【技术实现步骤摘要】
本申请涉及生物，特别涉及一种多过敏原同步检测芯片和其制备方法、试剂盒。
技术介绍
1、淋巴细胞在抗原刺激下转化为浆细胞，产生能与相应抗原发生特异性结合的抗体，称为免疫球蛋白。免疫球蛋白e（ige）为免疫球蛋白超家族的成员之一，主要由呼吸道和消化道黏膜固有层的浆细胞产生，在正常人的血液中含量极低，约占血清总ig的0.002%。
2、过敏性疾病多为免疫球蛋白e（ige）介导的i型变态反应。ige对肥大细胞和嗜碱性粒细胞具有高度亲和性，变应原进机体诱导抗原“特异性b细胞”产生的ige类抗体发生应答，ige的fc段与肥大细胞或嗜碱性粒细胞的fcεri结合，形成致敏的肥大细胞或嗜碱性粒细胞（致敏阶段）；处于致敏状态的机体再次接触相同变应原时，变应原与致敏的肥大细胞表面的2个以上相邻ige结合，最终导致肥大细胞或嗜碱性粒细胞脱颗粒，释放多种生物活性物质，包括组胺、细胞因子、脂类介质和酶类，这些物质引发局部或全身i型变态反应。
3、牛奶、鸡蛋和小麦是常见的食物过敏原，在婴幼儿中对这几类食物产生过敏反应的现象更为常见。准确找到过敏原，并提前采取干预措施避免接触过敏原可以有效降低儿童过敏性疾病的发病率。
4、如何精准识别过敏原一直是困扰临床的重要问题。特异性ige（sige)检测在过敏性疾病的体外诊断中起着关键作用，sige水平越高，其与过敏性疾病的相关性就越强。血清sige水平的临界值为0.35ku/l，超过该值即为阳性，提示机体处于致敏状态。临床一般采用体外检测的方法测试sige水平，包括放射过敏原吸附试验
5、血清过敏原特异性 ige(specific ige，sige)抗体检测可以迅速寻找可能存在的过敏原并指导治疗，是疾病诊治过程中关键的检验技术方法。目前，过敏原检测主要对单指标进行检测，针对儿童的食入性的过敏原芯片全定量检测尚未开发完善，检出效率也有待提升。
6、基于此，有必要开发一种可同时检测多种食物蛋白的组分特异性ige(sige)的产品，提升儿童过敏原检出效率，更好地指导临床个体化管理食物过敏患者。
技术实现思路
1、基于此，本申请一个或多个实施例提供了一种可以同时高灵敏度、高准确性、高通量检测鸡蛋、牛奶、小麦三项食物过敏原的芯片和试剂盒。
2、本申请的技术方案包括如下内容：
3、一种多过敏原同步检测芯片，包括载体和固定于所述载体之上的多个反应位点；
4、多个所述反应位点包括f1类的反应位点、f2类的反应位点和f4类的反应位点；
5、所述f1类的反应位点包括固定有抗原gal d 1的位点、固定有抗原gal d 2的位点、固定有抗原gal d 3的位点、固定有抗原gal d4的位点中的一种；
6、所述f2类的反应位点包括固定有抗原bos d 5的位点、固定有抗原bos d 6的位点、固定有抗原bos d 9的位点和固定有抗原bos d 11的位点中的至少一种；
7、所述f4类的反应位点包括固定有抗原tri a 14的位点、固定有抗原tri a 19的位点、固定有抗原tri a 21的位点、固定有抗原tri a 28的位点、固定有抗原tri a 33的位点和固定有抗原tri a 40的位点中的至少一种。
8、进一步地，多个所述反应位点包括：
9、固定有抗原gal d 1的位点、固定有抗原gal d 2的位点、固定有抗原gal d 3的位点、固定有抗原gal d4的位点、固定有抗原bos d 5的位点、固定有抗原bos d 6的位点、固定有抗原bos d 9的位点和固定有抗原bos d 11的位点、固定有抗原tri a 14的位点、固定有抗原tri a 19的位点、固定有抗原tri a 21的位点、固定有抗原tri a 28的位点、固定有抗原tri a 33的位点和固定有抗原tri a 40的位点。
10、进一步地，所述抗原为重组表达的蛋白。
11、本申请还提供了上述任一技术方案所述的多过敏原同步检测芯片的制备方法，包括：
12、将不同种类的抗原分别配制成抗原溶液并点样于所述载体之上，再将载体没入封闭液中进行封闭。
13、进一步地，所述封闭液为含有封闭蛋白的缓冲液；
