【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种从栀子花中提取分离栀子苷和藏花酸，特别涉及一种从栀子花中提取分离栀子苷和藏花酸的工艺。
技术介绍
1、藏花酸（crocetin）是同时存在于植物藏红花柱头及茜草科栀子果实中的主要活性成分，具有多种不同的生物活性及保健功效。作为水溶性类胡萝卜素藏花素的糖苷配基，其化学结构为具有二十碳的双羧基类胡萝卜素化合物，是一种具有双亲性质的低分子量的化合物。与其它类胡萝卜素相比，藏花酸能够呈现黄色，已被世界各地用作一种重要的香料及天然食品着色剂。关于藏花酸的药理作用的研究内容也日益增多。由于藏花酸在藏红花和栀子中的含量也比较少，关于藏花酸的提取、鉴定的研究则比较匮乏，采用常规方法（如柱层析法，薄层层析法，液相色谱法等）制备藏花酸的产率低且成本高，致使藏花酸资源有限，不能满足市场的需求。
2、栀子作为我国传统中药，不仅在医药方面有所应用而且在食品工业及其他方面也有巨大的的市场潜力。其中栀子主要的活性成分西红花苷，同时也是藏药西红花的主要活性物质，具有抗氧化、抗动脉粥样硬化及调节血脂的作用，是自然界唯一的一种天然的类胡萝卜素，且有研究表明，类胡萝卜素的药理作用机制中，其抗氧化活性尤为重要，有文献报道，具有清除活性氧、自由基和抗氧化作用的药物可提高动物的耐缺氧能力，减轻组织缺氧损伤。
3、由于西红花产量极低，市场价格偏高，无法得到广泛应用和开发，而栀子黄色素和西红花具有相同的活性成分西红花苷，且栀子廉价易得，可以将栀子作为西红花的替代品。
技术实现思路
1、本
2、步骤（1）栀子粗提物粉末
3、称取栀子，粉碎成粗粉，加水煎煮两次，每次加水煎煮，合并滤液，抽滤加蒸馏水煎煮提取，过滤，合并滤液，得栀子提取液母液，经喷雾干燥机干燥后得到栀子粗提物粉末；
4、步骤（2）栀子黄色素的提取
5、称取栀子粗提物粉末，按料液比加入乙醇，超声提取，真空抽滤，滤渣再重复前述提取步骤，合并两次滤液，真空浓缩得膏状物，并于冰箱0-4℃下保存；原料膏中加热溶解，混合搅拌均匀后煮沸；
6、步骤（3）活化
7、把层析用硅胶放置于烘箱中活化，取出，放于干燥器中，冷却至常温，备用；
8、步骤（4）湿法装柱
9、将少量丙酮加入玻璃柱，称取已活化的桂胶，加入丙酮，用玻璃棒充分搅拌均匀。然后再将桂胶匀浆连续不断地慢慢倒入柱内，同时将下端活塞打开，使丙酮慢慢流出，带动硅胶缓慢沉于柱的下端，同时不断地轻轻敲打玻璃柱子，把气泡赶出液面，待加完硅胶后，继续加入丙酮，直到硅胶界面稳定，保持丙酮液面高于硅胶层面；
10、步骤（5）搅拌加样
11、称取栀子苷粗品，加入硅胶，研磨均匀，缓慢加样，尽量使样品带平整；
12、步骤（6）梯度洗脱
13、将二氯乙烷-乙醇洗脱剂放在分液漏斗中，打开活塞，连续不断地慢慢滴加在硅胶柱上，同时打开玻璃柱下端活塞，收集洗脱液；
14、步骤（7）栀子苷纯化产品
15、将合并的洗脱液浓缩，冷冻干燥得栀子苷产品；
16、步骤（8）藏花酸制备
17、称取栀子黄色素，按料液比加入naoh溶液，恒温反应，冷却至室温后抽滤，处理后即得到反式藏花酸；在滤液中边搅拌边缓慢加入盐酸调节ph值，再转移至分液漏斗中，加入乙酸乙酯进行萃取，乙酸乙酯层再用水反萃取，在最后一次洗涤时，缓慢加入石油醚调整溶液的极性，去除部分的大极性杂质，直至有砖红色沉淀析出时停止，乙酸乙酯层转移至蒸发皿中干燥后称重，得到顺式藏花酸。
18、作为优选，步骤（1）栀子粗提物粉末
19、称取3-9 g栀子，粉碎成粗粉，加水煎煮两次，每次加水40-80ml煎煮1-4h，合并滤液，抽滤加8-15bv蒸馏水煎煮提取2-4次，每次1-4h，过滤，合并滤液，得栀子提取液母液，经喷雾干燥机干燥后得到栀子粗提物粉末。
20、作为优选，步骤（2）栀子黄色素的提取
21、称取5-10g栀子粗提物粉末，按料液比1:8-4:15加入50-75%乙醇，超声功率180-220w，提取时间20-40min，40-70℃回流提取，真空抽滤，滤渣再重复前述提取步骤，合并两次滤液，真空浓缩得膏状物，并于冰箱0-4℃下保存；加入60-80℃水到原料膏中加热溶解，混合搅拌均匀后煮沸5min；
22、作为优选，步骤（3）活化
