【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物，涉及一种提高与评价龟甲抗氧化和抗炎活性的方法。
技术介绍
1、龟甲为龟科动物的背甲和腹甲，营养成分复杂、药用价值较高。中医认为龟甲具有滋阴潜阳、益肾健骨及养血补心的功效。随着时代的更迭，现代药理学挖掘出了龟甲更多的生物活性，如抗炎、抗氧化等。目前龟甲临床用药，常以弃去其残渣的水煎液为主。因此，水煎液中龟甲有效成分即龟甲水溶性成分的含量是决定龟甲药用功效的重要指标。然而由于龟甲质地坚硬，常规磨粉机很难以将其完全粉碎，大大增加其磨粉过程中的能耗损失，且不利于水溶性活性成分的溶出，这严重限制了对龟甲生物学特性的深入研究。因此，为了克服这一难点，需要采用一些物理或化学方法，如传统中药炮制(醋炙)及现代的高压蒸汽技术等。
2、传统的龟甲预处理工艺以醋萃炮制为主，其炮制步骤包括砂烫、醋淬、干燥及捣碎等，醋炙后的龟甲内外表面呈黄色或棕褐色，具有质地松脆、减毒增效、矫臭矫味的优势。然而，该炮制工艺还存在一些不足之处，如需要手工操作，致使龟甲翻动频繁，易于破碎，灰屑较多、难以掌握火候、烟雾大，且无客观的量化指标。高压蒸汽是一种基于热力学理论的热机械加工手段，可精准通过调控温度和压力来软化原料的硬度，操作简单。因此，本专利技术对龟甲分别进行高压蒸汽和醋炙预处理，以未处理龟甲作为对照，以达到降低龟甲磨粉能耗及提高其水溶性成分的目的。
3、此外，龟甲经这两种工艺辅助磨粉前后，其生物活性(如抗氧化及抗炎活性)的变化情况及相关分子机制尚不明确，因此也需要本专利技术进一步阐明。目前，传统中药药用作用机制的研究主要通
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种提高与评价龟甲抗氧化和抗炎活性的方法。
2、为实现上述目的及其他相关目的，本专利技术提供的技术方案是：一种提高龟甲抗氧化和抗炎活性的方法，将龟甲在110-130℃条件下处理60-200min。
3、为实现上述目的及其他相关目的，本专利技术提供的技术方案是：一种评价龟甲抗氧化和抗炎活性的方法，包括下列步骤：
4、步骤1：将龟甲在110-130℃条件下处理60-200min，然后55-65℃条件下烘干至恒重，然后磨粉，得到龟甲粉；
5、步骤2：分别检测龟甲粉的水溶性成分溶出情况，包括水溶性浸出物含量、水溶性蛋白含量及肽含量；
6、步骤3：将龟甲粉加入蒸馏水中，在55-65℃水浴中加热0.5-1.5h，重复2-4次；将上清液浓缩后在-20℃保存，加工成冻干粉；
7、步骤4：采用dpph自由基清除试剂盒、abts自由基清除试剂盒、cox-2抑制剂筛选试剂盒检测冻干粉的抗氧化活性和抗炎活性。
8、优选的技术方案为：还包括：使用液相色谱质谱联用技术对冻干粉进行分析，包括样品制备、色谱分离和质谱检测；通过数据处理和峰识别步骤，得到化学成分的信息，并与数据库进行匹配、注释和数据处理，随后对处理的数据进行物质分类统计、主成分分析和热图分析、正交偏最小二乘判别分析、venn及热图可视化分析来筛选龟甲特有的上调化学成分。
9、优选的技术方案为：还包括：对冻干粉中的活性成分及其作用靶点进行筛选，并收集与炎症和氧化应激相关的靶点；通过蛋白-蛋白相互作用构建蛋白互作网络图并筛选出对活性成分具有关键作用的靶点；使用基因本体论富集分析和通路富集分析来探索活性成分的功能和通路；还通过构建药物-成分-靶点-通路-疾病网络图，整合了活性成分、靶点、通路和疾病的关系，进一步研究和分析龟甲在抗氧化和抗炎方面的作用。
10、由于上述技术方案运用，本专利技术与现有技术相比具有的优点是：
11、1、本专利技术首次采用高压蒸汽辅助龟甲磨粉，在辅助磨粉效果方面(磨粉能耗、龟甲粉粒径、水溶性成分溶出)，高压蒸汽预处理优于醋炙；在抗炎效果上，高压蒸汽预处可与未处理龟甲相媲美，且其操作更为简单，温度调控精准，为龟甲工业化及连续化的抗炎方向药材加工提供可接受的预处理技术。
12、2、本专利技术首次证明醋炙预处理可强化龟甲提取物的抗氧化和抗炎活性。
13、3、本专利技术首次利用代谢组学结合网络药理学技术，从化合物分布、有效活性成分、作用靶点和通路等方面，分析醋炙强化龟甲抗氧化、抗炎活性较好的分子机制原因。
14、4、基于以上技术，本专利技术还降低了龟甲生物活性的分析研究成本，拓宽了计算机网络技术在医疗领域的应用范围。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种提高龟甲抗氧化和抗炎活性的方法，其特征在于：将龟甲在110-130℃条件下处理60-200min。
2.一种评价龟甲抗氧化和抗炎活性的方法，其特征在于：包括下列步骤：
3.根据权利要求2所述的价龟甲抗氧化和抗炎活性的方法，其特征在于：还包括：使用液相色谱质谱联用技术对冻干粉进行分析，包括样品制备、色谱分离和质谱检测；通过数据处理和峰识别步骤，得到化学成分的信息，并与数据库进行匹配、注释和数据处理，随后对处理的数据进行物质分类统计、主成分分析和热图分析、正交偏最小二乘判别分析、Venn及热图可视化分析来筛选龟甲特有的上调化学成分。
4.根据权利要求2所述的价龟甲抗氧化和抗炎活性的方法，其特征在于：还包括：对冻干粉中的活性成分及其作用靶点进行筛选，并收集与炎症和氧化应激相关的靶点；通过蛋白-蛋白相互作用构建蛋白互作网络图并筛选出对活性成分具有关键作用的靶点；使用基因本体论富集分析和通路富集分析来探索活性成分的功能和通路；还通过构建药物-成分-靶点-通路-疾病网络图，整合了活性成分、靶点、通路和疾病的关系，进一步研究和分析龟甲在抗氧化和抗炎方
...【技术特征摘要】
1.一种提高龟甲抗氧化和抗炎活性的方法，其特征在于：将龟甲在110-130℃条件下处理60-200min。
2.一种评价龟甲抗氧化和抗炎活性的方法，其特征在于：包括下列步骤：
3.根据权利要求2所述的价龟甲抗氧化和抗炎活性的方法，其特征在于：还包括：使用液相色谱质谱联用技术对冻干粉进行分析，包括样品制备、色谱分离和质谱检测；通过数据处理和峰识别步骤，得到化学成分的信息，并与数据库进行匹配、注释和数据处理，随后对处理的数据进行物质分类统计、主成分分析和热图分析、正交偏最小二乘...
【专利技术属性】
技术研发人员：陆剑锋，任梦影，林琳，李正荣，赖年悦，
申请(专利权)人：合肥工业大学，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。