【技术实现步骤摘要】
专利
本专利技术涉及仅有重链的抗bcma抗体(uniab)。本专利技术还涉及制备此类抗体的方法、包含此类抗体的组合物(包括药物组合物)以及它们用于治疗以bcma表达为特征的b细胞病症的用途。
技术介绍
0、专利技术背景
1、b细胞成熟抗原(bcma)
2、bcma，也称为肿瘤坏死因子超家族成员17(tnfrsf17)(uniprot q02223)，是仅在浆细胞和浆母细胞上表达的细胞表面受体。bcma是以下物质的的受体：肿瘤坏死因子(tnf)超家族中两种配体：april(增殖诱导配体，也称为tnfsf13；tall-2和trdl-1；bcma的高亲和力配体)和b细胞活化因子(baff)(也称为blys；tall-1；thank；ztnf4；tnfsf20；和d8ertd387e；bcma的低亲和力配体)。april和baff是结合bcma并促进浆细胞存活的生长因子。bcma也在人多发性骨髓瘤(mm)中的恶性浆细胞上高度表达。结合至bcma的抗体描述于例如gras等，1995,int.immunol.7:1093-1106、wo200124811和wo200124812中。与taci交叉反应的抗bcma抗体描述于wo2002/066516中。针对bcma和cd3的双特异性抗体描述于例如us2013/0156769 a1和us2015/0376287 a1中。已报道抗bcma抗体-mmae或-mmaf缀合物选择性地诱导多发性骨髓瘤细胞的杀伤(tai等，blood 2014,123(20):3128-38
3、仅有重链的抗体
4、在常规igg抗体中，重链和轻链的缔合部分由轻链恒定区和重链ch1恒定区之间的疏水相互作用导致。在重链框架2(fr2)和框架4(fr4)区域中存在另外的残基，其也对重链与轻链之间的这种疏水相互作用作出贡献。
5、然而，已知骆驼科动物(包括骆驼、单峰驼和美洲驼的胼足亚目)的血清含有仅由成对的h链(仅有重链的抗体或uniab)组成的主要类型的抗体。骆驼科(单峰驼(camelusdromedarius)、双峰驼(camelus bactrianus)、大羊驼(lama glama)、原驼(lamaguanaco)、美洲羊驼(lama alpaca)和骆马(lama vicugna))的uniab具有独特的结构，其由单个可变结构域(vhh)、铰链区和两个恒定结构域(ch2和ch3)组成，它们与经典抗体的ch2和ch3结构域高度同源。这些uniab缺乏恒定区(ch1)的第一结构域，所述第一结构域存在于基因组中，但在mrna加工过程中被剪接掉。缺少ch1结构域解释了uniab中不存在轻链，因为该结构域是轻链恒定结构域的锚定位置。此类uniab天然进化以通过来自常规抗体的3个cdr或其片段赋予抗原结合特异性和高亲和力(muyldermans，2001；j biotechnol 74:277–302；revets等，2005；expert opin biol ther 5:111–124)。软骨鱼，诸如鲨鱼，也进化出独特类型的免疫球蛋白(称为ignar)，其缺乏轻链多肽链并且完全由重链组成。可通过分子工程化操纵ignar分子以产生单个重链多肽(vnar)的可变结构域(nuttall等，eur.j.biochem.270,3543-3554(2003)；nuttall等，function and bioinformatics 55,187-197(2004)；dooley等，molecular immunology 40,25-33(2003))。
6、在20世纪60年代确定了缺乏轻链的仅有重链的抗体结合抗原的能力(jaton等(1968)biochemistry,7,4185-4195)。与轻链物理分离的重链免疫球蛋白相对于四聚体抗体保留了80％的抗原结合活性。sitia等，(1990)cell,60,781-790证明从重排的小鼠μ基因中去除ch1结构域导致在哺乳动物细胞培养物中产生缺乏轻链的仅有重链的抗体。产生的抗体保留vh结合特异性和效应子功能。
7、通过免疫接种可针对多种抗原产生具有高特异性和亲和力的重链抗体(van derlinden,r.h.等，biochim.biophys.acta.1431,37-46(1999))，并且可容易地克隆vhh部分以及使其在酵母中表达(frenken,l.g.j.等，j.biotechnol.78,11-21(2000))。它们的表达水平、溶解度和稳定性显著高于经典f(ab)或fv片段的那些表达水平、溶解度和稳定性(ghahroudi，m.a.等febs lett.414,521-526(1997))。
