【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药，涉及缓解微塑料对机体肠道损伤的复合益生菌后生元发酵物及其应用。
技术介绍
1、微塑料被定义为直径小于5mm的塑料碎片或者颗粒。这一概念是2004年首次在《science》上被提出的，在2008年明确限定了微塑料的粒径。微塑料分为初级微塑料和次级微塑料，初级微塑料是粒径较大的塑料碎片或者颗粒。而次级微塑料是初级微塑料进入环境以后经过一系列的降解，物理化学变化形成的粒径更小的塑料碎片或颗粒。联合国环境规划署(unep)预计，到2050年全球初级塑料的产量将达到340亿吨。
2、当今人们的生活中，随处可见的塑料制品，如塑料杯，碗，塑料袋，食品包装袋，化妆品中的磨砂膏，清洁泥膜等。人类的饮食中也被微塑料污染，厄瓜多尔蜂蜜、啤酒、牛奶和点心中检测出粒径13.45-6742.48μm范围内纤维和尺寸2.48-247.54μm之间碎片。此外，在胎盘、胎粪、婴儿粪便、母乳和婴儿配方奶粉中也检测出了16种微塑料。在环境中也有微塑料污染，大气，土壤，海水，淡水，陆地都有检测出微塑料的存在。
3、有研究者发现，接触微塑料会破坏肠道微环境稳定性，特别是肠道屏障的影响，引起肠道氧化损伤和炎症，以及肠道上皮的破坏，粘液层减少，微生物紊乱。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供缓解微塑料对机体肠道损伤的复合益生菌后生元发酵物及其应用，以椰子水发酵三株乳酸杆菌来制备后生元，来缓解微塑料对机体肠道屏障的损伤。
2、本专利技术为实现上述目的采用的技术方
3、本专利技术提供了缓解微塑料对机体肠道损伤的复合益生菌后生元发酵物，是以椰子水发酵植物乳杆菌hnu082，发酵乳杆菌hnu312，副干酪乳杆菌hnu502制备而成的。
4、本专利技术还提供了缓解微塑料对机体肠道损伤的复合益生菌后生元发酵物的制备方法，包括：
5、椰子水用纱布过滤以后，115℃灭菌15-20min；
6、将植物乳杆菌hnu082，发酵乳杆菌hnu312，副干酪乳杆菌hnu502的三代菌接入灭菌椰子水中发酵培养后，灭活，得到复合益生菌后生元发酵物。
7、优选地，将植物乳杆菌hnu082，发酵乳杆菌hnu312，副干酪乳杆菌hnu502分别接种于mrs液体培养基中，然后置于37℃恒温培养箱中培养24h；取200μl菌液传代于mrs液体培养基中，置于37℃恒温培养箱中培养24h后，再次取200μl菌液传代于mrs液体培养基中，此为三代菌；将三代菌的菌液以4000r，5min离心后弃去上清，加入生理盐水混匀，再加入灭菌椰子水中在37℃发酵培养16h。
8、优选地，每株菌以3％的接种量接种于灭菌椰子水中，使混合菌接种量为9％。
9、优选地，将发酵液用高压蒸汽灭菌锅95～105℃，15～20min灭活。
10、本专利技术又提供了上述复合益生菌后生元发酵物在制备缓解微塑料对机体肠道损伤的产品中的应用。
11、优选地，所述复合益生菌后生元发酵物通过缓解聚苯乙烯诱导的炎症缓解微塑料对机体肠道屏障的损伤。
12、更优选地，所述复合益生菌后生元发酵物通过降低血清中的促炎因子ifn-γ，il-6及缓解炎症因子的产生缓解聚苯乙烯诱导的炎症。
13、优选地，所述复合益生菌后生元发酵物通过缓解聚苯乙烯诱导的occludin和claudin-1表达的降低缓解微塑料对机体肠道屏障的损伤。
14、优选地，所述复合益生菌后生元发酵物通过缓解聚苯乙烯诱导的结肠杯状细胞数量的减少缓解微塑料对机体肠道屏障的损伤。
15、本专利技术的有益效果在于：
16、本专利技术以椰子水发酵三株乳酸杆菌来制备后生元，椰子水主要含有葡萄糖和果糖，营养成分丰富，富含17种以上游离氨基酸，如精氨酸、丙氨酸、胱氨酸和丝氨酸，维生素c和b族维生素以及矿物质，其中矿物质fe2+和k+含量最高，是培养微生物的天然培养基。同时，椰子水还具有美容养颜，利尿消肿，杀菌消炎，维持人体肠道菌群的稳定的功效。后生元与益生菌相比，它不是活的微生物，具有更长的保质期，安全性更高，对一些特殊人群同样适应，没有传递耐药基因风险，更广泛的作用靶点，更易于被吸收。
