一种制备可控降解中药胶原方法及其制备的中药胶原技术

本发明专利技术公开了一种制备可控降解中药胶原方法及其所制得的可控降解中药胶原。该方法包括：将含有羧基团的中药与ＥＤＣ／ＮＨＳ浸入０．０５Ｍ?ＭＥＳ溶液中，控温３７℃反应１０ｍｉｎ后加入胶原或明胶，挤出气泡，６０次／ｍｉｎ摇晃反应４ｈ；滤去药液，加入０．１Ｍ?Ｎａ２ＨＰＯ４溶液，控温３７℃反应２ｈ后，过滤去除Ｎａ２ＨＰＯ４溶液，加入４Ｍ氯化钠液，２４ｈ换液４次过滤去氯化钠液，用三蒸水洗５遍后，冻干机冻干，包装；以钴６０或环氧乙烷消毒，常温保存即可。本发明专利技术的可控降解胶原制备方法，步骤少，操作简单，具有一定的通用性。所制备出的可控降解胶原，释放含有羧基团中药提高疗效，同时增加组织相容性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种中药胶原，具体涉及一种可控降解中药胶原制备方法及其制备的 中药胶原。
技术介绍
胶原，尤其是一型胶原，是生物体各种结缔组织的主要组成分。具有促进组织愈 合、可体内降解且降解碎片具有组织相容性的特性，已成为组织工程中应用最广的生物材 料。胶原经过修饰后可以提高组织相容性及干预血管生成。应用胶原作为支架制造促血管 生长生物材料植入促血管生长之生长因子为目前国际研究开发的前沿与热点之一。但是将 胶原作为载药支架释药有效药物的研究尚处起步阶段。查阅文献有关将中药植物有效成分 直接与胶原蛋白结合，完全去除交联剂，通过对胶原的可控降解来释放药物的研究，尚未见 报道。
技术实现思路
专利技术目的针对现有技术中存在的不足，本专利技术的目的是提供一种可控降解中药 胶原制备方法，以实现有效控制胶原的降解及药物的释放。本专利技术的另一目的是提供上述 方法制备的中药胶原。技术方案为了实现上述专利技术目的，本专利技术采用的技术方案如下一种制备可控降解中药胶原方法，包括以下步骤(1)将含有羧基团的中药与EDC/NHS按重量比0. 5 5 1，浸入0. 05M MES溶液 中，控温37°C，反应IOmin后加入胶原或明胶，挤出气泡，60次/min摇晃反应4h，完成药物 与胶原多肽的结合；其中，EDC与NHS的体积比为1 0.6，中药与胶原或明胶的重量比为 1:1;(2)过滤去除步骤(1)中的EDC/NHS药液，加入0. IM Na2HPO4溶液，控温37°C，反 应2h后，过滤去除Na2HPO4溶液，加入4M氯化钠液，每6h更换一次氯化钠液，24h换液4次， 过滤去氯化钠液，用三蒸水洗5遍后，冻干机冻干，包装；其中，Na2HPO4溶液、氯化钠液和三 蒸水与中药的体积比均为21(3)用钴60或环氧乙烷消毒4h，常温保存，即可。步骤(1)中，所述的含有羧基团的中药为黄芪多糖。一种采用上述的制备可控降解中药胶原方法制备出的可控降解中药胶原。一种采用上述的制备可控降解中药胶原方法制备出的可控降解黄芪多糖胶原。本专利技术的可控降解胶原，由含有羧基团中药与胶原组成，成分为中药有效成分与 胶原蛋白，配比范围根据临床需要进行调整。含有羧基团中药胶原是一种随胶原降解而原 位释放含有羧基团中药的可控降解释药系统。通过交联剂使含有羧基团中药的羧基团与胶 原多肽链共价结合，胶原肽链之间亦互相交联，交联剂在反应完成后通过充分洗涤洗出。目前，药物直接载入胶原，引起迅速释放，达不到长期释放的要求，胶原在体内降3解迅速，通过交联剂修饰胶原可以控制胶原降解速率，但是目前临床应用的修饰胶原胶原 一定的细胞毒性。本专利技术的可控降解胶原，采用水溶性交联剂将含有羧基团中药与胶原多 肽共价结合，剩余的交联剂将胶原多肽共价结合，结合后交联剂将以原型通过洗涤洗出胶 原，胶原内交联剂零残留。通过交联剂与胶原及含有羧基团中药的比例来控制胶原的降解 及药物的释放。可控降解含有羧基团中药胶原涉及组织工程与药物可控释放制剂学。临床 可用于创面覆盖促进组织修复、组织缺损填充、手术中创面填塞止血、抗肿瘤血管新生等。有益效果本专利技术的可控降解胶原制备方法，步骤少，操作简单，具有一定的通用 性。所制备出的可控降解胶原，释放含有羧基团中药提高疗效，同时增加组织相容性。临床 可用于创面覆盖促进组织修复、组织缺损填充、手术中创面填塞止血、抗肿瘤血管新生等。附图说明图1是可控降解中药胶原的结构示意图。