【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
技术介绍
1、病毒载体介导的基因疗法是用于治疗各种遗传性和获得性疾病的最有前途的方法之一。单次aav施用通常持续数月至数年，使基因表达超过治疗水平。参见例如verdera,h.c.；kuranda,k.；mingozzi,f.,aav载体在人类中的免疫原性：成功基因转移的漫长旅程(aav vector immunogenicity in humans:a long journey to successful genetransfer.)《分子疗法(mol.ther.)》2020,28(3),723-746。然而，许多遗传性疾病需要终身治疗，以避免不可逆的组织损伤(jackson,m.等人,疾病的遗传基础(the genetic basisof disease.)《生物化学论文(essays biochem.)》2018,62(5),643-723)。增加施用剂量可能会延长治疗窗口，但对潜在毒性的担忧也会增加(khabou,h.等人,腺相关病毒相关毒性中的转基因盒的阈值和影响(thresholds and influence of transgene cassette inadeno-associated virus-related toxicity.)《人类基因疗法(hum.gene ther.)》2018,29(11),1235-1241；以及hinderer,c.等人,在非人灵长类动物和仔猪中高剂量静脉内施用表达人smn的腺相关病毒载体后的严重毒性(severe toxicity in nonhuman primatesa
2、在一些情况下，当将常规病毒载体引入到受试者体内时，受试者会表现出不期望的免疫原性应答。尽管与其它病毒载体相比，aav被认为是低免疫原性和安全的，但衣壳的免疫原性仍然是aav载体的重新施用的主要障碍(verdera,h.c.等人,aav载体在人类中的免疫原性：成功基因转移的漫长旅程)《分子疗法》2020,28(3),723-746)。在临床前动物研究和人类患者中观察到体液免疫和细胞介导的免疫两者(boutin,s.等人,健康群体中的血清igg和抗腺相关病毒(aav)1、2、5、6、8和9型中和因子的患病率：使用aav载体进行基因疗法的意义(prevalence ofserum igg and neutralizing factors against adeno-associated virus(aav)types 1,2,5,6,8,and 9in the healthy population:implications for gene therapy using aav vectors.)《人类基因疗法》2010,21(6),704-712；以及calcedo,r.；wilson,j.m.,对aav的体液免疫应答(humoral immuneresponse to aav.)《免疫学前沿(front.immunol.)》2013,4,341)。本文公开了减少这种针对病毒载体介导的治疗的不期望的免疫原性应答的方法和组合物。本文公开了组合物和方法，所述组合物和方法集中于减轻病毒载体的免疫原性并且实现基于病毒的基因递送的多次施用。
技术实现思路
1、本公开首先涉及减轻病毒载体的免疫原性的组合物和方法，使得能够多次施用如基因递送病毒载体等病毒载体。本文中所描述的病毒载体有利地具有低免疫原性并且包括至少一个免疫抑制部分(ism)。
2、在第一方面，本公开涉及经修饰的病毒载体，所述经修饰的病毒载体含有至少一种病毒载体(vv)；以及至少一种免疫抑制部分(ism)，所述至少一种ism直接或通过连接子与所述病毒载体共价连接。
3、在一些实施例中，所述病毒载体是选自由以下组成的组的病毒：逆转录病毒、慢病毒、腺病毒和腺相关病毒(aav)。在一些实施例中，所述病毒载体是选自由以下组成的组的aav：aav1、aav2、aav3、aav4、aav5、aav6、aav7、aav8、aav9、aav10、aav11、aav6.2、aavrh10、aav-dj、aav-dj/8、aav-php.b、aav-php.eb、aav-php.s、aav2-retro、aav2-quadyf、aav2.7m8和其经基因工程化的衍生物。
