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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及α-淀粉酶,更具体而言,涉及一种α-淀粉酶的突变多肽及其应用。
技术介绍
1、淀粉酶是催化水解淀粉的一类酶,广泛存在于动物、植物和微生物中,可以将饲料中的淀粉分解为低聚糖或单糖,其作用于淀粉时,是从淀粉分子的内部随机切开α-1,4糖苷键,生成糊精和还原糖,产物末端残基碳原子构型为α构型。
2、动物饲料中含有淀粉、蛋白质、脂肪、纤维素、半纤维素、果胶等多种营养成分,这些营养成分都是由生物多聚物组成,必须依靠水解酶类将其酶解,才能被动物肠道吸收。研究结果证明,在饲料中添加酶制剂具有显著强化消化功能,提高饲料利用率等功效。
3、蛋白酶是应用最多的酶制剂之一,例如食品工业、酿酒酿造、洗涤剂行业、饲料工业、制革工业、丝绸行业和医药行业等,所以,这种环境下对蛋白酶的产量和特性改良方面都提出了更高的要求。在饲料中起作用的淀粉酶主要是α-淀粉酶和糖化酶(葡萄糖淀粉酶)。α-淀粉酶是将大分子淀粉水解成中等和低分子物质,产生大量新的非还原性末端,有利于糖化酶进一步水解。
4、中国专利技术公开号cn114606216a,名称为一种表达量提高的α-淀粉酶突变体q441n/n442h及其编码基因和应用,其通过对野生型α-淀粉酶的441位点和442位点进行了突变,获得了在大肠杆菌中表达量提高的突变体,文中记载其突变后的粗酶液的活性是野生型淀粉酶的15.6倍。为了进一步提高该α-淀粉酶的表达活性,专利技术人对该多肽进行了优化,进一步改善了该α-淀粉酶的表达活性。
技术实现思路>
1、本专利技术旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一,为此,本专利技术的一个方面的目的在于,提供一种α-淀粉酶的突变多肽,所述α-淀粉酶突变多肽与亲本的氨基酸序列相比,在对应于seq id no.1所示氨基酸序列的以下氨基酸位点处存在突变:第361位、第420位、第449位、第481位、第482位、第484位。
2、优选的,所述突变多肽与亲本的氨基酸序列相比,在对应于seq id no.1所示氨基酸序列的以下氨基酸位点处存在以下突变:y361e和/或s420y。
3、优选的,所述突变多肽选自以下组:y361e;s420y;k482f;t484n;y361e+s420y;y361e+s420y+d449n+r481n;s420y+d449n;r481n+k482f+t484n;s420y+d449n+r481n+k482f+t484n;y361e+s420y+d449n+r481n+k482f;y361e+s420y+d449n+r481n+k482f+t484n。
4、本专利技术公开了一种多核苷酸,所述多核苷酸编码含有上述的α-淀粉酶的突变多肽。
5、本专利技术公开了一种核酸构建体,所述核酸构建体含有上述的多核苷酸。
6、优选的,还含有与之可操作连接的调控元件;
7、优选的,所述调控元件选自下组中的一种或任意几种:增强子、转座子、启动子、终止子、前导序列、多核苷酸序列、标记基因。
8、本专利技术公开了一种重组基因工程菌,所述重组基因工程菌包含权上述的多核苷酸,或上述的核酸构建体。
9、本专利技术的另一个方面的目的在于,提供一种α-淀粉酶的突变多肽的应用,包括上述的突变多肽、多核苷酸、核酸构建体或重组基因工程菌在食品和饲料领域的应用。
10、优选的,所述应用包括将上述的α-淀粉酶突变多肽用于畜禽饲喂。
11、优选的,所述应用包括饲料添加剂组合物,所述饲料添加剂组合物中包含上述的突变多肽。
12、优选的,所述应用包括畜禽饲料,所述畜禽饲料包含如上述的饲料添加剂组合物。
13、本专利技术所具有的有益效果如下:
