【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及紫花杜鹃，具体涉及紫鹃叶提取物及在制备护肝制剂中的应用。
技术介绍
1、紫花杜鹃为杜鹃花科植物紫花杜鹃(rhododen dronmariae hance)干燥叶或带叶嫩枝。味微苦、辛，性微温，具有止咳、祛痰的功效，主要用于治疗慢性支气管炎、咳嗽多痰、气喘、跌打损伤、对口疮等病症。以紫花杜鹃为原料的中成药有紫花杜鹃片、紫花杜鹃胶囊、紫茶颗粒、化痰消咳片、祛痰止咳冲剂等。紫花杜鹃喜凉爽湿润的气候，分布于海拔500～3000m丘陵山区，野生紫花杜鹃广泛分布于我国南方广大地区。
2、紫花杜鹃中的黄酮类化合物是主要有效成分，常用的提取方式有水提、醇提。水提浸膏得率高，但杂质多，有效成分提取量低。对这些成分进行合理利用，并开发更多具有生物活性功能的产品仍然十分必要。
技术实现思路
1、有鉴于此，本专利技术提供了紫鹃叶提取物及在制备护肝制剂中的应用。
2、本专利技术的目的之一提供一种紫花杜鹃酵素粉的制备方法。所述制备方法包括：制备得到紫花杜鹃的醇提物；将所述醇提物上样至大孔树脂层析柱，收集洗脱液，冷冻干燥，得到紫花杜鹃纯化物；制备含所述紫花杜鹃纯化物的种子培养液和发酵培养液；将梅奇酵母、鼠李糖乳杆菌和乳酸乳球菌的种子分别接种至所述种子培养液中进行培养，制得分别含有梅奇酵母、鼠李糖乳杆菌和乳酸乳球菌的种子液；将梅奇酵母、鼠李糖乳杆菌和乳酸乳球菌的种子液混合接种至所述发酵培养液中进行发酵，制得含有梅奇酵母、鼠李糖乳杆菌和乳酸乳球菌的发酵液；收集所述发酵液，超声
3、其中，所述醇提物的制备步骤包括：将紫花杜鹃干燥嫩叶的粗粉加入80.54％的乙醇水溶液中，液料比为12ml/g，每次提取时间为2.2h，共提取3次，合并滤液，旋转蒸发浓缩，冷冻干燥，得到所述醇提物。
4、其中，所述大孔树脂层析柱纯化的步骤具体包括：将所述醇提物用50％的乙醇溶液配制成上样液体，将所述上样液上样至所述大孔树脂层析柱，采用95％乙醇溶液洗脱3个bv，以三氯化铝-醋酸钾显色法测定其中黄铜类化合物含量，收集解吸率不低于15％黄铜类化合物含量的馏分，旋转蒸发浓缩，冷冻干燥，得到紫花杜鹃纯化物。
5、其中，所述种子培养液为包含紫花杜鹃纯化物0.05～2.5wt％的mrs液体培养基。
6、其中，用于扩大培养梅奇酵母的种子培养液为包含紫花杜鹃纯化物1.25wt％的mrs液体培养基，用于扩大培养鼠李糖乳杆菌的种子培养液为包含上述实施例提供的紫花杜鹃纯化物0.75wt％的mrs液体培养基，用于扩大培养乳酸乳球菌得到种子培养液为含上述实施例提供的紫花杜鹃纯化物0.5wt％以及10v/v％牛奶的mrs液体培养基。
7、其中，所述发酵培养液为包含所述紫花杜鹃纯化物0.02～1.25wt％、6～10v/v％牛奶、0.5～2.5wt％葡萄糖的mrs液体培养基。
8、其中，所述发酵培养液为包含所述紫花杜鹃纯化物0.75wt％、8v/v％牛奶、2wt％葡萄糖的mrs液体培养基。
9、本专利技术的目的之一提供根据所述制备方法制得的紫花杜鹃酵素粉。所述紫花杜鹃酵素粉包含杨梅素-3-o-β-d-葡萄糖苷0.00125wt％、金丝桃苷0.00089wt％、异槲皮苷0.00235wt％、广寄生苷0.00145wt％、槲皮苷0.00126wt％、槲皮素0.00142wt％、芸香苷0.00343wt％、山柰酚0.00512wt％、齐墩果酸0.0402wt％、杜鹃素0.0285wt％、梅奇酵母162×108cfu/g、鼠李糖乳杆菌345×108cfu/g和乳酸乳球菌205×108cfu/g。
10、本专利技术的目的之一提供根据所述的制备方法制得的紫花杜鹃酵素粉的应用。所述应用包括：制备保健、预防或治疗非酒精性脂肪肝炎的药物或保健品；制备保健、预防或治疗非酒精性肝功能受损的药物或保健品；制备保健、预防或治疗非酒精性肝脂质代谢紊乱的药物或保健品；制备保健、预防或治疗非酒精性肝内氧化应激的药物或保健品；制备保健、预防或治疗非酒精性肝炎症反应的药物或保健品；制备保健、预防或治疗非酒精性肝纤维化的药物或保健品。
11、有益效果：