23、把层析用硅胶放置于100-110℃烘箱中活化，取出，放于干燥器中，冷却至常温，备用。
24、作为优选，步骤（4）湿法装柱
25、将少量丙酮加入玻璃柱。称取已活化的桂胶40-50g，加入丙酮，用玻璃棒充分搅拌均匀。然后再将桂胶匀浆连续不断地慢慢倒入柱内，同时将下端活塞打开，使丙酮慢慢流出，带动硅胶缓慢沉于柱的下端，同时不断地轻轻敲打玻璃柱子，把气泡赶出液面，待加完硅胶后，继续加入丙酮，直到硅胶界面稳定，保持丙酮液面高于硅胶层面1-3cm，柱床体积约为100-140ml。
26、作为优选，步骤（5）搅拌加样
27、称取2-4g栀子苷粗品，加入8-12g硅胶，研磨均匀，缓慢加样，尽量使样品带平整。
28、作为优选，步骤（6）梯度洗脱
29、将二氯乙烷-乙醇洗脱剂（二氯乙烷、二氯乙烷：乙醇=1:1-6:4、乙醇）放在分液漏斗中，打开活塞，连续不断地慢慢滴加在硅胶柱上，同时打开玻璃柱下端活塞，收集洗脱液。
30、采用本专利技术，栀子苷经桂胶层析纯化，其中的杂质绿原酸大部分被除去，藏花酸基本被完全除去，所得栀子苷纯度较高。
31、作为优选，步骤（7）栀子苷纯化产品
32、将合并的洗脱液浓缩，冷冻干燥得栀子苷产品。
33、作为优选，步骤（8）藏花酸制备
34、称取10-15g的栀子黄色素，按料液比1:6-3:10的比例加入3-8 mol/l的naoh溶液，40-60℃下恒温反应40-60 min，冷却至室温后抽滤，处理后即得到反式藏花酸；在滤液中边搅拌边缓慢加入20-30%的盐酸调节ph值为3-5，再转移至分液漏斗中，加入50-80ml的乙酸乙酯进行萃取，乙酸乙酯层再用水反萃取2~3次，在最后一次洗涤时，缓慢加入石油醚调整溶液的极性，去除部分的大极性杂质，直至有砖红色沉淀析出时停止。乙酸乙酯层转移至蒸发皿中干燥后称重，得到顺式藏花酸。
35、采用本专利技术，栀子黄色素碱水解后，生成的反式藏花酸钠由于其溶解性相对顺式结构更差，且反式构型的含量较高，因此控制反应条件如料液比，可以最大限度使过滤后滤液中顺式藏花酸提高，有利于后续的分离。顺式藏花酸在酸化后用乙酸乙酯萃取，此时会有大极性杂质一起进入到有机层，通过加入石油醚降低体系的极性后能去本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种从栀子花中提取分离栀子苷和藏花酸的工艺,其特征在于栀子黄的提取、栀子苷的分离、藏花酸的提取。
2.一种根据权利要求1所述的从栀子花中提取分离栀子苷和藏花酸的工艺，其特征在于：
3.根据权利要求2所述的一种从栀子花中提取分离栀子苷和藏花酸的工艺，其特征在于：
4.根据权利要求3所述的一种从栀子花中提取分离栀子苷和藏花酸的工艺，其特征在于：
5.根据权利要求4所述的一种从栀子花中提取分离栀子苷和藏花酸的工艺，其特征在于：
6.根据权利要求5所述的一种从栀子花中提取分离栀子苷和藏花酸的工艺，其特征在于：
7.根据权利要求6所述的一种从栀子花中提取分离栀子苷和藏花酸的工艺，其特征在于：
8.根据权利要求7所述的一种从栀子花中提取分离栀子苷和藏花酸的工艺，其特征在于：
9.根据权利要求8所述的一种从栀子花中提取分离栀子苷和藏花酸的制备工艺，其特征在于：
10.根据权利要求4所述的一种从栀子花中提取分离栀子苷和藏花酸的工艺，其特征在于：
【技术特征摘要】
1.一种从栀子花中提取分离栀子苷和藏花酸的工艺,其特征在于栀子黄的提取、栀子苷的分离、藏花酸的提取。
2.一种根据权利要求1所述的从栀子花中提取分离栀子苷和藏花酸的工艺，其特征在于：
3.根据权利要求2所述的一种从栀子花中提取分离栀子苷和藏花酸的工艺，其特征在于：
4.根据权利要求3所述的一种从栀子花中提取分离栀子苷和藏花酸的工艺，其特征在于：
5.根据权利要求4所述的一种从栀子花中提取分离栀子苷和藏花酸的工艺，其特征在于：...
【专利技术属性】
技术研发人员：程勇，邵云东，关磊，
申请(专利权)人：杭州天草科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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