14、将本专利技术的α-淀粉酶突变多肽添加在饲粮中可以帮助幼龄动物消化利用淀粉,其生长性能与饲料转化率十分有益。肉鸡日粮中添加产α-淀粉酶突变多肽的活大肠杆菌培养物可以起到抗生素生长促进剂的作用,改善肠道形态,提高生产性能。
15、本专利技术的附加方面和优点将在下面的描述中变得明显,或通过本专利技术的实践了解到。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种α-淀粉酶的突变多肽,其特征在于,所述α-淀粉酶突变多肽与亲本的氨基酸序列相比,在对应于SEQ ID No.1所示氨基酸序列的以下氨基酸位点处存在突变:第361位、第420位、第449位、第481位、第482位、第484位。
2.根据权利要求1所述的一种α-淀粉酶的突变多肽,其特征在于,所述突变多肽与亲本的氨基酸序列相比,在对应于SEQ ID No.1所示氨基酸序列的以下氨基酸位点处存在以下突变中的一个或多个:Y361E、S420Y、D449N、R481N、K482F、T484N。
3.根据权利要求2所述的一种α-淀粉酶的突变多肽,其特征在于,所述突变多肽选自以下组:Y361E;S420Y;K482F;T484N;Y361E+S420Y;Y361E+S420Y+D449N+R481N;S420Y+D449N;R481N+K482F+T484N;S420Y+D449N+R481N+K482F+T484N;Y361E+S420Y+D449N+R481N+K482F;Y361E+S420Y+D449N+R481N+K482F+T484N。
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5.一种核酸构建体,其特征在于,所述核酸构建体含有权利要求4所述的多核苷酸。
6.一种重组基因工程菌,其特征在于,所述重组基因工程菌包含权利要求4所述的多核苷酸,或权利要求5所述的核酸构建体。
7.一种α-淀粉酶的突变多肽的应用,其特征在于,包括权利要求1或2所述的突变多肽、权利要求4所述的多核苷酸、权利要求5所述的核酸构建体或权利要求5所述的重组基因工程菌在食品和饲料领域的应用。
8.根据权利要求7所述的一种α-淀粉酶的突变多肽的应用,其特征在于,所述应用包括将权利要求1所述的α-淀粉酶突变多肽用于畜禽饲喂。
9.根据权利要求7所述的一种α-淀粉酶的突变多肽的应用,其特征在于,所述应用包括饲料添加剂组合物,所述饲料添加剂组合物中包含权利要求1所述的突变多肽。
10.根据权利要求9所述的一种α-淀粉酶的突变多肽的应用,其特征在于,所述应用包括畜禽饲料,所述畜禽饲料包含如权利要求8所述的饲料添加剂组合物。
...【技术特征摘要】
1.一种α-淀粉酶的突变多肽,其特征在于,所述α-淀粉酶突变多肽与亲本的氨基酸序列相比,在对应于seq id no.1所示氨基酸序列的以下氨基酸位点处存在突变:第361位、第420位、第449位、第481位、第482位、第484位。
2.根据权利要求1所述的一种α-淀粉酶的突变多肽,其特征在于,所述突变多肽与亲本的氨基酸序列相比,在对应于seq id no.1所示氨基酸序列的以下氨基酸位点处存在以下突变中的一个或多个:y361e、s420y、d449n、r481n、k482f、t484n。
3.根据权利要求2所述的一种α-淀粉酶的突变多肽,其特征在于,所述突变多肽选自以下组:y361e;s420y;k482f;t484n;y361e+s420y;y361e+s420y+d449n+r481n;s420y+d449n;r481n+k482f+t484n;s420y+d449n+r481n+k482f+t484n;y361e+s420y+d449n+r481n+k482f;y361e+s420y+d449n+r481n+k482f+t484n。
【专利技术属性】
技术研发人员:王昌虹,
申请(专利权)人:山西晋龙集团饲料有限公司,
类型:发明
国别省市:
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