17、本专利技术制备的后生元能够缓解聚苯乙烯诱导的炎症、缓解聚苯乙烯诱导的occludin和claudin-1表达的降低、缓解聚苯乙烯诱导的结肠杯状细胞数量的减少，因此，本专利技术制备的后生元可以缓解微塑料对机体肠道屏障的损伤。
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1.缓解微塑料对机体肠道损伤的复合益生菌后生元发酵物，是以椰子水发酵植物乳杆菌HNU082，发酵乳杆菌HNU312，副干酪乳杆菌HNU502制备而成的。
2.缓解微塑料对机体肠道损伤的复合益生菌后生元发酵物的制备方法，包括：
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，将植物乳杆菌HNU082，发酵乳杆菌HNU312，副干酪乳杆菌HNU502分别接种于MRS液体培养基中，然后置于37℃恒温培养箱中培养24h；取200μL菌液传代于MRS液体培养基中，置于37℃恒温培养箱中培养24h后，再次取200μL菌液传代于MRS液体培养基中，此为三代菌；将三代菌的菌液以4000r，5min离心后弃去上清，加入生理盐水混匀，再加入灭菌椰子水中在37℃发酵培养16h。
4.根据权利要求2或3所述的制备方法，其特征在于，每株菌以3％的接种量接种于灭菌椰子水中，使混合菌接种量为9％。
5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，将发酵液用高压蒸汽灭菌锅95～105℃，15～20min灭活。
6.权利要求1所述的复合益生菌后生元发酵物在制
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述复合益生菌后生元发酵物通过缓解聚苯乙烯诱导的炎症缓解微塑料对机体肠道屏障的损伤。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述复合益生菌后生元发酵物通过降低血清中的促炎因子IFN-γ，IL-6及缓解炎症因子的产生缓解聚苯乙烯诱导的炎症。
9.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述复合益生菌后生元发酵物通过缓解聚苯乙烯诱导的Occludin和Claudin-1表达的降低缓解微塑料对机体肠道屏障的损伤。
10.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述复合益生菌后生元发酵物通过缓解聚苯乙烯诱导的结肠杯状细胞数量的减少缓解微塑料对机体肠道屏障的损伤。
...【技术特征摘要】
1.缓解微塑料对机体肠道损伤的复合益生菌后生元发酵物，是以椰子水发酵植物乳杆菌hnu082，发酵乳杆菌hnu312，副干酪乳杆菌hnu502制备而成的。
2.缓解微塑料对机体肠道损伤的复合益生菌后生元发酵物的制备方法，包括：
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，将植物乳杆菌hnu082，发酵乳杆菌hnu312，副干酪乳杆菌hnu502分别接种于mrs液体培养基中，然后置于37℃恒温培养箱中培养24h；取200μl菌液传代于mrs液体培养基中，置于37℃恒温培养箱中培养24h后，再次取200μl菌液传代于mrs液体培养基中，此为三代菌；将三代菌的菌液以4000r，5min离心后弃去上清，加入生理盐水混匀，再加入灭菌椰子水中在37℃发酵培养16h。
4.根据权利要求2或3所述的制备方法，其特征在于，每株菌以3％的接种量接种于灭菌椰子水中，使混合菌接种量为9％。
5.根据权利要求2...
【专利技术属性】
技术研发人员：张家超，赵倩，都灵玮，苏顺勇，韩哲，霍冬雪，
申请(专利权)人：海南大学，
类型：发明
国别省市：
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