【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及化妆品原料功效研究领域，具体涉及一种来源于中药垫状卷柏的具有上调皮肤表皮角质形成细胞丝聚蛋白基因flg表达的垫状卷柏挥发油(未脱色)，可以作为化妆品功效活性物原料和皮肤表皮角质形成细胞丝聚蛋白基因flg表达的促进剂。
技术介绍
1、皮肤作为机体的第一道屏障，使机体免受机械损伤、微生物、化学物质和过敏原的侵害，起到抵御环境的作用。作为皮肤最外层的角质层(sc)在皮肤屏障的形成中起着主要作用。皮肤表皮的角质层由几层具有角化包膜(ce)的角质细胞和细胞间脂质片层组成。
2、表皮屏障的结构和功能损伤会使刺激物和过敏原穿透角质层，从而导致各种皮肤疾病，包括特应性皮炎、刺激性接触性皮炎和过敏性接触性皮肤炎。基于临床发现和/或用于皮肤刺激性评估的非侵入性参数，已经证明了表皮屏障破坏在这些皮肤疾病的发展和进展中的作用。
3、丝聚蛋白(filaggrin，flg)蛋白作为主要的角蛋白结合蛋白，以角蛋白-丝聚蛋白原(profilaggrin)复合体的形式储存在角质透明颗粒中。在皮肤表皮角质形成细胞角化过程中，丝聚蛋白原被几种酶切割成丝聚蛋白单体。除了与角质细胞内的角蛋白细丝结合外，丝聚蛋白还与角化包膜连接。另外，丝聚蛋白单体还能降解形成尿刊酸和吡咯烷羧酸，从而提高皮肤的酸性酸度和保水能力。如果丝聚蛋白基因flg由于发生基因突变或异常调节等原因导致蛋白质表达降低，引起皮肤功能紊乱，导致一系列皮肤病。因此，丝聚蛋白在皮肤表皮屏障和保水能力上具有重要的生理意义。
4、由于丝聚蛋白在皮肤表皮屏障中具有重要作
5、垫状卷柏(selaginella pulvinata(hook.et grev.)maxim)为蕨类卷柏科(selaginellaceae)卷柏属(selaginella)植物卷柏的干燥全草，属多年生草本植物。2020年版药典已经将垫状卷柏作为卷柏的规定品种收录其中。垫状卷柏及其同属植物分布广泛，品种繁多，全国约有70余种。
6、目前，卷柏属植物的化学成分研究较多，主要化学成分是黄酮类，其次包括炔酚类、木脂素类、甾体类、生物碱类、蒽醌类等成分。现代药理及临床研究表明卷柏属植物具有消炎、解毒、抗菌、抗病毒等作用。但关于垫状卷柏挥发油提取物的功效研究还未见报道。
7、专利技术人在研究垫状卷柏提取物功效的过程中，意外地发现，采用co2超临界萃取技术提取的垫状卷柏挥发油(未脱色)可以调控角质形成细胞中丝聚蛋白基因flg表达，具有促进表皮角质形成细胞分化和改善表皮屏障功能的作用。
技术实现思路
1、一方面，本专利技术提供了一种角质形成细胞丝聚蛋白基因flg的表达促进剂，其中，所述表达促进剂是垫状卷柏提取物，所述垫状卷柏提取物中总糖含量≥5.72wt％，总多酚含量≥0.3wt％，和/或总黄酮含量≥1.12wt％。
2、在优选的实施方式中，所述垫状卷柏提取物通过超临界流体萃取法提取得到，所述方法包括以下步骤：
3、(a)提供垫状卷柏，机械粉碎；
4、(b)加入乙醇进行拌料；
5、(c)进行超临界流体萃取，萃取压力20-25mpa，萃取温度为40-45℃；
6、(d)收集萃取物，低温静置；
7、(e)离心，收集上层液体，过滤；
8、(f)滤液浓缩至浸膏状态，得到垫状卷柏提取物。
9、在优选的实施方式中，所述步骤(a)包括机械粉碎至20-40目。在优选的实施方式中，所述步骤(b)采用95体积％的乙醇。在优选的实施方式中，所述步骤(c)还包括：co2流量为75-85l/h，超临界萃取时间约60-120min。在优选的实施方式中，所述步骤(c)还包括：分离釜i压力8-9mpa，分离釜i温度40-45℃；分离釜ii压力6-7mpa，分离釜ii温度30-35℃；分离釜iii压力6-7mpa，分离釜iii温度30-35℃。在优选的实施方式中，所述步骤(d)中所述低温静置为在0-6℃下静置12-24小时。
10、在优选的实施方式中，所述表达促进剂的使用浓度至少为0.002mg/ml，优选地为0.01-0.2mg/ml。
11、在优选的实施方式中，所述表达促进剂的促进角质形成细胞中丝聚蛋白基因flg的相对表达量≥240％，优选地为240-435％。
12、在优选的实施方式中，所述垫状卷柏提取物的hplc分析图谱的主要峰的保留时间(峰面积％)为：uv＝254nm：峰1：10.023(2.07)；峰2：13.843(5.25)；峰3：15.361(4.19)；峰4：27.702(6.4)；峰5：31.597(41.2)；峰6：33.802(4.68)；峰7：34.709(15.23)；峰8：34.935(1.4)；峰9：36.619(3.95)；峰10：36.908(7.16)；峰11：37.939(2.49)；峰12：39.707(3.49)；峰13：49.636(2.49)。
