【技术实现步骤摘要】
：本专利技术属于微生物修复，具体涉及一株产表面活性剂大分子石油烃降解菌及应用。
技术介绍
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技术介绍
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1、石油作为重要的化石燃料，广泛应用于工业、交通、能源等领域。石油开采、运输、贮存及使用过程中的原油泄漏与不当处置等导致石油烃污染问题日益严重。石油烃进入自然环境，严重污染土壤、地表水和地下水，对生态环境和人体健康构成了严重威胁。
2、微生物修复因具有修复成本低、操作简便、无二次污染等优点，已成为修复石油烃污染环境的主要方法，微生物可利用石油烃作为碳源，通过一系列的酶催化对其进行代谢降解。目前，国内外已有大量关于石油烃微生物降解方面的报道，其中铜绿假单胞菌(pseudomonas aeruginosa)是一类常见的石油烃降解菌。杨志等报道了pseudomonasaeruginosa 1217在30℃和10℃条件下培养7d，对3g/l原油的降解率分别为21.57％和15.15％。潘金程等通过对铜绿假单胞菌降解烃类污染物的泛基因组分析发现，铜绿假单胞菌中存在与烷烃和芳香族化合物降解有关的酶，具有较完整的烷烃羟化酶系统，这使得它不仅可以降解中长链的烷烃，同时对芳香族化合物也有着较强的降解能力。胡芳慧等人发现铜绿假单胞菌会分泌生物表面活性剂，包括鼠李糖脂和脂肽，表现出良好的乳化能力，促进石油烃的溶解和分散，提高细菌对其的生物利用度和降解。马霞研究发现铜绿假单胞菌ny3能分泌鼠李糖脂，与未添加鼠李糖脂相比，菌株对分子量较大的c26-c33正构烷的降解率可提高约60％。由此可见，铜绿假单胞菌在石油烃污染修复方面颇
技术实现思路
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技术实现思路
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1、本专利技术的目的在于提供一株产表面活性剂大分子石油烃降解菌，以实现石油烃污染的高效微生物修复。
2、为了实现本专利技术的上述目的，采用以下技术方案：
3、本专利技术提供一株产表面活性剂大分子石油烃降解菌，所述菌株为革兰氏阴性菌，名称为pseudomonas aeruginosa dg-1，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(cgmcc)保藏，保藏编号为cgmcc no.28382，保藏日期为2023年9月7日，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
4、pseudomonas aeruginosa dg-1为革兰氏阴性菌，呈黄色半透明，圆形，边缘不规则，中心不透明，表面湿润光滑，略微凸起。通过扫描电镜观察到，细胞形状为短杆状，大小为0.3～1.5μm×0.2～0.5μm。
5、菌株dg-1为可产表面活性剂石油烃降解菌，排油圈实验表明菌株dg-1可产表面活性剂。
6、所述石油烃降解菌的获得过程是：采集天津大港油田污染土壤，称取10g的土壤样品置于含90ml灭菌msm培养液，加入0.5％原油(v:v)，在150rpm，30℃培养7天后，获得第一批富集菌液；吸取10％的第一批富集菌液再转移至新鲜90ml灭菌msm培养基中，加入1％原油(v:v)，在150rpm，30℃培养7天后，获得第二批富集菌液，经过多次浓度梯度驯化，最终得到耐受原油浓度为5％的富集菌液，然后用接种环蘸取富集菌液在lb固体培养基平板上划线分离纯化，得到石油烃降解菌单菌落；
7、其中，所述的msm培养基成分为：k2hpo41.0 g/l,kh2po41.0 g/l,nh4no31.0 g/l,mgso4·7h2o 0.2g/l,cacl2·2h2o 0.02g/l，feso4·7h2o 0.02g/l，该培养基的ph为7.0；
8、所述lb固体培养基的组分为蛋白胨10g，酵母粉5g，氯化钠10g，琼脂粉15g，超纯水1l，调节ph为7.0-7.4。
9、上述一株产表面活性剂大分子石油烃降解菌的应用，pseudomonas aeruginosadg-1用于石油烃降解中，pseudomonas aeruginosa dg-1的最优生长条件是ph 7.0、30℃、2％盐度；
