含有去A肽纤维蛋白的恶性肿瘤抑制剂制造技术

本发明专利技术提供一种含有去Ａ肽纤维蛋白的恶性肿瘤抑制剂，它通过抑制恶性肿瘤细胞的伸展和游走，从而能抑制恶性肿瘤。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及以含有去A肽纤维蛋白为特征的恶性肿瘤抑制剂。
技术介绍
近年来，由于外科手术、放疗或化疗的应用去除原发癌的成功率得到提高，从而恶性肿瘤的治疗取得了稳步的进展。但是，即使是完全去除了原发癌，因癌的转移引发死亡的情况也并不少见。特别是黑色素瘤、肺癌、肝癌和胰腺癌等恶性程度高的恶性肿瘤很难在早期发现，当被诊断为恶性肿瘤时，原发癌和转移癌已经同时存在，导致无法接受手术治疗的病例很多。对于这些恶性肿瘤，放疗的效果也不好。而且，目前的实际情况是临床上使用的阿霉素等化疗制剂几乎都是通过直接攻击恶性肿瘤细胞而发挥药效，在其攻击肿瘤细胞的同时也攻击正常细胞，出现强的副作用，因此成为临床应用中的难题。所以，这几十年来，没有突破性的新药出现。为了打破这一局面，亟待新型的、用于恶性肿瘤的药品出现。在这种背景下，最近，很多基础研究和临床研究结果表明，恶性肿瘤与凝血纤溶系统有密切的关系。例如，已知恶性肿瘤患者由于血浆纤维蛋白原增加、血浆粘度增加以及血液流变学的异常等凝血纤溶系统的异常引起微循环障碍。另外，有报道认为由于血浆纤维蛋白原的增加或恶性肿瘤细胞本身分泌纤维蛋白原，恶性肿瘤组织的细胞外基质中发生纤维蛋白原或纤维蛋白沉积，其作为细胞外基质的一员对恶性肿瘤细胞的增殖、浸润和转移起促进作用(参照例如Cancer Researh602033-2039(2000)，Ann N Y Acad Sci 936406-425(2001)以及Blood963302-3309(2000))。鉴于上述恶性肿瘤与凝血纤溶系统的关系，在体外用纤维蛋白处理恶性肿瘤细胞，发现恶性肿瘤细胞向肺脏的实验性转移增强(参照例如Clin Exp Metastasis17723-730(1999))。纤维蛋白(又称为去AB肽纤维蛋白或纤维蛋白II)是凝血酶作用于纤维蛋白原，使纤维蛋白肽A(fibrinopeptide A，以下称为FPA)和纤维蛋白肽B(fibrinopeptide B，以下称为FPB)从纤维蛋白原游离而得到的物质(参照例如Nature 275501-505(1978)和Biochemistry 354417-4426(1996))。另外，鉴于血中纤维蛋白原浓度与恶性肿瘤增殖和转移的关系，有报道认为使用具有降低纤维蛋白原作用的类凝血酶——巴曲酶(Batroxobin)或安克洛酶(Ancrod)可使纤维蛋白原减少，从而抑制恶性肿瘤的增殖和转移(参照例如Eur J Cancer 16919-923(1980)和日本血液学会杂志44739-743(1981))。巴曲酶是来源于矛头蝮蛇(Bothrops atrox)moojeni亚种毒液的丝氨酸蛋白酶类的类凝血酶，仅使FPA从纤维蛋白原游离，产生去A肽纤维蛋白(也称为纤维蛋白I)的糖蛋白酶(参照例如Thromb Haemost 369-13(1976)和ThrombDiath Haemorrh 45(Suppl)63-68(1971)。这些文献公开的技术是，基于纤维蛋白原作为屏障起保护肿瘤细胞的作用，而不受免疫系统攻击的推定，认为类凝血酶通过减少纤维蛋白原，从而使免疫系统易于对恶性肿瘤细胞进行攻击，结果使恶性肿瘤的增殖和转移得到抑制。另一方面，已知恶性肿瘤细胞具有伸展(spreading)和游走(migration)的特性。在此，恶性肿瘤细胞的伸展是指肿瘤细胞接受某种信号后，圆形的肿瘤细胞形成伪足的现象，其为肿瘤细胞的一种生物学行为，是肿瘤增殖、浸润和转移的基础。另外，恶性肿瘤细胞的游走是指肿瘤细胞接受某种信号，细胞膜上的细胞粘附分子与配体之间产生不断的结合和解离，肿瘤细胞从原来的位置移动的现象，这是作为肿瘤浸润和转移基础的生物学行为。因此，通过抑制恶性肿瘤细胞的伸展和游走，来抑制肿瘤的浸润和转移，由此可抑制恶性肿瘤。但是，有关通过该机理有效抑制恶性肿瘤的药物并没有报道。另外，也没有关于纤维蛋白原的分解产物去A肽纤维蛋白与恶性肿瘤细胞的伸展和游走的相关性报道。
