中药组合物的指纹图谱构建方法和检测方法技术

技术编号：41175079 阅读：4 留言：0更新日期：2024-05-07 22:11

本申请涉及一种中药组合物的指纹图谱构建方法，包括如下步骤：精密称定中药组合物(包括大黄、黄芪、桑白皮、苦参、党参、白术、茯苓、制何首乌、白芍、丹参、川芎、菊花、姜半夏、车前草、柴胡和甘草)，制成供试品溶液；精密称定芍药苷对照品，制成参照物溶液；分别进行高效液相色谱分析，得到供试品指纹图谱和参照物色谱图谱并基于此制定中药组合物的指纹图谱；高效液相色谱分析中以乙腈为流动相A，以体积浓度0.05％～0.2％的乙酸水溶液为流动相B。本申请还涉及一种基于上述指纹图谱的检测方法。本申请的指纹图谱具有特征性、重现性和可操作性，可为上述中药组合物的质量评价和控制提供科学依据。

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【技术实现步骤摘要】

本申请涉及中药质量检测和分析化学，具体涉及一种中药组合物的指纹图谱构建方法和检测方法。

技术介绍

1、全方由大黄、黄芪、桑白皮、苦参、党参、白术、茯苓、制何首乌、白芍、丹参、川芎、菊花、姜半夏、车前草、柴胡和甘草十六味药组成的中药组合物，具有通腑降浊、健脾利湿、活血化瘀的功效，适于中医辨证属脾虚湿浊症和脾虚血瘀症患者，可用于治疗慢性肾衰、氮质血症和尿毒症等疾病，对改善肾性贫血，提高血钙、降低血磷也有一定的作用。

2、然而目前针对该方的研究较少，且实验结果都不能全面的反映该方中的有效化学信息，不能很好的控制质量。

技术实现思路

1、本申请的目的包括提供上述中药组合物的标准指纹图谱，作为其质量检测的依据。

2、本申请的第一方面提供一种中药组合物的指纹图谱构建方法，包括如下步骤：

3、精密称定中药组合物，加入体积浓度50％～90％的甲醇水溶液进行提取，制得供试品溶液；所述中药组合物的原料包括大黄、黄芪、桑白皮、苦参、党参、白术、茯苓、制何首乌、白芍、丹参、川芎、菊花、姜半夏、车前草、柴胡和甘草；

4、精密称定芍药苷对照品，加溶剂溶解，制得参照物溶液；

5、精密吸取所述供试品溶液和所述参照物溶液，分别进行高效液相色谱分析，得到供试品指纹图谱和参照物色谱图谱，根据所述供试品指纹图谱和参照物色谱图谱得到所述中药组合物的指纹图谱；其中，所述进行高效液相色谱分析包括按照如下流动相条件进行洗脱：

6、以乙腈为流动相a，以体积浓度

7、在本申请的一些实施方式中，所述的指纹图谱构建方法中，所述洗脱的程序包括：

8、0～8min，保持所述流动相a的体积百分比为5％；

9、8min～30min，所述流动相a的体积百分比由5％上升至10％；

10、30min～38min，所述流动相a的体积百分比由10％上升至15％；

11、38min～58min，所述流动相a体积百分比由15％上升至15％；

12、58min～108min，所述流动相a的体积百分比由15％上升至30％；

13、108min～130min，所述流动相a的体积百分比由30％上升至90％。

14、在本申请的一些实施方式中，所述的指纹图谱构建方法中，所述高效液相色谱分析的条件包括如下特征中的一个或几个：

15、(a1)色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱；

16、(a2)柱温为20℃～40℃；

17、(a3)检测波长为200nm～330nm；

18、(a4)流动相的流速为0.5ml/min～1.5ml/min。

19、在本申请的一些实施方式中，所述的指纹图谱构建方法中，所述指纹图谱包括33个特征峰；其中，以14号芍药苷色谱峰为参照峰，各特征峰及其相对保留时间如下：峰1：0.108±0.109％；峰2：0.195±0.104％；峰3：0.259±0.096％；峰4：0.321±0.065％；峰5：0.362±0.068％；峰6：0.522±0.086％；峰7：0.570±0.063％；峰8：0.636±0.074％；峰9：0.759±0.052％；峰10：0.798±0.059％；峰11：0.825±0.054％；峰12：0.924±0.077％；峰13：0.954±0.064％；峰14：1.000±0.000％；峰15：1.271±0.055％；峰16：1.321±0.058％；峰17：1.374±0.049％；峰18：1.471±0.046％；峰19：1.534±0.078％；峰20：1.626±0.052％；峰21：1.672±0.064％；峰22：1.683±0.056％；峰23：1720±0.052％；峰24：1.796±0.047％；峰25：1.836±0.062％；峰26：1.907±0.048％；峰27：2.060±0.038％；峰28：2.130±0.047％；峰29：2.161±0.063％；峰30：2.424±0.051％；峰31：2.492±0.044％；峰32：2.585±0.038％；峰33：2.639±0.043％。

20、在本申请的一些实施方式中，所述的指纹图谱构建方法中，所述中药组合物的制备方法包括如下步骤：按照重量比(0.5～1.5)：(3-5)：(2-4)：(1-3)：(2-4)：(4-6)：(4-6)：(4-6)：(2-4)：(4-6)：(2-4)：(1.5-3.5)：(1-3)：(4-6)：(1-2)：(0.5-1.5)称取大黄、黄芪、桑白皮、苦参、党参、白术、茯苓、制何首乌、白芍、丹参、川芎、菊花、姜半夏、车前草、柴胡和甘草，将称取的各中药混合，加入水进行提取，制得提取液；