10、在最优生长条件下，pseudomonas aeruginosa dg-1在msm培养基中，对2％原油，150rpm摇床培养7天后，总石油烃tph、烷烃、芳香烃、胶质和沥青质的降解率分别为63.60％、64.39％、62.57％、54.78％、68.19％；
11、pseudomonas aeruginosa dg-1在2％(v:w)的接种浓度下，室温下对22.6g/kg石油烃含量污染土壤28天的降解率达到75.40％。
12、与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：
13、本专利技术提供一株新型产表面活性剂石油烃高效降解菌pseudomonas aeruginosadg-1。该菌株既能代谢分泌表面活性剂，又能高效降解石油烃，对石油烃中的烷烃、芳香烃、胶质和沥青质这四种组分均表现出优异的去除效果。菌株dg-1的最优生长条件是ph 7.0、30℃、2％盐度。在最优生长条件下，菌株dg-1对2％原油，摇床150rpm培养7天后，对总石油烃tph、烷烃、芳香烃、胶质和沥青质的降解率分别为63.60％、64.39％、62.57％、54.78％、68.19％。菌株dg-1在2％(v:w)的接种浓度下，室温下对22.6g/kg石油烃含量污染土壤28天的降解率达到了75.40％。
14、本专利技术提供了一种成本低廉、绿色环保的石油烃污染微生物修复技术，修复工艺及操作流程简单，在石油烃污染治理中具有较好的应用前景。
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1.一株产表面活性剂大分子石油烃降解菌，其特征在于，所述菌株为革兰氏阴性菌，名称为Pseudomonas aeruginosa DG-1，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)保藏，保藏编号为CGMCC No.28382，保藏日期为2023年9月7日，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
2.根据权利要求1所述的一株产表面活性剂大分子石油烃降解菌，其特征在于，Pseudomonas aeruginosa DG-1呈黄色半透明，中心不透明，表面湿润光滑，细胞形状为短杆状，大小为0.3～1.5μm×0.2～0.5μm；Pseudomonas aeruginosa DG-1为可产表面活性剂石油烃降解菌。
3.根据权利要求1所述的一株产表面活性剂大分子石油烃降解菌，其特征在于，所述石油烃降解菌的获得过程是：采集天津大港油田污染土壤，称取10g的土壤样品置于含90mL灭菌MSM培养液，加入0.5％原油(v:v)，在150rpm，30℃培养7天后，获得第一批富集菌液；吸取10％的第一批富集菌液再转移至新鲜90mL灭菌MSM培养基中，加入1％
4.一种权利要求1所述的一株产表面活性剂大分子石油烃降解菌的应用，其特征在于，Pseudomonas aeruginosa DG-1用于石油烃降解中，
...【技术特征摘要】
1.一株产表面活性剂大分子石油烃降解菌，其特征在于，所述菌株为革兰氏阴性菌，名称为pseudomonas aeruginosa dg-1，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(cgmcc)保藏，保藏编号为cgmcc no.28382，保藏日期为2023年9月7日，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
2.根据权利要求1所述的一株产表面活性剂大分子石油烃降解菌，其特征在于，pseudomonas aeruginosa dg-1呈黄色半透明，中心不透明，表面湿润光滑，细胞形状为短杆状，大小为0.3～1.5μm×0.2～0.5μm；pseudomonas aeruginosa dg-1为可产表面活性剂石油烃降解菌。
3.根据权利要求1所述的一株...
【专利技术属性】
技术研发人员：吴志能，康林浩，马小东，满全莉，张文婧，葛红江，
申请(专利权)人：河北工业大学，
类型：发明
国别省市：
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