【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及抗体领域，具体地，本专利技术涉及一种能够结合cd40的抗体或其抗原结合片段及用途。
技术介绍
1、cd40是i型膜蛋白，主要在抗原呈递细胞(apc)表面表达，包括b细胞、单核细胞、巨噬细胞和树突状细胞等。研究表明，cd40也表达在血小板以及一些非造血细胞如成纤维细胞，内皮细胞、平滑肌细胞等表面，部分类型的肿瘤细胞也表达cd40。靶向cd40的疗法在自身免疫性疾病和癌症等免疫相关疾病中均有应用。cd40l(cd40 ligand)是cd40的配体，是一种ii型膜蛋白，其在多种细胞表面表达，包括活化的cd4 t细胞、cd8 t细胞、nk细胞、粒细胞、内皮细胞、平滑肌细胞、巨噬细胞和血小板等。
2、cd40与cd40l的相互作用诱导体液及细胞介导的免疫应答。cd40l结合cd40后，向apc细胞内传递活化信号，促进apc细胞活化，上调共刺激配体如cd80、cd86表达，并促进apc增殖，进而促进免疫活化。在自身免疫性疾病中，利用阻断性cd40抗体结合cd40，抑制cd40的活化信号，能够缓解自身免疫性疾病患者如多发性硬化症等疾病的进展。
3、因此，业内亟需可用来干预cd40-cd40l结合的作用并阻断cd40信号传导的疾病药物。
技术实现思路
1、本专利技术旨在至少在一定程度上解决现有技术中存在的技术问题至少之一。目前，阻断性cd40抗体如iscalimab(诺华)、ravagalimab(艾伯维)等均处于临床试验阶段。专利技术人的研究发现，isca
2、基于此，专利技术人筛选得到一种鼠源抗cd40单克隆抗体，该单克隆抗体与人cd40蛋白具有较高的结合活性，此外，专利技术人对上述单克隆抗体的恒定区进行人源化，保留鼠源抗cd40单克隆抗体的cdr，以获得嵌合抗体，更进一步地，将所述嵌合抗体的轻链可变区或重链可变区中的框架区进行人源化，得到抗cd40的完全人源化抗体。所述cd40抗体能够特异性的靶向结合人cd40蛋白，强有效的阻断cd40与cd40l结合，抑制cd40下游信号，抑制b细胞增殖，并且不会引起apc细胞(如b细胞)活化，有望在自身免疫性疾病、移植排斥和癌症等免疫相关疾病中发挥作用。
3、因此，在本专利技术的第一方面，本专利技术提出了一种抗体或其抗原结合片段。根据本专利技术的实施例，所述抗体或其抗原结合片段包括：分别如seq id no:1、2和3或者与seq idno:1、2和3具有至少80％同一性的氨基酸序列所示的重链可变区cdr1、cdr2、cdr3序列；和分别如seq id no:4、5和6或者与seq id no:4、5和6具有至少80％同一性的氨基酸序列所示的轻链可变区cdr1、cdr2、cdr3序列。根据本专利技术实施例的抗体或其抗原结合片段能够与人cd40蛋白进行结合，阻断cd40与cd40l的结合，抑制cd40的下游信号，抑制b细胞增殖，并且不会引起apc细胞(如b细胞)活化，从而有效治疗或预防cd40介导的相关疾病，并进行相关科学研究。
4、根据本专利技术的实施例，上述抗体或其抗原结合片段还可以进一步包括下列附加技术特征中的至少之一：
5、根据本专利技术的实施例，所述抗体或其抗原结合片段包括：如seq id no:1所示的重链可变区cdr1序列，如seq id no:2所示的重链可变区cdr2，如seq id no:3所示的重链可变区cdr3，如seq id no:4所示的轻链可变区cdr1，如seq id no:5所示的轻链可变区cdr2，如seq id no:6所示的轻链可变区cdr3。
6、根据本专利技术的实施例，所述抗体或其抗原结合片段包括：如seq id no:7或seq idno:11所示的重链可变区；和/或如seq id no:8或seq id no:12所示的轻链可变区。
7、根据本专利技术的实施例，所述抗体或其抗原结合片段包括：1)如seq id no:7所示的重链可变区，和如seq id no:8所示的轻链可变区；或2)如seq id no:11所示的重链可变区，和如seq id no:12所示的轻链可变区。
8、根据本专利技术的实施例，所述抗体或其抗原结合片段含有重链框架区序列和轻链框架区序列，所述重链框架区序列和轻链框架区序列的至少之一的至少一部分来自于鼠源抗体、人源抗体、灵长目源抗体或其突变体的至少之一。
9、根据本专利技术的实施例，所述抗体或其抗原结合片段含有重链恒定区和轻链恒定区的至少之一，所述重链恒定区和轻链恒定区的至少之一的至少一部分来自于人源抗体、灵长目源抗体和鼠源抗体或其突变体中的至少之一。
10、根据本专利技术的实施例，所述轻链恒定区和重链恒定区均来自于鼠源igg抗体或其突变体或人源igg抗体或其突变体。
11、根据本专利技术的实施例，所述轻链恒定区和重链恒定区均来自于鼠源igg1抗体、igg2a抗体、igg4抗体或其突变体或人源igg1抗体、igg2抗体、igg3抗体、igg4抗体或其突变体。
12、根据本专利技术的实施例，所述抗体或其抗原结合片段具有如seq id no:9和13任一项所示氨基酸序列的重链和具有如seq id no:10和14任一项所示氨基酸序列的轻链。
13、根据本专利技术的实施例，所述抗体或其抗原结合片段具有如seq id no:9所示氨基酸序列的重链和seq id no:10所示氨基酸序列的轻链。
14、根据本专利技术的实施例，所述抗体或其抗原结合片段具有如seq id no:13所示氨基酸序列的重链和seq id no:14所示氨基酸序列的轻链。
15、根据本专利技术的实施例，所述抗体或其抗原结合片段包括单抗、多抗、多聚体抗体和cdr移植抗体中的至少之一。
16、在本文中，术语“单抗”是指仅可识别一种特定抗原表位的抗体。其中，常见的单抗为包括两条分子量较轻的轻链和两条分子量较重的重链，重链(h链)和轻链(l链)由二硫键连接形成一个四肽链分子，该重链或轻链的氨基端(n端)氨基酸序列变化很大，称为可变区(v区)，该重链或轻链的羧基端(c端)相对稳定，变化很小，称为恒定区(c区)；l链和h链的v区分别称为vl和vh。此外，所述单抗还包括但不限于单链抗体、fab抗体、fv抗体、单链抗体、单域抗体以及最小识别单位的至少之一。
