【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于植物生态检测，具体涉及一种植物叶片气孔器形态的取样方法。
技术介绍
1、植物叶片气孔器是链接土壤-植物体-大气的关键装置，为植物生命活动最重要的结构之一，控制着植物的蒸腾作用、光合作用。根据文献“a stomatal safety-efficiencytrade-off constrains responses to leaf dehydration[j]”，henry c,john g p,panr,et，nature communications,2019,10(1):3398(“气孔安全效率的权衡对叶片脱水的响应”[j]，henry c,john g p,pan r,etal.，自然通讯，2019，10(1):3398)记载：由于气孔器的形态特征以及气孔器的开合功能，对植物的生长、生态系统生产力以及全球水循环施加了主要影响。植物学诸多研究领域气孔器观测数据表明，气孔器研究对于全球生态学、植物生理学和进化科学发展正在发挥着中心作用。
2、在全球气候变暖趋势的影响下，极端高温事件频发。森林作为气候环境主要凉源，植被蒸腾和水蒸发受到植物气孔器的调节和控制。而气孔器观察是研究植物生长、耐高温、抗旱节水生理机制必不可少的部分。调查和认识多种森林植物气孔器形态特征成为当今认识植物适应极端高温气候的关键一环。
3、目前，关于植物气孔器观察标本的制作，在教学和科研中普遍采用的常规方法手撕法、电镜扫描法、指甲油法、热熔胶法、固定法等方法。然而，虽然对于植物下表皮的获取已经有不少方法，但这些方法多都或多或
4、最常见的手撕法的缺点有：1、需要手工精细动作，精细度要求高，消耗精力和眼力，很多参试者制作5个标本即劳累疲乏，对于批量植物样本的标本制作耗时耗力难以承受；2、不同物种叶片厚度、下表皮与叶肉细胞粘合度不同，有些薄叶植物物种叶片下表皮撕取带来极大困难，如茶树叶片表皮无法撕取，因此此法仅适用于叶片下表皮与叶肉细胞粘连松散的植物叶片；3、撕下的表皮通常粘有叶肉细胞，影响标本的清晰度和质量；4、此法获得下表皮的大小和部位难以把握，限制了标本的整体性和完整性。
5、热熔胶法的缺点是：操作过程使用的高温溶胶覆膜过程有引发气孔及表皮细胞收缩变形的缺陷，且需要用电只能在实验室内完成操作，不利于实时观察野外气孔器开合行为变化。电镜扫描法的缺点是：需要采用两种以上化学试剂处理至少4小时以上，药剂处理时间长易引发潜在的细胞变形影响数据准确性，电子显微镜成本高，耗时长操作复杂。指甲油法的缺点是：需要等待材料处理至少10分钟以上，成品图像不清晰，要求一定操作技术，且对于形状不规则的组织效果不佳。固定粘胶法的缺点是：同样需要撕下叶片表皮，对胶的质量和涂抹手法要求较高，制片时间较长，而且存在手撕法遭遇相同的制片问题。渗入法的缺点是：需要用到具有挥发性的有毒有害渗入试剂如苯、二甲苯等渗入试剂等，对环境和人体有伤害，避免采用此类方法。
6、综上所述，目前用于观察气孔器的方法，通常存在药剂使用种类多、有毒有害、程序复杂、操作精细程度高、耗时长耗费精力效率低、对仪器设备依赖性强、成本高等缺点，从而影响了对气孔器的批量研究。因此，寻找一种操作简便、用材方便、适用于批量不同种类森林植物叶片气孔器观察方法，是目前亟待解决的技术问题。
技术实现思路
1、针对现有技术存在的问题，本专利技术所要解决的技术问题就是提供一种植物叶片气孔器形态的拓印取样方法，它具有取样速度极快、用材简易、操作简便、节省人力、经济环保、成像清晰准确、标本可观察面积大、不损伤样本，能大批量调查植物物种叶片气孔器形态学特征。
2、为了解决上述技术问题，
3、本专利技术提供的一种植物叶片气孔器形态的拓印取样方法，包括以下步骤：
4、步骤1、采集植物样本叶片
5、野外选取株型健壮、发育正常的植物植株，剪下健康叶片作为样本叶片；或者将叶片剪下后迅速放入faa固定液密封塑料瓶中，淹没样本叶片；
6、步骤2、样本叶片经uv胶拓印制作表皮标本
