【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及疫苗免疫增强剂，尤其涉及牛用疫苗重组免疫增强剂及其制备方法和应用，属于疫苗免疫增强剂及其应用领域。
技术介绍
1、随着人们对牛肉的需求不断增加，肉牛养殖逐渐成为养殖户青睐的项目。
2、牛巴氏杆菌病(pasteurella infection in cattle)又称牛出血性败血症，是由巴氏杆菌(pasteurella multocida)引起、发生在牛身上的一种常见病害。病牛体温会明显上升，甚至会超过40℃，食欲不振、反刍能力也有所下降，并伴有呼吸困难、伸颈张嘴呼吸的情况，精神萎靡不振；为避免未发病牛受到牛巴氏杆菌病感染，养殖者应对牛群进行紧急免疫接种牛多杀性巴氏杆菌灭活疫苗。
3、目前预防牛多杀性巴氏杆菌病主要采用灭活苗制备工艺。灭活苗以安全作为最大的优点，但是同时也存在诸如灭活苗刺激机体细胞免疫能力较差、刺激机体产生抗体慢、抗体滴度维持时间短、注射增加动物应激风险等风险。
4、因此，肉牛养殖过程中采用疫苗免疫会带来应激反应和疫苗免疫后的不良反应等问题，有待改进，
技术实现思路
1、本专利技术的目的之一是提供密码子优化的牛源干扰素1基因；
2、本专利技术的目的之二是将密码子优化后的表达的牛源干扰素1基因重组牛源干扰素作为免疫增强剂加入灭活疫苗中以降低疫苗免疫后的不良反应并提高牛的生产性能。
3、本专利技术的上述目的是通过以下技术方案来实现的：
4、本专利技术的一方面是提供了密码子优化的牛源干扰素
5、本专利技术的另一方面是提供了含有seq id no.2-seq id no.5中所示的任何一种核苷酸序列或含有该核苷酸序列的嵌合基因或表达盒的重组表达载体。
6、本专利技术的一种优选的具体实施方案，所述的重组表达载体可以是重组原核表达载体或重组真核表达载体，优选为重组原核表达载体。
7、本专利技术的另一方面是提供了含有所述重组表达载体的重组宿主细胞；所述的重组宿主细胞可以重组原核细胞或重组真核细胞；作为本专利技术的一种优选的具体实施方案，所述的重组宿主细胞是重组大肠杆菌细胞。
8、本专利技术的另一方面是将所述的密码子优化的牛源干扰素1基因所表达的重组ifn-γ应用于疫苗免疫增强剂；本专利技术将密码子优化后的表达的牛源干扰素1基因重组牛源干扰素作为免疫增强剂加入牛多杀性巴氏杆菌病灭活疫苗中取得了提高牛群机体免疫调节，降低疫苗免疫后的不良反应并提高牛的生产性能等效果。
9、本专利技术的一种优选的具体实施方案，所述的疫苗优选为牛多杀性巴氏杆菌病灭活疫苗。
10、本专利技术的一种具体实施方案，本专利技术提供了一种疫苗组合物，包括：灭活疫苗和免疫增强剂，其中，所述的免疫增强剂是将所述的密码子优化的牛源干扰素1基因所表达的重组ifn-γ。
11、本专利技术利用大肠杆菌密码子偏嗜性对ifn-γ的原始序列进行5种密码子优化方案，将不同密码子优化后的重组牛源干扰素作为免疫增强剂加入牛多杀性巴氏杆菌病灭活疫苗中，经过免疫效力试验、安全性试验以及抗体检测试验等发现，将ifn-γ的原始序列进行密码子优化后得到的各种优化序列作为疫苗的免疫增强剂均具有良好的安全性；将ifn-γ的原始序列进行密码子优化后得到的优化序列2(seq id no.3所示)的免疫保护效力明显优于原始序列以及其它三种密码子优化后序列的免疫保护效力；相比ifn-γ的原始序列，将ifn-γ的原始序列进行密码子优化后得到的各种优化序列作为疫苗的免疫增强剂均能在一定程度上提升疫苗的抗体效价，其中，将ifn-γ的原始序列进行密码子优化后得到的优化序列2(seq id no.3所示)作为疫苗的免疫增强剂的抗体效价明显优于原始序列以及其它三种密码子优化后序列的抗体效价。
12、本专利技术利用大肠杆菌密码子偏嗜性对ifn-γ进行5种密码子优化方案，将不同密码子优化后的重组牛源干扰素作为免疫增强剂加入牛多杀性巴氏杆菌病灭活疫苗中，可以显著提高牛细胞免疫应答，提高牛群机体免疫调节，从而降低疫苗免疫后的不良反应并提高牛的生产性能。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.密码子优化的牛源干扰素1基因，其特征在于，其核苷酸序列选自SEQ ID No.2-SEQID No.5中所示的任何一种。
2.根据权利要求1所述的密码子优化的牛源干扰素1基因，其特征在于，其核苷酸序列为SEQ ID No.3所示。
3.含有权利要求1所述的密码子优化的牛源干扰素1基因的嵌合基因。
4.含有权利要求1所述的密码子优化的牛源干扰素1基因的表达盒。
5.含有权利要求1所述的密码子优化的牛源干扰素1基因的重组表达载体。
6.含有权利要求3所述的嵌合基因或权利要求4所述表达盒的重组表达载体。
7.根据权利要求5或6所述的重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体是重组原核表达载体或重组真核表达载体，优选为重组原核表达载体。
8.含有权利要求5或6所述的重组表达载体的重组宿主细胞；优选的，所述的重组宿主细胞是重组原核细胞或重组真核细胞；更优选为重组大肠杆菌细胞。
9.由权利要求1所述的密码子优化的牛源干扰素1基因表达的重组IFN-γ应作为疫苗免疫增强剂中的应用；优选的，所述的疫
10.一种疫苗组合物，包括：灭活疫苗和免疫增强剂；其特征在于，所述的免疫增强剂是将权利要求1所述的密码子优化的牛源干扰素1基因表达得到的重组IFN-γ。
...【技术特征摘要】
1.密码子优化的牛源干扰素1基因，其特征在于，其核苷酸序列选自seq id no.2-seqid no.5中所示的任何一种。
2.根据权利要求1所述的密码子优化的牛源干扰素1基因，其特征在于，其核苷酸序列为seq id no.3所示。
3.含有权利要求1所述的密码子优化的牛源干扰素1基因的嵌合基因。
4.含有权利要求1所述的密码子优化的牛源干扰素1基因的表达盒。
5.含有权利要求1所述的密码子优化的牛源干扰素1基因的重组表达载体。
6.含有权利要求3所述的嵌合基因或权利要求4所述表达盒的重组表达载体。
7.根据权利要求5...
【专利技术属性】
技术研发人员：武啸，梁宛楠，李倩，魏蓝，张悦，徐刚，李贽，李一凡，柴华，翁艳军，
申请(专利权)人：哈药集团生物疫苗有限公司，
类型：发明
国别省市：
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