17、在本文中，术语“cdr移植抗体”是指将一个物种单抗的cdr移植至另一物种抗体可变区。例如，可将鼠源单抗的cdr移植至人源抗体可变区，以便替代人源抗体cdr，使人源抗体获得鼠源单抗的抗原结合特异性，同时减少其异源性。需要说明的是，本申请中的多抗和单抗均可为cdr移植抗体。
18、根据本专利技术的实施例，所述单抗包括全长抗体、fv抗体、单链抗体、fab抗体、单域抗体以及最小识别单位中的至少之一。
19、根据本专利技术的实施例，所述抗体或其抗原结本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种抗体或其抗原结合片段，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，包括：
3.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，包括：
4.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，包括：
5.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或其抗原结合片段含有重链框架区序列和轻链框架区序列，所述重链框架区序列和轻链框架区序列的至少之一的至少一部分来自于鼠源抗体、人源抗体、灵长目源抗体或其突变体的至少之一。
6.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或其抗原结合片段含有重链恒定区和轻链恒定区的至少之一，所述重链恒定区和轻链恒定区的至少之一的至少一部分来自于人源抗体、灵长目源抗体和鼠源抗体或其突变体中的至少之一；
7.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或其抗原结合片段具有如SEQ ID NO:9和13任一项所示氨基酸序列的重链和具有如SEQ ID NO:10和14任一项所示氨基酸序列的轻链
8.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或其抗原结合片段包括单抗、多抗、多聚体抗体和CDR移植抗体中的至少之一；
9.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码权利要求1～8任一项所述的抗体或其抗原结合片段。
10.一种表达载体，其特征在于，携带权利要求9所述的核酸分子。
11.一种重组细胞，其特征在于，携带权利要求9所述的核酸分子、权利要求10所述的表达载体或能够表达权利要求1～8任一项所述的抗体或其抗原结合片段。
12.根据权利要求11所述的重组细胞，其特征在于，所述重组细胞是通过将权利要求10所述的表达载体导入至宿主细胞中而获得的；
13.一种免疫缀合物，其特征在于，包括：权利要求1～8任一项所述的抗体或其抗原结合片段以及治疗剂；所述抗体或其抗原结合片段与所述治疗剂偶联；
14.一种组合物，其特征在于，包括：
15.一种药物，其特征在于，包括：
16.权利要求1～8任一项所述的抗体或其抗原结合片段、权利要求9所述的核酸分子、权利要求10所述的表达载体、权利要求11～12任一项所述的重组细胞、权利要求13所述的免疫缀合物或权利要求14所述的组合物在制备药物中的用途，所述药物用于预防和/或治疗CD40介导的疾病；
17.一种试剂盒，其特征在于，包括：
18.权利要求1～8任一项所述的抗体或其抗原结合片段、权利要求9所述的核酸分子、权利要求10所述的表达载体或权利要求11～12任一项所述的重组细胞在制备试剂盒中的用途，所述试剂盒用于检测CD40。
...【技术特征摘要】
1.一种抗体或其抗原结合片段，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，包括：
3.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，包括：
4.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，包括：
5.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或其抗原结合片段含有重链框架区序列和轻链框架区序列，所述重链框架区序列和轻链框架区序列的至少之一的至少一部分来自于鼠源抗体、人源抗体、灵长目源抗体或其突变体的至少之一。
6.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或其抗原结合片段含有重链恒定区和轻链恒定区的至少之一，所述重链恒定区和轻链恒定区的至少之一的至少一部分来自于人源抗体、灵长目源抗体和鼠源抗体或其突变体中的至少之一；
7.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或其抗原结合片段具有如seq id no:9和13任一项所示氨基酸序列的重链和具有如seq id no:10和14任一项所示氨基酸序列的轻链；
8.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或其抗原结合片段包括单抗、多抗、多聚体抗体和cdr移植抗体中的至少之一；
9.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码权利...
【专利技术属性】
技术研发人员：曹国帅，成赢，李洋洋，武玉伟，
申请(专利权)人：合肥天港免疫药物有限公司，
类型：发明
国别省市：
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