，聂晶，王治，周天芳，王木兰，张晓丽，
申请(专利权)人：正大青春宝药业有限公司，
类型：发明
国别省市：86[中国|杭州]
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