【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于药物检测，具体涉及一种聚山梨酯80的检测方法及其应用，尤其涉及一种准确的聚山梨酯80的检测方法及其应用。
技术介绍
1、聚山梨酯80(polysorbate 80)，别名吐温80(tween 80)，系油酸山梨坦和环氧乙烷聚合而成的聚氧乙烯20油酸山梨坦。为淡黄色至橙黄色的粘稠液体；在水、乙醇、甲醇或乙酸乙酯中易溶，在矿物油中极微溶解。液体制剂中常用的一种表面活性剂，为油水型乳化剂，可用作稳定剂、扩散剂、抗静电剂、纤维润滑剂等，常作为药物制剂原料使用，因吐温80注射到人体内具有一定的溶血性、致敏性、肝毒性以及外周神经毒性等，应当准确检验注射剂中吐温80的含量，故方法学验证中回收率指标范围需在98％-102％之间。
2、聚山梨酯80是不均匀的混合物，且无强发色基因。目前聚山梨酯80定量检测方法中主要有色谱法和光谱法两大类。常用的色谱法为蒸发光散射检测器(elsd)的高效液相色谱法，但elsd的高效液相色谱法难以利用梯度洗脱系统使聚山梨酯80形成一个单一的色谱峰。光谱法采用的是比色法，依据聚山梨酯80中的聚乙氧基和铵钴硫氰酸盐反应形成蓝色复合物，其蓝色复合物溶于二氯甲烷，可用比色法测定聚山梨酯80的含量。比色法因对设备要求低，操作简单而被广泛使用。但比色法也存在相应的缺陷，首先现有的比色法如需测定蛋白样品则需使用空气吹扫法进行浓缩，使操作难度加大，其次现有比色法的操作过程为在室温下反应并每15-30min震荡一次，且需同时加入硫氰钴铵溶液和二氯甲烷溶液，而二氯甲烷为易挥发的有机溶剂，在频繁的震荡过程中很容易
技术实现思路
1、针对现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种聚山梨酯80的检测方法及其应用，尤其提供一种准确的聚山梨酯80的检测方法及其应用。本专利技术提供的检测方法无需进行空气吹扫，减少了操作难度，整体方法操作简单，检测准确度高、重复性好。
2、为达到此专利技术目的，本专利技术采用以下技术方案：
3、一方面，本专利技术提供了一种聚山梨酯80的检测方法，所述检测方法包括以下步骤：
4、将待测样品与氯化铵混合离心，接着取上清液与硫氰钴铵溶液混合反应，之后与有机溶剂混合静置，取有机相进行吸光度检测，根据检测结果结合标准曲线计算得到待测样品中聚山梨酯80的含量。
5、所述待测样品为蛋白样品。
6、上述方法无需进行空气吹扫，减少了操作难度，整体方法操作简单，检测准确度高、重复性好；并通过采用特定处理试剂，相比常规方法更加准确。
7、优选地，所述待测样品以液体形式与氯化铵混合。
8、优选地，所述氯化铵与待测样品的料液比为0.2-0.372g/ml，例如0.2g/ml、0.25g/ml、0.3g/ml、0.35g/ml或0.372g/ml等，但不限于以上所列举的数值，上述数值范围内其他未列举的数值同样适用。
9、优选地，所述离心的速率为2500-3500rpm，时间为8-12min，其中速率可以是2500rpm、2600rpm、2700rpm、2800rpm、2900rpm、3000rpm、3100rpm、3200rpm、3300rpm、3400rpm或3500rpm等，时间可以是8min、9min、10min、11min或12min等，但不限于以上所列举的数值，上述数值范围内其他未列举的数值同样适用。
10、优选地，所述硫氰钴铵溶液由硝酸钴和硫氰酸铵配制得到，硝酸钴的浓度为5-10g/ml，硫氰酸铵的浓度为30-50g/ml，其中，硝酸钴的浓度可以是5g/ml、6g/ml、7g/ml、8g/ml、9g/ml或10g/ml等，硫氰酸铵的浓度可以是30g/ml、32g/ml、34g/ml、36g/ml、38g/ml、40g/ml、42g/ml、44g/ml、46g/ml、48g/ml或50g/ml等，但不限于以上所列举的数值，上述数值范围内其他未列举的数值同样适用。
11、优选地，所述上清液与硫氰钴铵溶液的体积比为1:(2-3)，例如1:2、1:2.2、1:2.4、1:2.6、1:2.8或1:3等，但不限于以上所列举的数值，上述数值范围内其他未列举的数值同样适用。
12、优选地，所述混合反应的温度为55-65℃，时间为1-2h，其中温度可以是55℃、56℃、57℃、58℃、59℃、60℃、61℃、62℃、63℃、64℃或65℃等，时间可以是1h、1.1h、1.2h、1.3h、1.4h、1.5h、1.6h、1.7h、1.8h、1.9h或2h等，但不限于以上所列举的数值，上述数值范围内其他未列举的数值同样适用。
13、优选地，所述有机溶剂为二氯甲烷。
14、优选地，所述静置的时间不低于25min，例如25min、30min、35min、40min、45min、50min、55min或60min等，但不限于以上所列举的数值，上述数值范围内其他未列举的数值同样适用。
15、另一方面，本专利技术还提供了如上所述的检测方法在药品质量控制中的应用。
16、与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：
17、本专利技术提供了一种聚山梨酯80的检测方法，其无需进行空气吹扫，减少了操作难度，整体方法操作简单，检测准确度高、重复性好；并通过采用特定处理试剂，相比常规方法更加准确；同时控制特定处理参数条件，能够有效提高检测准确度。
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1.一种聚山梨酯80的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述待测样品以液体形式与氯化铵混合。
3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述氯化铵与待测样品的料液比为0.2-0.372g/mL。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的检测方法，其特征在于，所述离心的速率为2500-3500rpm，时间为8-12min。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的检测方法，其特征在于，所述硫氰钴铵溶液中，硝酸钴的浓度为5-10g/mL，硫氰酸铵的浓度为30-50g/mL。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的检测方法，其特征在于，所述上清液与硫氰钴铵溶液的体积比为1:(2-3)。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的检测方法，其特征在于，所述混合反应的温度为55-65℃，时间为1-2h。
8.根据权利要求1-7中任一项所述的检测方法，其特征在于，所述有机溶剂为二氯甲烷。
9.根据权利要求1-8中任一项所述的检测方法，其特征在于，所
10.一种根据权利要求1-9中任一项所述的检测方法在药品质量控制中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种聚山梨酯80的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述待测样品以液体形式与氯化铵混合。
3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述氯化铵与待测样品的料液比为0.2-0.372g/ml。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的检测方法，其特征在于，所述离心的速率为2500-3500rpm，时间为8-12min。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的检测方法，其特征在于，所述硫氰钴铵溶液中，硝酸钴的浓度为5-10g/ml，硫氰酸铵的浓...
【专利技术属性】
技术研发人员：张静，王瑞玲，王建刚，吴明远，
申请(专利权)人：康立泰生物医药青岛有限公司，
类型：发明
国别省市：
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