14、所述封闭蛋白为牛血清白蛋白或卵清蛋白；
15、所述缓冲液包括pbs缓冲液、tris缓冲液、heps缓冲液和mops缓冲液中的至少一种。
16、进一步地，所述载体的材质为黑玻片。
17、进一步地，将不同种类的抗原分别配制成抗原溶液并点样之前，将黑玻片置于含有naoh的玻片预处理液中浸泡16h～24h，再采用纯化水清洗2～8次，再于质量浓度为0.05wt％～1wt％的硅烷溶液中浸泡20min～60min，再于100℃～180℃条件下烘烤0.2h～0.6h。
18、进一步地，将不同种类的抗原分别配制成抗原溶液并点样于所述载体之，包括：
19、采用自动点样设备在所述载体上点样，形成矩阵，所述矩阵的每列为同一抗原溶液形成的反应位点。
20、本申请一实施例还提供一种多过敏原同步检测试剂盒，包括上述任一技术方案所述的多过敏原同步检测芯片或制备方法制得的多过敏原同步检测芯片。
21、进一步地，所述的多过敏原同步检测试剂盒还包括标记有辣根过氧化物酶的第二抗体溶液和对标记物敏感的化学发光底物。
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1.一种多过敏原同步检测芯片，其特征在于，包括载体和固定于所述载体之上的多个反应位点；
2.如权利要求1所述的多过敏原同步检测芯片，其特征在于，多个所述反应位点包括：
3.如权利要求1所述的多过敏原同步检测芯片，其特征在于，所述抗原为重组表达的蛋白。
4.权利要求1~3任一项所述的多过敏原同步检测芯片的制备方法，其特征在于，包括：
5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述封闭液为含有封闭蛋白的缓冲液；
6.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述载体的材质为黑玻片。
7.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，将不同种类的抗原分别配制成抗原溶液并点样之前，将黑玻片置于含有NaOH的玻片预处理液中浸泡16h～24h，再采用纯化水清洗2～8次，再于质量浓度为0.05wt％～1wt％的硅烷溶液中浸泡20min～60min，再于100℃～180℃条件下烘烤0.2h～0.6h。
8.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，将不同种类的抗原分别配制成抗原溶液并点样于所述载体之，包括：
10.根据权利要求9所述的多过敏原同步检测试剂盒，其特征在于，还包括标记有辣根过氧化物酶的第二抗体溶液和对标记物敏感的化学发光底物。
...【技术特征摘要】
1.一种多过敏原同步检测芯片，其特征在于，包括载体和固定于所述载体之上的多个反应位点；
2.如权利要求1所述的多过敏原同步检测芯片，其特征在于，多个所述反应位点包括：
3.如权利要求1所述的多过敏原同步检测芯片，其特征在于，所述抗原为重组表达的蛋白。
4.权利要求1~3任一项所述的多过敏原同步检测芯片的制备方法，其特征在于，包括：
5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述封闭液为含有封闭蛋白的缓冲液；
6.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述载体的材质为黑玻片。
7.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，将不同种类的抗原分别配制成抗原溶液并点样之前，将黑...
【专利技术属性】
技术研发人员：袁颖，俞丽娜，沈鹏，丁俊杰，史新乔，杨金平，
申请(专利权)人：江苏三联生物工程股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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