【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及到分析化学领域，特别涉及到分离测定乙酰半胱氨酸对映异构体的方法。
技术介绍
柱前衍生化是提高检测灵敏度的方法，大多数无紫外吸收或紫外吸收较弱的化合 物，采用合适的衍生化方法，可以进行包括含量和对映异构体的准确测定。乙酰半胱氨酸是一种氨基酸类药物，是一种去痰药。其化学名为N-乙酰基-L-半 胱氨酸，分子式为C5H9NO3S,其对映异构体的化学名为N-乙酰基-D-半胱氨酸。现有的技术 中无乙酰半胱氨酸异构体测定的相关报道，只有文献HPLC Separation of DL-Amino Acide Derivatized with N2-(5-Fluoro-2,4-Dinitrophenyl)-LAmino Acid AmidesCJournal of Chromatography B 674 (1995) 143-148)及中国专利 200510057381. 8 的方法有报道其他 产品的异构体测定方法。乙酰半胱氨酸为末端吸收，且吸收不强，乙酰半胱氨酸的对映异构体为乙酰半胱 氨酸的杂质，是乙酰半胱氨酸质量控制的重要指标。如果用手性色谱柱分离异构体杂质， 一方面流动相的种类受到很大限制，正相条件几乎不可用；另外，检测灵敏度也不易达到要 求。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种采用在乙酰半胱氨酸用衍生化试剂进行柱前衍生化， 乙酰半胱氨酸在被衍生化的同时，其对映异构体也被衍生化，从而实现采用一般色谱柱进 行乙酰半胱氨酸及其对映异构体(杂质)分离测定的方法。为实现上述目的，本专利技术的技术方案为，采用乙酰半胱氨酸在进柱前用衍生化 试剂进行衍生化，其...
【技术保护点】
一种分离测定乙酰半胱氨酸对映异构体的方法，其特征在于：乙酰半胱氨酸在进柱前用衍生化试剂进行衍生化，其衍生化试剂为Ｎα－（５－氟－２，４－二硝基苯基）－Ｌ－氨基酸类化合物，述所的衍生化试剂Ｎα－（５－氟－２，４－二硝基苯基）－Ｌ－氨基酸类化合物为Ｎ↑［α］－（５－氟－２，４－二硝基苯基）－Ｌ－丙胺酰胺、Ｎ↑［α］－（５－氟－２，４－二硝基苯基）－Ｌ－苯丙胺酰胺、Ｎα－（５－氟－２，４－二硝基苯基）－Ｌ－脯胺酰胺或Ｎ↑［α］－（５－氟－２，４－二硝基苯基）－Ｌ－缬胺酰胺，乙酰半胱氨酸与衍生化试剂的摩尔比为：１∶１．５～１∶５０；分离测定所用方法为高效液相色谱法或高效液相色谱法与质谱法联合使用，其使用的色谱柱是以十八烷基硅烷键和硅胶为填料的色谱柱，且色谱柱的检测波长为２００－３８０ｎｍ，最佳检测波长为３３３±３ｎｍ；在分离测定乙酰半胱氨酸对映异构体的条件中，流动相是乙酸铵溶液－乙腈体系，乙酸铵溶液为流动相Ａ，乙腈为流动相Ｂ，其中乙酸铵溶液的浓度为０．０１－０．０５ｍｏｌ／Ｌ，并用氨水或磷酸调节ｐＨ值至５．０－８．０，乙酸铵溶液与乙腈按下列异构体测定流动相梯度洗脱表进行洗脱： 异构体测定流动...
【技术特征摘要】
一种分离测定乙酰半胱氨酸对映异构体的方法，其特征在于乙酰半胱氨酸在进柱前用衍生化试剂进行衍生化，其衍生化试剂为Nα (5 氟 2，4 二硝基苯基) L 氨基酸类化合物，述所的衍生化试剂Nα (5 氟 2，4 二硝基苯基) L 氨基酸类化合物为Nα (5 氟 2，4 二硝基苯基) L 丙胺酰胺、Nα (5 氟 2，4 二硝基苯基) L 苯丙胺酰胺、Nα (5 氟 2，4 二硝基苯基) L 脯胺酰胺或Nα (5 氟 2，4 二硝基苯基) L 缬胺酰胺，乙酰半胱氨酸与衍生化试剂的摩尔比为1:1.5～1:50；分离测定所用方法为高效液相色谱法或高效液相色谱法与质谱法联合使用，其使用的色谱柱是以十八烷基硅烷键和硅胶为填料的色谱柱，且色谱柱的检测波长为200 380nm，最佳检测波长为333±3nm；在分离测定乙酰半胱氨酸对映异构体的条件中，流动相是乙酸铵溶液 乙腈体系，乙酸铵溶液为流动相A，乙腈为流动相B，其中乙酸铵溶液的浓度为0.01 0.05mol/L，并用氨水或磷酸调节pH值至5.0 8.0，乙酸铵溶液与乙腈按下列异构体测定流动相梯度洗脱表进行洗脱 异构体测定流动相梯度洗脱表时间(分钟)流动相A(%)流动相B(%)08020188020195050255050268020368020其中18分钟后为冲洗色谱柱及平衡色谱柱，流动相A、B的百分比为体积百分比。2...
【专利技术属性】
技术研发人员：王先兵，程文莹，杨娟，吕启超，郭刚，
申请(专利权)人：湖北新生源生物工程股份有限公司，
类型：发明
国别省市：42[中国|湖北]
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