【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种斜生栅藻pex11-2，具体涉及一种斜生栅藻pex11-2构建过表达藻株在斜生栅藻脂质积累及盐胁迫响应中的应用。
技术介绍
1、斜生栅藻，绿藻门栅藻属，是淡水中常见的浮游藻类，能够进行光能自养、混合营养或异养生长，在异养条件下短时间内即可达到极高的生物量。其形状一般为纺锤形或椭圆形，具有生长速度快、培养条件相对简单、生物量高、产脂率高等优点。此外，斜生栅藻在废水中可快速生长，具有很高的营养去除效率。
2、斜生栅藻富含油脂是用于生物燃料生产的合适藻种。目前斜生栅藻脂质相关研究主要集中在发酵条件优化、培养基优化、营养缺陷等方面。通过优化培养基中c、n、p源可提高斜生栅藻的生物量及脂肪酸合成水平，斜生栅藻在利用葡萄糖-木糖混合碳源进行培养时，其生物量有所增加，油脂含量提高了3.8％。培养基中甘蔗糖蜜的添加可刺激生物量和脂肪酸含量，在甘蔗糖蜜的32、65和73g/l条件下，脂肪酸生产率分别比对照水平高出3％、5％和1％。氮磷缺乏能显著提高栅藻细胞中脂质的积累，磷缺乏条件下，脂质含量提高了20.2％；氮缺乏条件下，脂质积累增加了2.27倍，脂肪酸含量增加了54％，但其生长受到抑制、生物量降低，导致产脂率下降。进一步优化氮磷含量可以提高栅藻油脂产量，氮浓度为25mg/l时，产量为160mg/l；磷浓度为2mg/l时，产量为90mg/l。
3、污水环境对于微藻的生长是一种逆境，斜生栅藻作为废水处理的良好候选者，具有较强的逆境生存能力。用含有高铵态氮的养鸡场废水和乙酸钠培养基混合营养培养斜生栅藻，其生物
4、大规模培养方面，特别是水耗大是一大难题，利用生活废水和工业废水培养藻可以极大地缓解这个问题，利用含有营养成分的废水(来自其它行业、农业或城市用水)培养微藻，不仅可以大大降低微藻培养成本，还可以同时去除废水中的氮、磷，降解有机物和吸附重金属，为废水处理提供了更具环境效益和社会效益的方法[8]。将微藻培养和废气处理结合不仅能降低微藻的培养成本，也为当前的温室气体减排策略提供了一个很有前景的解决方案。利用废水、废气培养微藻可实现固碳、废水废气处理、生物燃料生产、化学品供给耦合，同时通过根据微藻特性优化培养条件来提升微藻培养效率。但是废水环境往往对于微藻的生存是一大挑战，因此，选育具有工厂化应用特性的高产优质抗逆的藻种，降低规模化培养成本是微藻产业中亟待解决的问题。
5、同时三酰基甘油(tag)是应激条件下许多藻类细胞中最常见的脂质。在不利的环境或胁迫条件下，许多藻类改变了其脂质生物合成途径，形成和积累中性脂质(主要以tag的形式)作为碳和能量的储存形式[23]。由于这也是用于生产液体生物燃料的主要脂质成分，因此微藻中的tag生物合成途径是脂质合成的重点。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种斜生栅藻pex11-2及其过表达藻株构建方法及其应用，本专利技术选取了斜生栅藻pex11家族中的pex11-2构建过表达藻株探究pex11在斜生栅藻脂质积累及盐胁迫响应中的潜在作用。结果表明，pex11-2定位在过氧化物酶体膜上且过表达在斜生栅藻脂质积累中发挥着积极作用，可通过调节活性氧(ros)水平、脂质合成相关基因的表达以及碳前体的重新分配促进微藻脂质的积累。此外，pex11-2过表达会抑制脂滴参与质膜重组及细胞分裂从而降低斜生栅藻对于盐胁迫的耐受性，总之这些发现证明了pex11基因在微藻脂质代谢以及盐胁迫响应中具有重要作用，可为藻类脂质生产应用研究和工程发展提供新思路。
2、为了实现上述目的，本专利技术采用的技术方案是：
3、一种斜生栅藻pex11-2，其特征在于，斜生栅藻无参转录组测序结果中通过保守序列调取获得pex11的序列命名为pex11-2，pex11-2共有239个氨基酸，其蛋白序列为：
4、mskgdtldktiaflqkregidktlkivrytsrliaavsppgsdtrkrfdalqssvgtsrkayrlgkflqgvdalrrmrlrcsslallelvayagegtyyfldqflwlmkagflpkhqekavakasawaevlgymgsialschklqqlniqeaalarklealmkdeqdkqcidggllrqlqllrsarllrlalicqdladsmtainditegrvrgfnhpvalscagllsaavstykywka。