13、另一方面，本专利技术还涉及所述表达促进剂在皮肤外用剂中的应用，用于促进角质形成细胞中丝聚蛋白基因flg的表达。
14、在优选的实施方式中，所述皮肤外用剂选自：面霜、乳液、啫喱、化妆水、精华液、面膜、眼霜、气雾清洁泡、喷雾、沐浴露、或洗面奶。
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1.一种角质形成细胞丝聚蛋白基因FLG的表达促进剂，其中，所述表达促进剂是垫状卷柏提取物，所述垫状卷柏提取物中总糖含量≥5.72wt％，总多酚含量≥0.3wt％，和/或总黄酮含量≥1.12wt％。
2.如权利要求1所述的表达促进剂，其中，所述垫状卷柏提取物通过超临界流体萃取法提取得到，所述方法包括以下步骤：
3.如权利要求2所述的表达促进剂，其中，所述步骤(a)包括机械粉碎至20-40目。
4.如权利要求2所述的表达促进剂，其中，所述步骤(b)采用95体积％的乙醇。
5.如权利要求2所述的表达促进剂，其中，所述步骤(c)还包括：CO2流量为75-85L/h，超临界萃取时间约60-120min。
6.如权利要求2所述的表达促进剂，其中，所述步骤(c)还包括：分离釜I压力8-9MPa，分离釜I温度40-45℃；分离釜II压力6-7MPa，分离釜II温度30-35℃；分离釜III压力6-7MPa，分离釜III温度30-35℃。
7.如权利要求2所述的表达促进剂，其中，步骤(d)中所述低温静置为在0-6℃下静置12-
8.如权利要求1所述的表达促进剂，其中，所述表达促进剂的使用浓度至少为0.002mg/ml。
9.如权利要求8所述的表达促进剂，其中，所述表达促进剂的使用浓度为0.01-0.2mg/mL。
10.如权利要求1所述的表达促进剂，其中，所述表达促进剂的促进角质形成细胞中丝聚蛋白基因FLG的相对表达量≥240％。
11.如权利要求10所述的表达促进剂，其中，所述表达促进剂的促进角质形成细胞中丝聚蛋白基因FLG的相对表达量为240-435％。
12.如权利要求11所述的表达促进剂，其中所述垫状卷柏提取物的HPLC分析图谱的主要峰的保留时间和峰面积％包括：UV＝254nm：峰1：10.023，2.07；峰2：13.843，5.25；峰3：15.361，4.19；峰4：27.702，6.4；峰5：31.597，41.2；峰6：33.802，4.68；峰7：34.709，15.23；峰8：34.935，1.4；峰9：36.619，3.95；峰10：36.908，7.16；峰11：37.939，2.49；峰12：39.707，3.49；峰13：49.636，2.49。
13.如权利要求1-12中任一项所述的表达促进剂在皮肤外用剂中的应用，用于促进角质形成细胞中丝聚蛋白基因FLG的表达。
14.如权利要求13所述的应用，其中，所述皮肤外用剂选自：面霜、乳液、啫喱、化妆水、精华液、面膜、眼霜、气雾清洁泡、喷雾、沐浴露、或洗面奶。
...【技术特征摘要】
1.一种角质形成细胞丝聚蛋白基因flg的表达促进剂，其中，所述表达促进剂是垫状卷柏提取物，所述垫状卷柏提取物中总糖含量≥5.72wt％，总多酚含量≥0.3wt％，和/或总黄酮含量≥1.12wt％。
2.如权利要求1所述的表达促进剂，其中，所述垫状卷柏提取物通过超临界流体萃取法提取得到，所述方法包括以下步骤：
3.如权利要求2所述的表达促进剂，其中，所述步骤(a)包括机械粉碎至20-40目。
4.如权利要求2所述的表达促进剂，其中，所述步骤(b)采用95体积％的乙醇。
5.如权利要求2所述的表达促进剂，其中，所述步骤(c)还包括：co2流量为75-85l/h，超临界萃取时间约60-120min。
6.如权利要求2所述的表达促进剂，其中，所述步骤(c)还包括：分离釜i压力8-9mpa，分离釜i温度40-45℃；分离釜ii压力6-7mpa，分离釜ii温度30-35℃；分离釜iii压力6-7mpa，分离釜iii温度30-35℃。
7.如权利要求2所述的表达促进剂，其中，步骤(d)中所述低温静置为在0-6℃下静置12-24小时。
8.如权利要求1所述的表达促进剂，其中，所述表达促进剂的使用浓度至少为0.002mg/ml。
9.如权利要求8所述的表达促进剂，其...
【专利技术属性】
技术研发人员：殷庆飞，陈园园，蒋珍娟，陈志涛，
申请(专利权)人：上海家化联合股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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