技术实现思路
因此，本专利技术的目的在于提供一种恶性肿瘤抑制剂，作为恶性肿瘤抑制剂其含有新的有效成分。为了解决上述课题，本专利技术人考虑到去A肽纤维蛋白对恶性肿瘤细胞具有与纤维蛋白不同的作用，深入研究了去A肽纤维蛋白对恶性肿瘤细胞的伸展和游走的影响，发现去A肽纤维蛋白具有抑制恶性肿瘤细胞伸展和游走的作用。本专利技术是基于这一发现完成的。即，本专利技术涉及以含有去A肽纤维蛋白为特征的恶性肿瘤抑制剂。附图说明图1纤维蛋白原、去A肽纤维蛋白以及纤维蛋白的电泳照片。图2将图1的电泳图用图像分析系统定量化的曲线图。图3在用PBS(A)、纤维蛋白原(B)、巴曲酶(C)、凝血酶(D)、去A肽纤维蛋白(E)和纤维蛋白(F)处理的孔中培养的黑色素瘤细胞的显微照片。图4在用PBS(A)、纤维蛋白原(B)、巴曲酶(C)、凝血酶(D)、去A肽纤维蛋白(E)和纤维蛋白(F)处理的孔中培养的黑色素瘤细胞的伸展率的直方图。图5在用PBS(A)、纤维蛋白原(B)、巴曲酶(C)、凝血酶(D)、去A肽纤维蛋白(E)和纤维蛋白(F)处理的孔中培养的乳癌细胞的显微照片。图6在用PBS(A)、纤维蛋白原(B)、巴曲酶(C)、凝血酶(D)、去A肽纤维蛋白(E)和纤维蛋白(F)处理的孔中培养的乳癌细胞的伸展率的直方图。图7在用PBS(A)、纤维蛋白原(B)、巴曲酶(C)、凝血酶(D)、去A肽纤维蛋白(E)和纤维蛋白(F)处理的孔中培养的纤维肉瘤细胞的显微照片。图8在用PBS(A)、纤维蛋白原(B)、巴曲酶(C)、凝血酶(D)、去A肽纤维蛋白(E)和纤维蛋白(F)处理的孔中培养的纤维肉瘤细胞的伸展率的直方图。图9去A肽纤维蛋白对黑色素瘤细胞伸展的影响的曲线图。具体实施例方式以下详细说明本专利技术。本专利技术的恶性肿瘤抑制剂的特征在于含有去A肽纤维蛋白作为有效成分。去A肽纤维蛋白是使FPA从纤维蛋白原游离后得到的物质。纤维蛋白原是通过二硫键(S-S)将下述的2个亚单位(AαBβγ)结合起来所形成的2倍体糖蛋白(AαBβγ)2。其中每个所述的亚单位包含通过二硫键结合的称为Aα链、Bβ链和γ链的3种链。因Aα链含有610个氨基酸(68kDa)、Bβ链含有461个氨基酸(54KDa)、γ链含有411个氨基酸(48kDa)，所以纤维蛋白原的分子量为340kDa(参照Thromb Res 831-75(1996)以及Blood Coagulation，Fibrinolysisand Kinin，Aoki A and Iwanaga S(Eds)Chugi Igaku Co.，Tokyo，1979，p59-71)。另外，还已知在Bβ链和γ链上有糖结合，而在Aα链上没有(参照Int J Biochem & Cell Biol 31741-746(1999))。FPA是相当于从纤维蛋白原的Aα链的NH2末端起的16个氨基酸(NH2-Ala-Asp-Ser-Gly-Glu-Gly-Asp-Phe-Leu-Ala-Glu-Gly-Gly-Gly-Val-Arg)组成的肽。因此，去A肽纤维蛋白是使FPA从纤维蛋白原游离后得到的剩余部分(参照Thromb Haemost 369-13(1976)和Thro本文档来自技高网...

【技术保护点】
恶性肿瘤抑制剂，其特征在于所述抑制剂含有去Ａ肽纤维蛋白。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：千贺博文，李彩霞，万永玲，常立水，
申请(专利权)人：东菱药品工业株式会社，
类型：发明
国别省市：JP[日本]