4、在一些实施例中，所述免疫抑制部分(ism)包括一种或多种选自由以下组成的组的化合物：小分子、聚合物分子和肽，其中所述小分子、所述聚合物分子和所述肽的分子量为100-10,000g/mol。
5、在一些实施例中，所述ism包括磷酸丝氨酸(ps)，所述ps具有以下结构：
6、
7、其中波浪线表示与连接子键合的键或与所述病毒载体直接键合的键。
8、在一些实施例中，所述ism包括聚唾液酸(psa)。在一些实施例中，所述psa包括以下结构：
9、
10、其中ac表示乙酰基；并且n至少为2。
11、在一些实施例中，所述ism是一种或多种mtor抑制剂，例如雷帕霉素(rapamycin)、替西罗莫司(temsirolimus)、依维莫司(everolimus)、乌米莫司(umirolimus)以及其组合等。
12、在一些实施例中，所述ism包括选自由以下组成的组的一个或多个：芳香烃受体(ahr)配体、维生素d3、视黄酸、具有cxxc/cxxs侧接表位的肽，其中x是任何氨基酸，以及其组合。
13、在一些实施例中，所述ism包括一种或多种来自凋亡细胞的分子，例如磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine)、染色质寡核苷酸以及其组合等。
14、在一些实施例中，所述ism包括一个或多个次级淋巴器官(脾脏或淋巴结)靶向部分或肝脏靶向部分，例如n-乙酰半乳糖胺(galnac)、n-乙酰葡糖胺(glcnac)、n-乙酰神经氨酸(neuac或唾液酸)、半乳糖和岩藻糖以及其组合等。
15、在一些实施例中，所述ism包括一种或多种炎症减少部分，例如z2-y12、z1-y15、z1-y19、地塞米松(dexamethasone)、淋巴细胞功能相关抗原拮抗剂、d-甘露糖以及其组合等。
16、在一些实施例中，所述病毒载体和所述免疫抑制部分彼此直接共价连接。
17、在一些实施例中，所述病毒载体和所述免疫抑制部分通过连接子共价连接。在第十四组实施本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种经修饰的病毒载体，其包括：
2.根据权利要求1所述的经修饰的病毒载体，其中所述病毒载体是选自由以下组成的组的病毒：逆转录病毒、慢病毒、腺病毒和腺相关病毒(AAV)。
3.根据前述权利要求中任一项所述的经修饰的病毒载体，其中所述病毒载体是选自由以下组成的组的腺相关病毒(AAV)：AAV1、AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9、AAV10、AAV11、AAV6.2、AAVrh10、AAV-DJ、AAV-DJ/8、AAV-PHP.B、AAV-PHP.eB、AAV-PHP.S、AAV2-retro、AAV2-QuadYF、AAV2.7m8和其经基因工程化的衍生物。
4.根据前述权利要求中任一项所述的经修饰的病毒载体，其中所述免疫抑制部分(ISM)包括一种或多种选自由以下组成的组的化合物：小分子、聚合物分子和肽，其中所述小分子、所述聚合物分子和所述肽的分子量为100-10,000g/mol。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的经修饰的病毒载体，其中所述免疫抑制部分(ISM)包括磷酸丝氨酸(P
6.根据权利要求1至4中任一项所述的经修饰的病毒载体，其中所述免疫抑制部分(ISM)包括聚唾液酸(PSA)。
7.根据权利要求6所述的经修饰的病毒载体，其中所述PSA包括以下结构：
8.根据前述权利要求中任一项所述的经修饰的病毒载体，其中所述免疫抑制部分(ISM)包括一种或多种mTOR抑制剂。
9.根据权利要求8所述的经修饰的病毒载体，其中所述一种或多种mTOR抑制剂选自由以下组成的组：雷帕霉素(Rapamycin)、替西罗莫司(Temsirolimus)、依维莫司(Everolimus)、乌米莫司(Umirolimus)以及其组合。
10.根据前述权利要求中任一项所述的经修饰的病毒载体，其中所述免疫抑制部分包括选自由以下组成的组的一个或多个：芳香烃受体(AHR)配体、维生素D3、视黄酸、具有CxxC/CxxS侧接表位的肽(其中x是任何氨基酸)，以及其组合。
