【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物诊断试剂领域，具体涉及一种葡萄糖氧化酶法检测试剂盒及其制备方法。
技术介绍
1、葡萄糖是血液中最重要的单糖。血中的葡萄糖称为血糖(glu)。葡萄糖是人体的重要组成成分，也是能量的重要来源。正常人体每天需要很多的糖来提供能量，为各种组织、脏器的正常运作提供动力。所以血糖必须保持一定的水平才能维持体内各器官和组织的需要。正常人血糖的产生和利用处于动态平衡的状态，维持在一个相对稳定的水平。葡萄糖以糖酵解的形式降解。检测葡萄糖的浓度用于对糖代谢紊乱(糖尿病、婴儿性低糖血症、自发性低糖血症以及胰岛细胞癌)的诊断及治疗。
2、现有技术中检测血糖的主要方法为葡萄糖氧化酶法与己糖激酶法两种。葡萄糖氧化酶法精确度更高，能够精确特异测量生物样品中葡萄糖浓度，是世界卫生组织推荐也是中国《全国临床检验操作规程指定的临床血糖检测方法》，葡萄糖氧化酶法试剂盒的主要反应原理大都基于trinder反应模式，具体反应过程原理如下：血清中的葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化下与水分子和氧分子反应生成葡萄糖酸和双氧水，最后双氧水在过氧化物酶的催化下与色原底物4-氨基安替比林和苯酚反应生成红色化合物醌亚胺。由于醌亚胺在波长500nm处有吸收峰,所以在一定底物浓度范围内500nm处吸光度的变化值与样本中葡萄糖的含量成正比。
3、氧化酶法测葡萄糖特异性高于己糖激酶法，但氧化酶法容易受溶液中氧含量变化的干扰，高浓度样本线性做不好，导致高浓度样本可能测试不准确，影响临床判定。因此，需要调整葡萄糖氧化酶法试剂盒的组分，使得其在高浓度反应时仍能准
技术实现思路
1、为克服现有技术缺陷，本专利技术采用了以下技术方案：
2、本专利技术的第一方面提供了一种葡萄糖氧化酶法检测试剂盒，包括以下组分：试剂r1和试剂r2；其中，所述试剂r1包含：缓冲液，过氧化物酶，苯酚或类似物，防腐剂，有机溶剂1，有机溶剂2；所述r2试剂包含：缓冲液，葡萄糖氧化酶，4-氨基安替比林，防腐剂；
3、进一步的，所述缓冲液为磷酸盐缓冲液，其ph为6.5～7.5；进一步优选的，所述缓冲液浓度为40～60mmol/l；
4、进一步的，过氧化物酶占所述试剂盒浓度1ku/l～10ku/l；
5、进一步的，所述苯酚或类似物选自苯酚、对氯苯酚、2-羟基-3-间甲苯胺丙磺酸钠、n-乙基-n-(3-磺丙基)-3-甲基苯胺钠盐、n-乙基-n-(3-磺丙基)-3-甲氧基苯胺钠盐、n-乙基-n-(2-羟基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺钠盐、n-乙基-n-(3-磺丙基)苯胺钠盐、n,n-双(4-磺丁基)-3-甲基苯胺二钠盐、n-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲氧基苯胺钠盐中的任意一种或几种；进一步优选的，所述苯酚或类似物浓度为3～6mmol/l；
6、进一步的，所述防腐剂为叠氮钠(nan3)；进一步优选的，所述防腐剂占所述试剂盒质量百分含量的0.1～1.0％；
7、进一步的，所述有机溶剂1为n,n-二甲基甲酰胺；进一步优选的，所述有机溶剂1其占所述试剂盒质量百分含量的3～15％；
8、进一步的，所述有机溶剂2所述有机溶剂2选自二氧六环、丙酮、甲醇中的任意一种或几种；进一步优选的，所述有机溶剂2占试剂盒质量百分含量的2～10％；
9、进一步的，所述葡萄糖氧化酶占所述试剂盒浓度的100～150ku/l；
10、进一步的，所述4-氨基安替比林占所述试剂盒浓度的1～10mmol/l；
11、本专利技术的第二方面提供了上述任一种葡萄糖氧化酶法检测试剂盒的制备方法，包括以下步骤：按上述配比将各组份精确量取后充分混合均匀后，即得。
12、有益效果
13、1.本专利技术通过在溶液中添加特定的有机溶剂1(n,n-二甲基甲酰胺)与有机溶剂2(二氧六环、丙酮、甲醇等)组合，能增加溶液中溶解氧含量使高浓度样本在检测时不会出现底物耗尽的情况导致反应曲线呈下降趋势，能有效消除溶解氧含量变化对高浓度葡萄糖样本检测的影响使化学反应能持续发生，提高葡萄糖氧化酶法试剂盒线性，真实反应出病人血清样本中葡萄糖含量，反应原理如下：
14、葡萄糖+o2+h2o+葡萄糖氧化酶→葡萄糖酸+h2o2
15、h2o2+苯酚+4-氨基安替比林+过氧化物酶→醌亚胺+h2o；