8、其中λ(兰姆达)轻(l)链基因座和/或λ及κ(卡帕)l链基因座已被功能性沉默的小鼠以及由此类小鼠产生的抗体描述于美国专利第7,541,513号和第8,367,888号中。例如，在例如wo2006008548；美国申请公开第20100122358号；nguyent等，2003,immunology；109(1),93-101；brüggemann等，crit.rev.immunol.；2006,26(5):377-90；和zou等，2007,jexp med；204(13):3271–3283中报道了在小鼠和大鼠中重组产生仅有重链的抗体。在geurts等，2009，science,325(5939):433中描述了经由锌指核酸酶的胚胎显微注射产生敲除大鼠。在美国专利第8,883,150号和第9,365,655号中描述了可溶性仅有重链的抗体和包含产生此类抗体的异源重链基因座的转基因啮齿动物。包含单结构域抗体作为结合(靶向)结构域的car-t结构描述于例如iri-sofla等，2011,experimental cell research 317：2630-2641和jamnani等，2014，biochimbiophys acta,1840:378-386中。
技术实现思路
1、本专利技术涉及与人b细胞成熟抗原(bcma)结合的仅有重链的抗体。
2、在一个方面，本专利技术涉及仅有重链的(抗bcma)抗体，其包含含有以下序列的重链可变区：
3、(a)在seq id no:1、2或3的氨基酸序列中的任一个中具有2个或更少的取代的cdr1；和/或
4、(b)在seq id no:4至7的氨基酸序列中的任一个中具有2个或更少的取代的cdr2；和/或
5、(c)在seq id no:8至11的氨基酸序列中的任一个中具有2个或更少的取代的cdr3。
6、在一个实施方案中，cdr1、cdr2和cdr3序列存在于人框架中。
7、在另一个实施方案中，本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种与人B细胞成熟抗原(BCMA)结合的仅有重链的抗体，所述抗体包含含有以下序列的重链可变区：
2.如权利要求1所述的仅有重链的抗体，其中所述CDR1、CDR2和CDR3序列存在于人框架中。
3.如权利要求1所述的仅有重链的抗体，所述抗体还包含不存在CH1序列的重链恒定区序列。
4.如权利要求1-3中任一项所述的仅有重链的抗体，所述抗体包含：
5.如权利要求4所述的仅有重链的抗体，所述抗体包含：
6.如权利要求5所述的仅有重链的抗体，所述抗体包含：
7.如权利要求1-3中任一项所述的仅有重链的抗体，所述抗体包含与SEQ ID NO:12至15的序列中的任一个具有至少95％序列同一性的重链可变区。
8.如权利要求7所述的仅有重链的抗体，所述抗体包含选自由SEQ ID NO:12至15组成的组的重链可变区序列。
9.一种与人B细胞成熟抗原(BCMA)结合的仅有重链的抗体，所述抗体包含重链可变区，所述重链可变区包含含有以下序列的重链可变：
10.一种与人B细胞成熟抗原(BCM
...【技术特征摘要】
1.一种与人b细胞成熟抗原(bcma)结合的仅有重链的抗体，所述抗体包含含有以下序列的重链可变区：
2.如权利要求1所述的仅有重链的抗体，其中所述cdr1、cdr2和cdr3序列存在于人框架中。
3.如权利要求1所述的仅有重链的抗体，所述抗体还包含不存在ch1序列的重链恒定区序列。
4.如权利要求1-3中任一项所述的仅有重链的抗体，所述抗体包含：
5.如权利要求4所述的仅有重链的抗体，所述抗体包含：
6.如权利要求5所述的仅有重链的抗体，所述抗体包含：
7.如权利要求1-3中任一项所述的仅有重链的抗体，所述抗体包含与seq i...
【专利技术属性】
技术研发人员：N·特林克莱因，S·F·奥尔德雷德，K·哈里斯，W·范斯库滕，
申请(专利权)人：特尼奥生物股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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