其中，1为胶原，2为中药，3为EDC/NHS 交联剂。图2是实施例3的各组微血管的计数图。从图中明显看出，20μ g/ml黄芪多糖+ 胶原组微血管密度明显高于其他各组，存在显著差异D与C、E组比较P < 0. 05 ;D与A、B 组比较P < 0.01。具体实施例方式下面结合附图和具体实施例对本专利技术做进一步的解释。以下实施例所使用到的药品和试剂如下EDC为碳化二亚胺，交联剂；NHS为N-羟基琥珀酰亚胺；MES为脂肪醇醚琥珀酸酯磺酸盐。0. 05M MES为采用500ml蒸馏水加5. 3325gMES配置；0. IM Na2HPO4为采用蒸馏水 500ml 加 Na2HP045. 5g 配置；4M NaCl 为采用蒸馏水 500ml 加 117g NaCl 配置。实施例1一种制备可控降解中药胶原方法，包括以下步骤(1)将含有羧基团的中药与EDC/NHS按重量比0. 5 5 1，浸入0. 05M MES溶液 中，控温37°C，反应IOmin后加入胶原或明胶，挤出气泡，60次/min摇晃反应4h，完成药物 与胶原多肽的结合；其中，EDC与NHS的体积比为1 0.6，中药与胶原或明胶的重量比为 1:1;(2)过滤去除步骤(1)中的EDC/NHS药液，加入0. IM Na2HP04溶液，控温37°C，反 应2h后，过滤去除Na2HP04溶液，加入4M氯化钠液，每6h更换一次氯化钠液，24h换液4 次，过滤去氯化钠液，用三蒸水洗5遍后，冻干机冻干，包装；其中，Na2HP04溶液、氯化钠液 和三蒸水与中药的体积比均为21(3)用钴60或环氧乙烷消毒4h，常温保存，即可。该可控降解中药胶原的结构如附图1所示，1为胶原，2为中药，3为EDC/NHS交联 剂实施例2控温37°C，在 0. 05mol/L MES 缓冲液中(ρΗ5· 6)，以交链剂 EDC/NHS (1 0. 6)活化黄芪多糖中羟基团，反应lOmin，将胶原浸入反应液，60次/min轻微晃动，反应4h，反应 前，轻微挤压以排出胶原内气体。反应完成后，用0. lmol/L Na2HPO4洗涤2h，以中止反应。 过滤去除Na2HPO4溶液，用4mol/L NaCl溶液洗涤，24h换液4次，过滤去除氯化钠溶液，用 三蒸水洗涤，24h换液5次。接着将标本消毒后备用。实施例3以黄芪多糖均勻分布于I型胶原中，接着行低温(-20°C )冻干形成黄芪多糖胶原 海绵(直径lcm，厚度0.2cm)。空白胶原组即为I型胶原，接着行低温(-20°C )冻干形成 胶原海绵。分组情况如表1所示。表1分组情况表本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种制备可控降解中药胶原方法，其特征在于，包括以下步骤：（１）将含有羧基团的中药与ＥＤＣ／ＮＨＳ按重量比０．５～５∶１，浸入０．０５Ｍ　ＭＥＳ溶液中，控温３７℃，反应１０ｍｉｎ后加入胶原或明胶，挤出气泡，６０次／ｍｉｎ摇晃反应４ｈ，完成药物与胶原多肽的结合；其中，ＥＤＣ与ＮＨＳ的体积比为１∶０．６，中药与胶原或明胶的重量比为：１∶１；（２）过滤去除步骤（１）中的ＥＤＣ／ＮＨＳ药液，加入０．１Ｍ　Ｎａ２ＨＰＯ４溶液，控温３７℃，反应２ｈ后，过滤去除Ｎａ↓［２］ＨＰＯ↓［４］溶液，加入４Ｍ氯化钠液，每６ｈ更换一次氯化钠液，２４ｈ换液４次，过滤去氯化钠液，用三蒸水洗５遍后，冻干机冻干，包装；其中，Ｎａ↓［２］ＨＰＯ↓［４］溶液、氯化钠液和三蒸水与中药的体积比均为２∶１（３）用钴６０或环氧乙烷消毒４ｈ，常温保存，即可。

【技术特征摘要】
一种制备可控降解中药胶原方法，其特征在于，包括以下步骤(1)将含有羧基团的中药与EDC/NHS按重量比0.5～5∶1，浸入0.05M MES溶液中，控温37℃，反应10min后加入胶原或明胶，挤出气泡，60次/min摇晃反应4h，完成药物与胶原多肽的结合；其中，EDC与NHS的体积比为1∶0.6，中药与胶原或明胶的重量比为1∶1；(2)过滤去除步骤(1)中的EDC/NHS药液，加入0.1M Na2HPO4溶液，控温37℃，反应2h后，过滤去除Na2HPO4溶液，加入4M氯化钠液...

【专利技术属性】
技术研发人员：姚昶，
申请(专利权)人：江苏省中医院，
类型：发明
国别省市：84[]