7、制作上层表皮标本：戴上紫外线防护眼镜，滴1-2滴uv胶于光滑叶片正面并用载玻片覆盖其上，用手指按压，用紫光灯透过载玻片照射uv胶10-15秒固定；将叶片轻轻揭下，确保固定的uv胶体不脱离载玻片，载玻片上的uv胶拓印有叶片表皮图案，作为样本叶片上表皮标本；
8、或/和制作下层表皮标本：将样本叶片翻转，滴1-2滴uv胶于光滑叶片背面，重复制作，得到样本叶片下表皮标本。
9、与现有植物气孔器观察标本的制作方法相比，本专利技术的技术效果有：
10、1、提高了制作的效率：本专利技术从取出样本叶片到标本制作完成，仅需10-30秒钟左右，完成30个标本制作仅需不到一小时。本专利技术不需要实验者手上精细操作，技术人员可以在精力不充沛状态下完成气孔器标本制作工作。与常用方法相比，节省时间85％以上，且节省研究者精力。
11、2、提高了制作的稳定及可靠性：本专利技术制作过程可以在叶片生存时取样，且不需要刮去叶肉细胞从而不会破坏表皮，薄叶植物表皮亦不会发生皱缩等问题，这对气孔器的横径、纵径的影响降至最低，从而保证了标本的准确性和真实性。在显微镜下观察时气孔器形态清晰，无叶肉细胞干扰标本视野，成功率高达98.9％。制片清晰程度高，药剂处理少，细胞基本无变形，数据准确性高等优点。这对于观察气孔器的大小、计算气孔器的密度等重要参数十分有利。
12、3、具有便携性：本专利技术涉及的试剂与工具均轻便、可随身携带，加之取样高效快捷的优点，故无需限于实验室内操作，可在野外现场大量取样。
13、4、具有可重复性：本专利技术制作过程对叶片样本无损害或损害较小，保证了叶片完整性，因此同一样本可反复多次取样，大大降低了操作难度和精细度要求，同时采样样本数量需求随之降低，减少了研究人员野外采样工作量。
14、5、能保证器官完整：本专利技术可应用于叶片上下表皮，面积可以达到叶片90％～100％，覆盖范围大，气孔器形态显示准确稳定，成功率可达98％以上。这对于观察观察气孔器在叶片上的分布等特征十分重要。
15、6、环保无污染：本专利技术所用工具和试剂，数量少，种类少，且均挥发性小、无害、无污染，对环境和操作者健康均友好。
16、7、具有经济实用性：本专利技术涉及的用具和试剂成本较低，紫光灯价格为5-50元，紫外线防护眼镜15-30元，uv胶等耗材成本不超过0.02元/样本，显著降低取样成本。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种植物叶片气孔器形态的拓印取样方法，其特征是，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的植物叶片气孔器形态的拓印取样方法，其特征是：在步骤2之前，还包括对样本叶片预处理：用镊子取出FAA固定液中的样本叶片，室温放置晾干或用纸巾按压吸干液体。
3.根据权利要求2所述的植物叶片气孔器形态的拓印取样方法，其特征是：样本叶片预处理还包括样本叶片去除表皮毛，用医用纱布朝单一方向擦拭被毛，直至被毛脱落；或者，滴1-2滴UV胶于叶片背面并用载玻片覆盖其上，用手指按压并用紫光灯透过载玻片照射UV胶5-10秒固定，再用双面或单面刀片与叶片呈75-90°角按单一方向轻柔刮取叶片正面直至表皮毛脱落。
4.根据权利要求1、2或3所述的植物叶片气孔器形态的拓印取样方法，其特征是：所述的UV胶为单组分光固化改性丙烯酸脂胶，所述紫光灯为波长不小于395nm、功率3-40W的LED紫外灯。
【技术特征摘要】
1.一种植物叶片气孔器形态的拓印取样方法，其特征是，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的植物叶片气孔器形态的拓印取样方法，其特征是：在步骤2之前，还包括对样本叶片预处理：用镊子取出faa固定液中的样本叶片，室温放置晾干或用纸巾按压吸干液体。
3.根据权利要求2所述的植物叶片气孔器形态的拓印取样方法，其特征是：样本叶片预处理还包括样本叶片去除表皮毛，用医用纱布朝单一方向擦拭被...
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。