【技术实现步骤摘要】
【】本专利技术涉及金线莲鉴别的，特别是金线莲栽培方式鉴别的。
技术介绍
0、
技术介绍
1、金线莲为兰科花叶开唇兰(anoectochilus roxburghii(wall.)lindl)多年生草本植物，又名金线兰、金丝草、鸟人参，全草入药，为珍贵中药材，具有清热凉血、祛风利湿、解毒等功效，主要分布在我国的福建省、浙江省、广东省、贵州省等南部省份，在台、闽、浙、川各地民间应用广泛。根据文献报道，金线莲富含多糖、甾体化合物、有机酸、萜类化合物、生物碱、挥发油、黄酮及苷类等成分。金线莲在自然环境中生长时期长、繁殖率低、环境要求严格，加之人工过度采挖，野生金线莲资源稀缺，被《濒危野生动植物种国际贸易公约》(cites)列为附录ⅱ的保护物种，被《国家重点保护野生植物名录》(第二批)列为二级保护植物。
2、目前随着农业技术的发展，金线莲人工培育方式主要有①组织繁殖：周期短、成本低，能够解决金线莲在自然环境中繁殖率低的问题，满足了市场对种苗需求。②大棚栽培：操作与种植方便，栽培密度大和产量高，容易控制环境和生长所需条件。③林下仿野生栽培：金线莲林下栽培植被类型为常绿阔叶林、针阔混交林和毛竹林，充分利用林地空间仿野生栽培。不同栽培模式的金线莲价格相差巨大，组培苗干品市场售价约为二千元/公斤，大棚干品市场售价高达六千元/公斤，林下仿生栽培更是高达两万元/公斤。另外，金线莲经长期引种驯化和种质选育，逐渐形成不同栽培品系，常见的有本种、红霞、福建尖叶、花叶、大叶、圆叶、大圆叶、红杆等。
3、有部分商家为了经济
4、以本种为例，观察不同栽培方式金线莲性状，我们发现大棚种植6个月以上，其性状与林下的很难区分，而组培苗与其区别主要在根，组培苗根表面被黄白色长柔毛，常多株根毛缠绕粘结成团；相较组培苗，林下的根较长，表面的柔毛较短且呈黄色，无多株根毛粘结成团现象。目前主要依靠有经验的鉴别人员进行人工鉴别，但是这种鉴别方式鉴别周期长，且容易受到主观和外界因素的影响，不能客观地为判断金线莲的栽培方式提供参考。
技术实现思路
0、
技术实现思路
1、本专利技术的目的就是解决现有技术中的问题，提出一种金线莲栽培方式的鉴别方法，能够解决以上问题。
2、为实现上述目的，本专利技术提出了一种金线莲栽培方式的鉴别方法，包括以下步骤：
3、(a)通过盐酸对金线莲中的黄酮类成分进行水解，得到供试品溶液；
4、(b)通过高效液相色谱仪检测供试品溶液，得到色谱图；
5、(c)通过色谱图计算出槲皮素与异鼠李素的峰面积比值；
6、(d)通过峰面积比值判断金线莲的栽培方式。
7、作为优选，所述步骤(a)为：称取一定质量的金线莲粉末，加甲醇-25％盐酸溶液(4∶1)的混合溶液摇匀，置水浴中加热回流水解，接着迅速冷却至室温，然后转移至量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。
8、作为优选，所述步骤(b)的色谱条件为：
9、色谱柱：ace excel c18-ar(5μm，4.6×250mm)；
10、流动相：乙腈为流动相a，以水为流动相b；
11、梯度洗脱：0-20min，12→18％a，88→82％b；20-22min，18％a，82％b；22-32min，18→30％a，82→70％b；32-47min，30→45％a，70→55％b；47-55min，45％a，55％b；55-65min，45→55％a，55→45％b；
12、检测波长：360nm；
13、进样量：5μl；
14、流速：1.0ml/min；
15、柱温：35℃。
16、作为优选，所述步骤(c)为：制备金线莲水解后主要产物的对照品溶液，通过高效液相色谱仪检测对照品溶液，得到对照色谱图，通过高效液相色谱仪检测供试品溶液，得到供试品溶液的色谱图，然后通过比对供试品溶液的色谱图和对照色谱图找出槲皮素与异鼠李素的峰，分别对其积分算出峰面积，然后计算出槲皮素与异鼠李素的峰面积比值。
17、作为优选，林下种植的金线莲水解后的溶液中，槲皮素和异鼠李素的峰面积比值均落入0.3-0.7的范围内。
18、本专利技术的有益效果：金线莲中游离的黄酮醇苷含量较少，本专利技术先用酸对金线莲水解，金线莲水解后主要黄酮苷醇为槲皮素和异鼠李素，而且不同栽培模式水解后槲皮素与异鼠李素的峰面积比值具有一定的规律，可以通过槲皮素与异鼠李素的峰面积比值为判断金线莲的栽培方式提供参考，较好地消除了不同鉴别人员间的判别结果误差，提高鉴别效率，鉴别结果可以得到客观的数据支持。
19、本专利技术的特征及优点将通过实施例结合附图进行详细说明。
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1.一种金线莲栽培方式的鉴别方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.如权利要求1所述的金线莲栽培方式的鉴别方法，其特征在于，所述步骤(a)为：称取一定质量的金线莲粉末，加甲醇-25％盐酸溶液(4∶1)的混合溶液摇匀，置水浴中加热回流水解，接着迅速冷却至室温，然后转移至量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。
3.如权利要求1所述的金线莲栽培方式的鉴别方法，其特征在于，所述步骤(b)的色谱条件为：
4.如权利要求1所述的金线莲栽培方式的鉴别方法，其特征在于，所述步骤(c)为：制备金线莲水解后主要产物的对照品溶液，通过高效液相色谱仪检测对照品溶液，得到对照色谱图，通过高效液相色谱仪检测供试品溶液，得到供试品溶液的色谱图，然后通过比对供试品溶液的色谱图和对照色谱图找出槲皮素与异鼠李素的峰，分别对其积分算出峰面积，然后计算出槲皮素与异鼠李素的峰面积比值。
5.如权利要求1所述的金线莲栽培方式的鉴别方法，其特征在于：林下种植的金线莲水解后的溶液中，槲皮素和异鼠李素的峰面积比值均落入0.3-0.7的范围内。
【技术特征摘要】
1.一种金线莲栽培方式的鉴别方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.如权利要求1所述的金线莲栽培方式的鉴别方法，其特征在于，所述步骤(a)为：称取一定质量的金线莲粉末，加甲醇-25％盐酸溶液(4∶1)的混合溶液摇匀，置水浴中加热回流水解，接着迅速冷却至室温，然后转移至量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。
3.如权利要求1所述的金线莲栽培方式的鉴别方法，其特征在于，所述步骤(b)的色谱条件为：
4.如权利要求1所述的金线莲栽培...
【专利技术属性】
技术研发人员：蒋士鹏，赵静芳，陈桂茜，陈宗良，周玲娜，施芬，沈子博，龚雪媛，
申请(专利权)人：金华市食品药品检验检测研究院，
类型：发明
国别省市：
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