5、所述的一种斜生栅藻pex11-2，其特征在于，其cds序列为：
6、atgagtaaaggcgacactctcgacaagacaatagcattcctacaaaagcgtgaaggaatc
7、gacaagacactgaaaatagtgcgctacacttcgcgcctcatagcagcagtcagcccacca
8、ggcagtgacaccagaaaacgcttcgatgcactgcaatctagtgtgggcaccagcaggaag
9、gcgtaccggctgggcaagttcctgcagggcgtggacgcgctgcggcgcatgcgcctgcgc
10、tgcagcagcctggcgctgctggagctggtggcgtacgcgggcgagggcacctactacttc
11、ctggaccagttcctgtggctgatgaaggcgggcttcctgcccaagcaccaggagaaggca
12、gtggccaaggccagcgcatgggccgaggtgctgggctacatgggcagcatcgcgctgtca
13、tgccacaagctgcagcagctcaacatacaggaggcggcgctggcacgcaaactagaagca
14、ctcatgaaggacgagcaggacaagcagtgcatcgacggcggcctgctgcggcagctgcag
15、ctgctccgctcggcgcgcctgctgcgtctggcgctgatctgccaggacctggccgacagc
16、atgacagccatcaacgacatcacagagggccgtgtg本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种斜生栅藻PEX11-2，其特征在于，斜生栅藻无参转录组测序结果中通过保守序列调取获得PEX11的序列命名为PEX11-2，PEX11-2共有239个氨基酸，其蛋白序列为：
2.根据权利要求1所述的一种斜生栅藻PEX11-2，其特征在于，其CDS序列为：
3.根据权利要求1所述的一种斜生栅藻PEX11-2，其特征在于，其mRNA序列为：
4.一种斜生栅藻PEX11-2的过表达藻株的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：
5.根据权利要求1所述的一种斜生栅藻PEX11-2的过表达藻株的构建方法，其特征在于，所述的采用电穿孔法将重组质粒pHY21-PEX11-2导入到斜生栅藻中，具体操作步骤如下：
6.根据权利要求1所述的一种斜生栅藻PEX11-2的过表达藻株的构建方法，其特征在于，所述的斜生栅藻总RNA的提取包括以下步骤：
7.根据权利要求4所述的一种斜生栅藻PEX11-2的过表达藻株，其特征在于，一种斜生栅藻pHY21-PEX11-2的过表达藻株应用于抑制斜生栅藻细胞的分裂，促进斜生栅藻脂质的积累。>
8.根据权利要求4所述的一种斜生栅藻PEX11-2的过表达藻株，其特征在于，一种斜生栅藻pHY21-PEX11-2的过表达藻株应用于盐胁迫下斜生栅藻脂质积累的提高。
...【技术特征摘要】
1.一种斜生栅藻pex11-2，其特征在于，斜生栅藻无参转录组测序结果中通过保守序列调取获得pex11的序列命名为pex11-2，pex11-2共有239个氨基酸，其蛋白序列为：
2.根据权利要求1所述的一种斜生栅藻pex11-2，其特征在于，其cds序列为：
3.根据权利要求1所述的一种斜生栅藻pex11-2，其特征在于，其mrna序列为：
4.一种斜生栅藻pex11-2的过表达藻株的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：
5.根据权利要求1所述的一种斜生栅藻pex11-2的过表达藻株的构建方法，其特征在于，所述的采用电穿孔法将重...
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。