12、本专利技术从紫花杜鹃叶中得到纯化物，并将该纯化物作为原料，利用梅奇酵母、鼠李糖乳杆菌和乳酸乳球菌进行发酵，制得了一种紫花杜鹃酵素粉。该紫花杜鹃酵素粉不仅含有梅奇酵母、鼠李糖乳杆菌和乳酸乳球菌的活菌粉，还含有多种活性物质。通过对该紫花杜鹃酵素粉分析发现，其无细胞毒性，并且抗氧化能力和adh激活作用。另外，将该紫花杜鹃酵素粉干预非酒精性脂肪性肝炎的模型小鼠，结果该模型小鼠的肝脂肪变性、炎症细胞浸润和胶原纤维增生均有所改善。进一步分析发现，该紫花杜鹃酵素粉能够调节小鼠肝脏肝脂质合成和氧化相关基因、炎症因子基因、组织纤维化标志物基因的表达，小鼠的非酒精性肝功能受损、脂质代谢紊乱、肝内氧化应激、炎症反应和纤维化指标均明显逆转，表明本专利技术提供的酵素粉对高脂肪所致的非酒精性脂肪肝具有显著改善效果。
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1.紫花杜鹃酵素粉的制备方法，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述醇提物的制备步骤包括：
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述大孔树脂层析柱纯化的步骤具体包括：
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述种子培养液为包含紫花杜鹃纯化物0.05～2.5wt％的MRS液体培养基。
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，用于扩大培养梅奇酵母的种子培养液为包含紫花杜鹃纯化物1.25wt％的MRS液体培养基，用于扩大培养鼠李糖乳杆菌的种子培养液为包含上述实施例提供的紫花杜鹃纯化物0.75wt％的MRS液体培养基，用于扩大培养乳酸乳球菌得到种子培养液为含上述实施例提供的紫花杜鹃纯化物0.5wt％以及10v/v％牛奶的MRS液体培养基。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述发酵培养液为包含所述紫花杜鹃纯化物0.02～1.25wt％、6～10v/v％牛奶、0.5～2.5wt％葡萄糖的MRS液体培养基。
7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，
8.根据权利要求1～7任一所述的制备方法制得的紫花杜鹃酵素粉，其特征在于，所述紫花杜鹃酵素粉包含杨梅素-3-O-β-D-葡萄糖苷0.00125wt％、金丝桃苷0.00089wt％、异槲皮苷0.00235wt％、广寄生苷0.00145wt％、槲皮苷0.00126wt％、槲皮素0.00142wt％、芸香苷0.00343wt％、山柰酚0.00512wt％、齐墩果酸0.0402wt％、杜鹃素0.0285wt％、梅奇酵母162×108CFU/g、鼠李糖乳杆菌345×108CFU/g和乳酸乳球菌205×108CFU/g。
9.根据权利要求1～7任一所述的制备方法制得的紫花杜鹃酵素粉的应用，所述应用包括：
...【技术特征摘要】
1.紫花杜鹃酵素粉的制备方法，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述醇提物的制备步骤包括：
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述大孔树脂层析柱纯化的步骤具体包括：
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述种子培养液为包含紫花杜鹃纯化物0.05～2.5wt％的mrs液体培养基。
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，用于扩大培养梅奇酵母的种子培养液为包含紫花杜鹃纯化物1.25wt％的mrs液体培养基，用于扩大培养鼠李糖乳杆菌的种子培养液为包含上述实施例提供的紫花杜鹃纯化物0.75wt％的mrs液体培养基，用于扩大培养乳酸乳球菌得到种子培养液为含上述实施例提供的紫花杜鹃纯化物0.5wt％以及10v/v％牛奶的mrs液体培养基。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述发酵培养液为包含所述紫花杜鹃纯化物0.02～1.25wt...
【专利技术属性】
技术研发人员：梁璐，薛爽，郭晓明，孟盈盈，陈烨，
申请(专利权)人：湖北省医药工业研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：
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