【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医学，尤其涉及检测n-糖基化修饰蛋白质的试剂在制备肝癌诊断产品中的应用。
技术介绍
1、血小板是哺乳动物血液重要组成部分，其是由骨髓和肺微环境中的巨核细胞脱落形成的小型无核细胞结构。血小板的主要功能是调节止血和血栓形成等生理过程，此外血小板参与了炎症、衰老、微生物感染和防御以及癌症的进展和转移等生理病理过程。抗血小板药物目前被广泛用于例如动脉粥样硬化等动脉血栓性疾病中。部分靶向于血小板受体、干扰血小板颗粒释放以及血小板特异性酶的药物可以提高癌症患者的生存期。大规模人群研究发现外周血的血小板计数(platelet count，plc)与死亡率呈u型相关，并且与未来癌症发生相关。一项巢式病例对照研究表明，plc可以作为某些部位癌症的潜在生物标志物。plc的上升可以预测非小细胞肺癌、接受外科手术切除的结直肠癌患者中，较高的plc与结直肠癌远程转移相关。较高的plc也是潜在的肝癌、骨肉瘤和非小细胞肺癌等癌症转移的预测因子。此外凝血酶原时间(prothrombin time，pt)是一种重要的血小板功能检测指标，pt也可以作为结直肠癌复发、胃癌淋巴结转移以及骨髓瘤预后的标志物。随着蛋白质组学技术的发展成熟，血小板的蛋白质表达受到广泛关注。血小板的蛋白质组学研究发现，血小板蛋白质表达也可以作为多种疾病的潜在生物标志物。f13a1、calr和hspa5等血小板蛋白质是肺癌潜在的新诊断和治疗靶点。血小板蛋白质表达在卵巢癌以及胰头癌的早期诊断也具有研究前景，此外研究发现，血小板的phb、uqcrh、gp1ba和finc等4个蛋白
2、血小板包括外围区、溶胶-凝胶区、细胞器和膜系统，其中血小板的膜表面被糖蛋白(glycoprotein，gp)ib-ix-v复合物、gpvi和整合素αiibβ3(也称为gpiib/iiia)等糖蛋白包裹。这些糖蛋白的n-和o-糖基化修饰调节了血小板的激活、粘附和聚集等功能。由于遗传因素的影响，先天性糖基化障碍(cdg)患者存在n-和o-糖基化的缺陷，这一缺陷导致了cdg患者存在凝血缺陷，具有血栓或出血的倾向。近年来，研究发现血小板表面的糖蛋白可以促进肿瘤的转移。gpvi通过与肿瘤细胞表达的半乳糖凝集素3相互作用促进结肠癌和乳腺癌细胞的转移。整合素和p-选择素通过调节血小板和循环肿瘤细胞(circulating tumorcell，ctc)粘附、促进血小板脱颗粒和释放细胞因子以及上调ctc转移相关基因表达等机制促进肿瘤转移。血小板表面的糖蛋白通过与肿瘤细胞相互作用促进肿瘤的转移，这些糖蛋白可能是干预肿瘤转移的潜在靶点。但是目前，未有与修饰的血小板表面糖蛋白和癌症相关联的报道，修饰的血小板表面糖蛋白是否能用于癌症的诊断是未知的。
技术实现思路
1、为解决上述技术问题，本专利技术提出了检测n-糖基化修饰蛋白质的试剂在制备肝癌诊断产品中的应用，通过检测血液样本中高甘露糖型n-糖基化修饰的co3和/或唾液酸化修饰的itb3的含量，诊断患者是否患有肝癌。
2、为实现上述目的，本专利技术提供了检测n-糖基化修饰蛋白质的试剂在制备肝癌诊断产品中的应用，所述n-糖基化修饰蛋白质包括高甘露糖型n-糖基化修饰的co3和/或唾液酸化修饰的itb3。
3、优选的，所述试剂能够定量检测样本中的高甘露糖型n-糖基化修饰的co3和/或唾液酸化修饰的itb3。
4、优选的，所述样本为血液样本。
5、优选的，所述产品为试剂盒或芯片。
6、本专利技术还提供了一种体外检测n-糖基化修饰蛋白质含量的试剂盒，所述n-糖基化修饰蛋白质包括高甘露糖型n-糖基化修饰的co3和/或唾液酸化修饰的itb3。
7、优选的，所述试剂盒的检测样本为血液样本。
8、与现有技术相比，本专利技术具有如下优点和技术效果：
9、本专利技术发现co3蛋白质水平在肝癌样本中呈现一定上调趋势，而其修饰的高甘露糖型糖链在肝癌病人血小板中整体上调趋势明显，itb3蛋白质水平在肝癌样本中也呈现一定上调趋势，同时其上面修饰的唾液酸化的糖链在肝癌病人血小板中整体上调趋势明显。高甘露糖型修饰的co3在hcc和mlc患者外周血小板中蛋白质的表达水平提高了5倍以上，高甘露糖型修饰的co3作为hcc诊断标志物，其auc值为0.994；唾液酸化修饰的itb3在hcc和mlc患者外周血小板中的表达水平均提高了3.1倍，唾液酸化修饰的itb3作为hcc诊断标志物，其auc值为0.999，本专利技术证明了高甘露糖型修饰的co3和唾液酸化修饰的itb3对于肝癌具有更好的诊断效果，其auc均达到0.99以上。基于蛋白质组和糖蛋白质组系统性分析筛选出的这两个糖型特异的糖蛋白质，在肝癌病人血小板中差异显著，可作区分肝癌与健康人的糖基化标志物。
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1.检测N-糖基化修饰蛋白质的试剂在制备肝癌诊断产品中的应用，其特征在于，所述N-糖基化修饰蛋白质包括高甘露糖型N-糖基化修饰的CO3和/或唾液酸化修饰的ITB3。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述试剂能够定量检测样本中的高甘露糖型N-糖基化修饰的CO3和/或唾液酸化修饰的ITB3。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述样本为血液样本。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品为试剂盒或芯片。
5.一种体外检测N-糖基化修饰蛋白质含量的试剂盒，其特征在于，所述N-糖基化修饰蛋白质包括高甘露糖型N-糖基化修饰的CO3和/或唾液酸化修饰的ITB3。
6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒的检测样本为血液样本。
【技术特征摘要】
1.检测n-糖基化修饰蛋白质的试剂在制备肝癌诊断产品中的应用，其特征在于，所述n-糖基化修饰蛋白质包括高甘露糖型n-糖基化修饰的co3和/或唾液酸化修饰的itb3。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述试剂能够定量检测样本中的高甘露糖型n-糖基化修饰的co3和/或唾液酸化修饰的itb3。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在...
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