21、将所述提取液进行浓缩，制得浸膏；

22、将所述浸膏和药学上可接受的辅料混合，造粒，制得所述中药组合物。

23、在本申请的一些实施方式中，所述的指纹图谱构建方法，其特征在于，具有如下技术特征中的一种或几种：

24、(b1)所述将称取的各中药混合，加水进行提取的步骤中，各中药的总重量与所述水的质量体积比为1：(3～10)g/l；

25、所述提取的方式包括：加水煎煮1-3次，每次1-3小时，煎煮温度为60℃～100℃；

26、(b2)所述将所述提取液进行浓缩的步骤中，浓缩的方式包括：在真空状态、60℃～100℃加热。

27、本申请的第二方面提供一种中药组合物的检测方法，包括如下步骤：

28、将所述中药组合物用体积浓度50％～90％的甲醇水溶液进行提取，制成待测品溶液；所述中药组合物的原料包括黄、黄芪、桑白皮、苦参、党参、白术、茯苓、制何首乌、白芍、丹参、川芎、菊花、姜半夏、车前草、柴胡和甘草；

29、将所述待测品溶液进行高效液相色谱分析，生成待测样品图谱；

30、以本申请第一方面所述的指纹图谱构建方法制定的指纹图谱作为对照图谱，计算待测样品图谱和所述标准指纹图谱的相似度，相似度大于0.8即为质量合格。

31、在本申请的一些实施方式中，所述的检测方法中，所述色谱分析包括按照如下流动相条件进行洗脱：以乙腈为流动相a，以体积浓度0.05％～0.2％的乙酸水溶液为流动相b，所述流动相a和所述流动相b的体积百分比的总和为100％。

32、在本申请的一些实施方式中，所述的检测方法中，所述洗脱的程序包括：

33、0min～8min，保持所述流动相a的体积百分比为5％；

34、8min～30min，所述流动相a的体积百分比由5％上升至10％；

35、30min～38min，所述流动相a的体积百分比由10％上升至15％；

36、38min～58min，所述流动相a本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种中药组合物的指纹图谱构建方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的指纹图谱构建方法，其特征在于，所述洗脱的程序包括：

3.根据权利要求1或2所述的指纹图谱构建方法，其特征在于，所述高效液相色谱分析的条件包括如下特征中的一个或几个：

5.根据权利要求1所述的指纹图谱构建方法，其特征在于，所述中药组合物的制备方法包括如下步骤：按照重量比(0.5～1.5)：(3-5)：(2-4)：(1-3)：(2-4)：(4-6)：(4-6)：(4-6)：(2-4)：(4-6)：(2-4)：(1.5-3.5)：(1-3)：(4-6)：(1-2)：(0.5-1.5)称取大黄、黄芪、桑白皮、苦参、党参、白术、茯苓、制何首乌、白芍、丹参、川芎、菊花、姜半夏、车前草、柴胡和甘草，将称取的各中药混合，加入水进行提取，制得提取液；将所述提取液进行浓缩，制得浸膏；

6.根据权利要求5所述的指纹图谱构建方法，其特征在于，具有如下技术特征中的一种或几种：

7.一种中药组合物的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

8.根据权利要求7所述的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱分析包括按照如下流动相条件进行洗脱：以乙腈为流动相A，以体积浓度0.05％～0.2％的乙酸水溶液为流动相B，所述流动相A和所述流动相B的体积百分比的总和为100％。

9.根据权利要求8所述的检测方法，其特征在于，所述洗脱的程序包括：

10.根据权利要求根据权利要求9所述的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱分析的条件包括如下特征中的一个或几个：

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【技术特征摘要】

1.一种中药组合物的指纹图谱构建方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的指纹图谱构建方法，其特征在于，所述洗脱的程序包括：

3.根据权利要求1或2所述的指纹图谱构建方法，其特征在于，所述高效液相色谱分析的条件包括如下特征中的一个或几个：

4.根据权利要求1所述的指纹图谱构建方法，其特征在于，所述指纹图谱包括33个特征峰；其中，以14号芍药苷色谱峰为参照峰，各特征峰及其相对保留时间如下：峰1：0.108±0.109％；峰2：0.195±0.104％；峰3：0.259±0.096％；峰4：0.321±0.065％；峰5：0.362±0.068％；峰6：0.522±0.086％；峰7：0.570±0.063％；峰8：0.636±0.074％；峰9：0.759±0.052％；峰10：0.798±0.059％；峰11：0.825±0.054％；峰12：0.924±0.077％；峰13：0.954±0.064％；峰14：1.000±0.000％；峰15：1.271±0.055％；峰16：1.321±0.058％；峰17：1.374±0.049％；峰18：1.471±0.046％；峰19：1.534±0.078％；峰20：1.626±0.052％；峰21：1.672±0.064％；峰22：1.683±0.056％；峰23：1720±0.052％；峰24：1.796±0.047％；峰25：1.836±0.062％；峰26：1.907±0.048％；峰27：2.060±0.038％；峰...

【专利技术属性】
技术研发人员：王汝上，李政海，段婷婷，朱荃，钟铖，段子浩，钟泓玲，黄艳霞，麦瑞芬，黎婉莹，陈瑞君，
申请(专利权)人：康臣药业霍尔果斯有限公司，
类型：发明
国别省市：

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