16、2.本专利技术的制备原料及制备工艺简单，利于实施和工业化生产，能够准确检测血糖浓度，有利于糖代谢紊乱、糖尿病、婴儿性低糖血症、自发性低糖血症以及胰岛细胞癌的诊断及治疗，具有良好的市场应用前景。
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1.一种葡萄糖氧化酶法检测试剂盒，其特征在于，包括以下组分：试剂R1和试剂R2；其中，所述试剂R1包含：缓冲液，过氧化物酶，苯酚或类似物，防腐剂，有机溶剂1，有机溶剂2；所述R2试剂包含：缓冲液，葡萄糖氧化酶，4-氨基安替比林，防腐剂。
2.根据权利要求1所述葡萄糖氧化酶法检测试剂盒，其特征在于，所述缓冲液为磷酸盐缓冲液，其pH为6.5～7.5；进一步优选的，所述缓冲液浓度为40～60mmol/L。
3.根据权利要求1所述葡萄糖氧化酶法检测试剂盒，其特征在于，试剂R1中，所述过氧化物酶占所述试剂盒浓度1KU/L～10KU/L。
4.根据权利要求1所述葡萄糖氧化酶法检测试剂盒，其特征在于，试剂R1中，所述苯酚或类似物选自苯酚、对氯苯酚、2-羟基-3-间甲苯胺丙磺酸钠、N-乙基-N-(3-磺丙基)-3-甲基苯胺钠盐、N-乙基-N-(3-磺丙基)-3-甲氧基苯胺钠盐、N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺钠盐、N-乙基-N-(3-磺丙基)苯胺钠盐、N,N-双(4-磺丁基)-3-甲基苯胺二钠盐、N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲氧
5.根据权利要求1所述葡萄糖氧化酶法检测试剂盒，其特征在于，所述防腐剂为叠氮钠(NaN3)；进一步优选的，所述防腐剂占所述试剂盒质量百分含量的0.1～1.0％。
6.根据权利要求1所述葡萄糖氧化酶法检测试剂盒，其特征在于，试剂R1中，所述有机溶剂1为N,N-二甲基甲酰胺；进一步优选的，所述有机溶剂1占所述试剂盒质量百分含量的3～15％。
7.根据权利要求1所述葡萄糖氧化酶法检测试剂盒，其特征在于，试剂R1中，所述有机溶剂2选自二氧六环、丙酮、甲醇中的任意一种或几种；进一步优选的，所述有机溶剂2占所述试剂盒质量百分含量的2～10％。
8.根据权利要求1所述葡萄糖氧化酶法检测试剂盒，其特征在于，试剂R2中，所述葡萄糖氧化酶占所述试剂盒浓度的100～150KU/L。
9.根据权利要求1所述葡萄糖氧化酶法检测试剂盒，其特征在于，试剂R2中，所述4-氨基安替比林占所述试剂盒浓度的1～10mmol/L。
10.一种权利要求1～9任一项葡萄糖氧化酶法检测试剂盒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：按上述配比将各组份精确量取后充分混合均匀后，即得。
...【技术特征摘要】
1.一种葡萄糖氧化酶法检测试剂盒，其特征在于，包括以下组分：试剂r1和试剂r2；其中，所述试剂r1包含：缓冲液，过氧化物酶，苯酚或类似物，防腐剂，有机溶剂1，有机溶剂2；所述r2试剂包含：缓冲液，葡萄糖氧化酶，4-氨基安替比林，防腐剂。
2.根据权利要求1所述葡萄糖氧化酶法检测试剂盒，其特征在于，所述缓冲液为磷酸盐缓冲液，其ph为6.5～7.5；进一步优选的，所述缓冲液浓度为40～60mmol/l。
3.根据权利要求1所述葡萄糖氧化酶法检测试剂盒，其特征在于，试剂r1中，所述过氧化物酶占所述试剂盒浓度1ku/l～10ku/l。
4.根据权利要求1所述葡萄糖氧化酶法检测试剂盒，其特征在于，试剂r1中，所述苯酚或类似物选自苯酚、对氯苯酚、2-羟基-3-间甲苯胺丙磺酸钠、n-乙基-n-(3-磺丙基)-3-甲基苯胺钠盐、n-乙基-n-(3-磺丙基)-3-甲氧基苯胺钠盐、n-乙基-n-(2-羟基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺钠盐、n-乙基-n-(3-磺丙基)苯胺钠盐、n,n-双(4-磺丁基)-3-甲基苯胺二钠盐、n-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲氧基苯胺钠盐中的任意一种或几种；进一步优选的，所述苯酚或类...
【专利技术属性】
技术研发人员：曹晨晓，冯莹莹，
申请(专利权)人：上海科华生物工程股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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