11.根据前述权利要求中任一项所述的经修饰的病毒载体，其中所述免疫抑制部分包括一种或多种来自凋亡细胞的分子。
12.根据权利要求11所述的经修饰的病毒载体，其中所述一种或多种来自凋亡细胞的分子选自由以下组成的组：磷脂酰丝氨酸、染色质寡核苷酸以及其组合。
13.根据前述权利要求中任一项所述的经修饰的病毒载体，其中所述免疫抑制部分包括一个或多个次级淋巴器官(脾脏或淋巴结)靶向部分或肝脏靶向部分。
14.根据权利要求13所述的经修饰的病毒载体，其中所述一个或多个次级淋巴器官靶向部分或肝脏靶向部分选自由以下组成的组：N-乙酰半乳糖胺(GalNAc)、N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)、N-乙酰神经氨酸(NeuAc或唾液酸)、半乳糖和岩藻糖以及其组合。
15.根据前述权利要求中任一项所述的经修饰的病毒载体，其中所述免疫抑制部分包括一个或多个炎症减少部分。
16.根据权利要求15所述的经修饰的病毒载体，其中所述炎症减少部分选自Z2-Y12、Z1-Y15、Z1-Y19、地塞米松(dexamethasone)、淋巴细胞功能相关抗原拮抗剂、d-甘露糖以及其组合。
17.根据权利要求1至16中任一项所述的经修饰的病毒载体，其中所述病毒载体和所述免疫抑制部分彼此直接共价连接。
18.根据权利要求1至16中任一项所述的经修饰的病毒载体，其中所述病毒载体和所述免疫抑制部分通过连接子共价连接。
19.根据权利要求18所述的经修饰的病毒载体，其中所述连接子包括连接子肽和/或交联剂化合物。
20.根据权利要求19所述的经修饰的病毒载体，其中所述连接子肽是25个氨基酸的肽或25个氨基酸以下的的肽。
21.根据权利要求19或20所述的经修饰的病毒载体，其中所述连接子肽包括交替的Glu-Lys(EK)肽或Lys-Lys(KK)肽。
22.根据权利要求19或20所述的经修饰的病毒载体，其中所述连接子肽包括(KK)8-C-NH2或其衍生物。
23.根据权利要求19至22中任一项所述的经修饰的病毒载体，其中所述交联剂化合物包括N-羟基琥珀酰亚胺酯-马来酰亚胺异双官能脂肪族试剂。
24.根据权利要求19至23中任一项所述的经修饰的病毒载体，其中所述交联剂化合物选自由以下组成的组：AMAS、BMPS、GMBS、Sulfo-GMBS、MBS、Sulfo-MBS、SMCC、Sulfo-SMCC...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种经修饰的病毒载体，其包括：
2.根据权利要求1所述的经修饰的病毒载体，其中所述病毒载体是选自由以下组成的组的病毒：逆转录病毒、慢病毒、腺病毒和腺相关病毒(aav)。
3.根据前述权利要求中任一项所述的经修饰的病毒载体，其中所述病毒载体是选自由以下组成的组的腺相关病毒(aav)：aav1、aav2、aav3、aav4、aav5、aav6、aav7、aav8、aav9、aav10、aav11、aav6.2、aavrh10、aav-dj、aav-dj/8、aav-php.b、aav-php.eb、aav-php.s、aav2-retro、aav2-quadyf、aav2.7m8和其经基因工程化的衍生物。
4.根据前述权利要求中任一项所述的经修饰的病毒载体，其中所述免疫抑制部分(ism)包括一种或多种选自由以下组成的组的化合物：小分子、聚合物分子和肽，其中所述小分子、所述聚合物分子和所述肽的分子量为100-10,000g/mol。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的经修饰的病毒载体，其中所述免疫抑制部分(ism)包括磷酸丝氨酸(ps)，所述ps具有以下结构：
6.根据权利要求1至4中任一项所述的经修饰的病毒载体，其中所述免疫抑制部分(ism)包括聚唾液酸(psa)。
7.根据权利要求6所述的经修饰的病毒载体，其中所述psa包括以下结构：
8.根据前述权利要求中任一项所述的经修饰的病毒载体，其中所述免疫抑制部分(ism)包括一种或多种mtor抑制剂。
9.根据权利要求8所述的经修饰的病毒载体，其中所述一种或多种mtor抑制剂选自由以下组成的组：雷帕霉素(rapamycin)、替西罗莫司(temsirolimus)、依维莫司(everolimus)、乌米莫司(umirolimus)以及其组合。
