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检测RIPKI的物质在制备诊断CKD相关血管病的试剂盒中的应用制造技术

技术编号：40981866 阅读：5 留言：0更新日期：2024-04-18 21:27

本发明专利技术公开了一种检测RIPKI的物质在制备诊断CKD相关血管病的试剂盒中的应用。检测RIPKI的物质包括SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.4所示引物；涉及慢性肾脏病相关心血管病变诊断技术领域。本发明专利技术前期筛选获得慢性肾脏病心血管事件患者差异表达的基因，发现RIPK1在慢性肾脏病中表达明显增高，其表达水平与肾功能负相关，与血管内皮功能状态负相关，在一定程度上可以反映CKD患者心血管病变的严重程度。本发明专利技术发现的RIPK1作为全新的分子标记物在慢性肾脏病患者疾病进展的预测、评估方面具有一定的应用前景。

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【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及ckd相关血管病诊断，更具体地说是涉及检测ripki的物质在制备诊断ckd相关血管病的试剂盒中的应用。

技术介绍

1、据估计，全球有13.4％的人口患有慢性肾脏病(ckd)，其特点是流行病学死亡率高。在慢性肾病患者中，心血管疾病是导致死亡的主要原因。ckd是心血管疾病的独立危险因素，研究证实，肾小球滤过率(estimated glomerularfiltration rate,egfr)与心血管事件发生率和死亡率呈负相关；且随着肾功能下降，心血管疾病如动脉粥样硬化等发病率明显上升。心血管事件预测及早期诊断是降低ckd患者不良预后需解决的关键问题。临床上尚缺乏用于ckd心血管事件预测的较为稳定的生物标志物的报道。

2、心血管疾病最早的表现之一是内皮功能障碍，包括血管张力调节不当、炎症反应激活和抗血栓能力受损。毒素积累如硫酸吲哚酯(is)和马尿酸(ha)等会破坏内皮稳态，引起炎症反应，最终导致ckd的内皮功能障碍。

3、受体相互作用丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(ripk1)是一种76kda蛋白，具有c端死亡结构域、n端激酶结构域和中间结构域，具有rhim(受体相互作用蛋白同型相互作用基序)，可以与其他含rhim的蛋白质接触。研究发现ripk1调控细胞nf-κb信号传导，以介导炎症反应。因此，深入探讨ripk1在ckd内皮失活中的作用及机制是ckd心血管并发症防治亟待解决的关键问题。同时，以此为依据，提供一种可以作为ckd心血管事件发病诊断的标志物并对其进行应用是本领域技术人员亟需解决的问题。

技术实现思路

1、有鉴于此，本专利技术采用如下技术方案：

2、检测ripki的物质在制备诊断ckd相关血管病的试剂盒中的应用。

3、在上述技术方案中，检测ripki的物质包括seq id no.1～seq id no.4所示引物；

4、ripk1-f：5’-gggaaggtgtctctgtgtttc-3’，seq id no.1；

5、ripk1-r：5’-cctcgttgtgctcaatgcag-3’，seq id no.2；

6、β-actin-f：5’-gaagagctacgagctgcctga-3’，seq id no.3；

7、β-actin-r：5’-cagacagcactgtgttggcg-3’，seq id no.4。

8、在上述技术方案中，ripk1与ckd患者内皮功能障碍相关，且ripk1水平与fmd负性相关。

9、在上述技术方案中，ripk1介导iκbα降解和nf-κb激活的机制，ripk1分别与ikkα、ikkβ和ikkγ形成复合物，通过调控ikk来影响炎症因子nf-κb的表达。

10、作为与上述技术方案相同的专利技术构思，本专利技术还请求保护一种诊断ckd相关血管病的试剂盒，所述试剂盒包括seq id no.1～seq id no.4所示引物。

11、作为与上述技术方案相同的专利技术构思，本专利技术还请求保护干扰ripki表达的物质在制备治疗ckd相关心血管病变疾病的药物中的应用。

12、优选地，干扰ripki表达的物质为si-ripk1，序列为seq id no.5和seq id no.6所示；

13、5′-gaaaguguagaagaggacg-3′，如seq id no.5；

14、5′-cguccucuucuacacuuuc-3′，如seq id no.6。

15、si-ripk1为双链rna，序列是一正一反成对存在，当进行转染实验时，小干扰双链rna作为整体与原基因mrna结合并干扰其表达，从而使原基因表达降低。

16、优选地，si-ripk1降低ripk1表达，进而抑制ha处理诱导的iκbα降解和nf-κb活性。

17、经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本专利技术前期筛选获得慢性肾脏病心血管事件患者差异表达的基因，发现ripk1在慢性肾脏病中表达明显增高，其表达水平与肾功能负相关，与血管内皮功能状态负相关，在一定程度上可以反映ckd患者心血管病变的严重程度。本专利技术发现的ripk1作为全新的分子标记物在慢性肾脏病患者疾病进展的预测、评估方面具有一定的应用前景。

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【技术保护点】

1.检测RIPKI的物质在制备诊断CKD相关血管病的试剂盒中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述检测RIPKI的物质包括SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.4所示引物；

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，RIPK1与CKD患者内皮功能障碍相关，且RIPK1水平与FMD负性相关。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，RIPK1介导IκBα降解和NF-κB激活的机制，RIPK1分别与IKKα、IKKβ和IKKγ形成复合物，通过调控IKK来影响炎症因子NF-κB的表达。

5.一种诊断CKD相关血管病的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括SEQ ID NO.1～SEQID NO.4所示引物。

6.干扰RIPKI表达的物质在制备治疗CKD相关心血管病变疾病的药物中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，干扰RIPKI表达的物质为si-RIPK1，序列为SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示；

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，si-RI

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【技术特征摘要】

1.检测ripki的物质在制备诊断ckd相关血管病的试剂盒中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述检测ripki的物质包括seq id no.1～seq id no.4所示引物；

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，ripk1与ckd患者内皮功能障碍相关，且ripk1水平与fmd负性相关。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，ripk1介导iκbα降解和nf-κb激活的机制，ripk1分别与ikkα、ikkβ和ikkγ形成复合物，通过调控ikk来影响炎症因子nf-κ...

【专利技术属性】
技术研发人员：王荣，吕智美，王呈，胡锦秀，苏红，郎雅婷，
申请(专利权)人：山东第一医科大学附属省立医院山东省立医院，
类型：发明
国别省市：

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