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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及基因工程,尤其涉及杜仲srpp5基因的启动子、包含srpp5基因启动子的植物表达载体及其应用。
技术介绍
1、杜仲(eucommia ulmoides oliver)属于杜仲属,为杜仲科植物,是原产于我国的稀有名贵药用树种。杜仲除了有丰富的药理价值外,还含有一种特殊的白色丝状物质—杜仲胶(eucommia ulmoides gum,eug),其独特的分子结构可应用在生物医疗,航空航天,工业生产,环境资源等领域,从而带来巨大的经济效益。小橡胶粒子蛋白(srpp)是橡胶生物合成中的关键酶之一,对于橡胶颗粒的生物合成和稳定性非常重要。先前的研究表明,srpp基因在杜仲中高表达,并且同源基因表达情况与杜仲胶含量密切相关,因此杜仲中的srpp基因具有重要的研究价值。
2、启动子是rna聚合酶识别、结合和开始转录的一段dna序列,它含有rna聚合酶特异性结合和转录起始所需的保守序列,多数位于结构基因转录起始点的上游,启动子本身不被转录。但有一些启动子(如trna启动子)位于转录起始点的下游,这些dna序列可以被转录。启动子的特性最初是通过能增加或降低基因转录速率的突变而鉴定的。启动子(promoters)就像“开关”,决定基因表达的起始和程度,启动子本身并不控制基因活动,而是通过与转录(transcription)因子结合而控制基因活动、驱动和/或调节其3’下游核酸序列的表达。但目前对于杜仲srpp5(eusrpp5)基因启动子调控元件的研究未有报道。
技术实现思路
2、为了实现上述专利技术目的,本专利技术提供以下技术方案:
3、本专利技术提供了杜仲srpp5基因的启动子,所述启动子为eusrpp5,所述eusrpp5的核苷酸序列如seq id no:1所示。
4、优选的,影响所述启动子调控的因素包括植物激素和干旱。
5、优选的,所述植物激素包括茉莉酸甲酯和赤霉素。
6、本专利技术还提供了用于扩增eusrpp5的引物,上游引物primerf的序列如seq id no:2所示;下游引物primerr的序列如seq id no:3所示。
7、本专利技术还提供了一种植物表达载体,包含所述启动子。
8、优选的,所述植物表达载体的初始载体为pcambia1300-gus。
9、本专利技术还提供了所述植物表达载体的构建方法,包括以下步骤:
10、(1)扩增eusrpp5的序列;
11、(2)以ecori/sali为酶切位点对载体pcambia1300-gus进行酶切,然后与eusrpp5的序列连接,获得所述植物表达载体。
12、本专利技术还提供了eusrpp5在启动和/或调节杜仲srpp5基因表达中的应用。
13、本专利技术还提供了所述的植物表达载体在启动和/或调节杜仲srpp5基因表达中的应用。
14、通过采用上述技术方案,本专利技术具有如下有益效果:本专利技术已在拟南芥中研究了启动子eusrpp5的表达模式,启动子eusrpp5在拟南芥特定的细胞、组织或器官中显示特异的活性;本专利技术对启动子eusrpp5在茉莉酸甲酯(meja),赤霉素(ga3),干旱处理下的表达活性进行了分析,证明了杜仲eusrpp5基因启动子活性受到激素和干旱通路的调控作用。本专利技术的启动子eusrpp5对杜仲srpp基因表达的研究具有重要意义。
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1.杜仲SRPP5基因的启动子,其特征在于,所述启动子为EuSRPP5,所述EuSRPP5的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
2.根据权利要求1所述的启动子,其特征在于,影响所述启动子调控的因素包括植物激素和干旱。
3.根据权利要求1所述的启动子,其特征在于,所述植物激素包括茉莉酸甲酯和赤霉素。
4.用于扩增EuSRPP5的引物,其特征在于,上游引物PrimerF的序列如SEQ ID NO:2所示;下游引物PrimerR的序列如SEQ ID NO:3所示。
5.一种植物表达载体,其特征在于,包含权利1所述的启动子。
6.根据权利要求5所述的植物表达载体,其特征在于,所述植物表达载体的初始载体为pCAMBIA1300-GUS。
7.权利要求5所述植物表达载体的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:
8.EuSRPP5在启动和/或调节杜仲SRPP5基因表达中的应用。
9.权利要求3所述的植物表达载体在启动和/或调节杜仲SRPP5基因表达中的应用。
【技术特征摘要】
1.杜仲srpp5基因的启动子,其特征在于,所述启动子为eusrpp5,所述eusrpp5的核苷酸序列如seq id no:1所示。
2.根据权利要求1所述的启动子,其特征在于,影响所述启动子调控的因素包括植物激素和干旱。
3.根据权利要求1所述的启动子,其特征在于,所述植物激素包括茉莉酸甲酯和赤霉素。
4.用于扩增eusrpp5的引物,其特征在于,上游引物primerf的序列如seq id no:2所示;下游引物primerr的序列如s...
【专利技术属性】
技术研发人员:姚新转,吕立堂,唐湖,赵会敏,侯颖辉,田时雨,
申请(专利权)人:贵州大学,
类型:发明
国别省市:
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