10.根据前述权利要求中任一项所述的经修饰的病毒载体，其中所述免疫抑制部分包括选自由以下组成的组的一个或多个：芳香烃受体(ahr)配体、维生素d3、视黄酸、具有cxxc/cxxs侧接表位的肽(其中x是任何氨基酸)，以及其组合。
11.根据前述权利要求中任一项所述的经修饰的病毒载体，其中所述免疫抑制部分包括一种或多种来自凋亡细胞的分子。
12.根据权利要求11所述的经修饰的病毒载体，其中所述一种或多种来自凋亡细胞的分子选自由以下组成的组：磷脂酰丝氨酸、染色质寡核苷酸以及其组合。
13.根据前述权利要求中任一项所述的经修饰的病毒载体，其中所述免疫抑制部分包括一个或多个次级淋巴器官(脾脏或淋巴结)靶向部分或肝脏靶向部分。
14.根据权利要求13所述的经修饰的病毒载体，其中所述一个或多个次级淋巴器官靶向部分或肝脏靶向部分选自由以下组成的组：n-乙酰半乳糖胺(galnac)、n-乙酰葡糖胺(glcnac)、n-乙酰神经氨酸(neuac或唾液酸)、半乳糖和岩藻糖以及其组合。
15.根据前述权利要求中任一项所述的经修饰的病毒载体，其中所述免疫抑制部分包括一个或多个炎症减少部分。
16.根据权利要求15所述的经修饰的病毒载体，其中所述炎症减少部分选自z2-y12、z1-y15、z1-y19、地塞米松(dexamethasone)、淋巴细胞功能相关抗原拮抗剂、d-甘露糖以及其组合。
17.根据权利要求1至16中任一项所述的经修饰的病毒载体，其中所述病毒载体和所述免疫抑制部分彼此直接共价连接。
18.根据权利要求1至16中任一项所述的经修饰的病毒载体，其中所述病毒载体和所述免疫抑制部分通过连接子共价连接。
19.根据权利要求18所述的经修饰的病毒载体，其中所述连接子包括连接子肽和/或交联剂化合物。
20.根据权利要求19所述的经修饰的病毒载体，其中所述连接子肽是25个氨基酸的肽或25个氨基酸以下的的肽。
21.根据权利要求19或20所述的经修饰的病毒载体，其中所述连接子肽包括交替的glu-lys(ek)肽或lys-lys(kk)肽。
22.根据权利要求19或20所述的经修饰的病毒载体，其中所述连接子肽包括(kk)8-c-nh2或其衍生物。
23.根据权利要求19至22中任一项所述的经修饰的病毒载体，其中所述交联剂化合物包括n-羟基琥珀酰亚胺酯-马来酰亚胺异双官能脂肪族试剂。
24.根据权利要求19至23中任一项所述的经修饰的病毒载体，其中所述交联剂化合物选自由以下组成的组：amas、bmps、gmbs、sulfo-gmbs、mbs、sulfo-mbs、smcc、sulfo-smcc、emcs、sulfo-emcs、smpb、sulfo-smpb、smph、lc-smcc和sulfo-kmus。
25.根据权利要求19至24中任一项所述的经修饰的病毒载体，其中所述经修饰的病毒载体包括多个所述连接子。
26.根据权利要求19至25中任一项所述的经修饰的病毒载体，其中每个连接子包括多个肽连接子和/或多个交联剂化合物。
27.根据权利要求19至26中任一项所述的经修饰的病毒载体，其中所述病毒载体包括表面位点，所述免疫抑制部分或所述连接子与所述表面位点共价结合。
28.根据权利要求27所述的经修饰的病毒载体，其中所述病毒载体的所述表面位点包括衣壳蛋白、gag蛋白、包膜蛋白和/或脂质层。
29.根据权利要求1至16中任一项所述的经修饰的病毒载体，其中所述经修饰的病毒载体包括以下结构：
30.根据权利要求1至16和29中任一项所述的经修饰的病毒载体，其中所述连接子或所述ism通过所述病毒载体的氨基基团与所述病毒载体连接。
31.根据权利要求30所述的经修饰的病毒载体，其中所述氨基基团位于所述病毒载体的衣壳或包膜上。
32.根据权利要求1至16和29至31中任一项所述的经修饰的病毒载体，其中所述连接子存在，并且所述经修饰的病毒载体包括以下结构：
33.根据权利要求32所述的经修饰的病毒载体，其中所述连接子通过所述病毒载体的氨基基团与所述病毒载体连接。
34.根据权利要求33所述的经修饰...
【专利技术属性】
技术研发人员：S·江，Z·袁，S·罗中，W·顾，R·李，B·李，
申请(专利权)人：康奈尔大学，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。