System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 嵌合FcεRIα链基因、嵌合FcεRIα链蛋白质、细胞、分析用试剂盒、以及分析方法技术_技高网

嵌合FcεRIα链基因、嵌合FcεRIα链蛋白质、细胞、分析用试剂盒、以及分析方法技术

技术编号:40808666 阅读:8 留言:0更新日期:2024-03-28 19:31
本发明专利技术的目的在于提供一种用于提高过敏检查灵敏度的方案。本发明专利技术提供一种包含编码人FcεRIα链中的胞外结构域的第一碱基序列和编码非人动物FcεRIα链中的至少跨膜结构域的第二碱基序列的嵌合FcεRIα链基因。另外,本发明专利技术还提供作为该嵌合FcεRIα链基因的表达产物的嵌合FcεRIα链蛋白质、以及包含该嵌合FcεRIα链基因的非人动物细胞。另外,本发明专利技术还提供包含该细胞的分析用试剂盒、以及使用该细胞的分析方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】

本专利技术涉及一种嵌合fcεriα链基因、嵌合fcεriα链蛋白质、细胞、分析用试剂盒,以及分析方法。更特别地,本专利技术涉及一种用于进行与过敏相关的试验的嵌合fcεriα链基因、嵌合fcεriα链蛋白质、细胞和试剂盒、以及与过敏相关的分析方法。


技术介绍

1、参与过敏反应的ige是血清中极微量存在的抗体。ige与例如肥大细胞及嗜碱性粒细胞等细胞表达的高亲和力ige受体(在本说明书内中,高亲和力ige受体也称为“fcεri”)的α链非常牢固地结合(ka=1010m-1)。fcεri可以包含一条α链、一条β链及γ链的同源二聚体。这些亚基在很多动物物种中只有形成四聚物后才会在细胞膜表面表达,但在人体中已知有不伴随有β链的表达形式。

2、b细胞产生过敏原(抗原)特异性ige之后,ige会随着血流与外周的免疫细胞、特别是肥大细胞及嗜碱性粒细胞表达的fcεri结合,以致敏这些细胞。被ige致敏后的这些细胞暴露于特异抗原后,抗原和ige结合。此时,若1分子的抗原上存在多个ige表位,则通过经由抗原结合多个ige抗体,相应地会“交联”多个fcεri。

3、以fcεri的交联为触发,通过激活例如缔合于受体的胞内结构域的酪氨酸激酶等酶以及接头分子,产生例如钙离子的流入、组胺等化学介质的脱颗粒及脂质化学介质的产生亢进等细胞应答,从而引起即时过敏应答。并且,通过激活某种转录因子,诱导例如细胞因子及趋化因子等基因表达,而这会导致随后的炎症反应。

4、目前,已经提出了多种关于过敏的检查方法。例如,下述专利文献1公开了一种用于检查所述受试物质对于所述受试者是否为过敏原的方法,其包括:在来自受试者的生物样本存在下孵育细胞,所述细胞在细胞膜上具有对人ige具有亲和力的fc受体,并且在可供转录因子结合的增强子的控制下,依次具有启动子及报告基因;使受试物质与所述孵育后的细胞进行接触;以及确认与所述受试物质接触后的细胞中的所述报告基因的表达的增大。

5、现有技术文献

6、专利文献

7、专利文献1:日本特开2011-19467号公报


技术实现思路

1、要求进一步提高过敏检查灵敏度。如果能够提高该灵敏度,将可以用于例如基于患者ige的生物学意义的评价、微量过敏原的检测、以及抗过敏物质的高通量筛选等与各种过敏有关的试验。因而,本专利技术的主要目的在于提高过敏检查的灵敏度、特别是提高ige检测方式的灵敏度。

2、本专利技术提供一种嵌合fcεriα链基因,其包含可以编码人fcεriα链中的胞外结构域的第一碱基序列和可以编码非人动物fcεriα链中的至少跨膜结构域的第二碱基序列。

3、所述第一碱基序列可以包含与序列id no.7的碱基序列具有70%以上的序列同源性的碱基序列。

4、所述第二碱基序列可以包含与序列id no.5的碱基序列具有70%以上的序列同源性的碱基序列。

5、所述第二碱基序列可以进一步包含与序列id no.6的碱基序列具有70%以上的序列同源性的碱基序列。

6、所述嵌合fcεriα链基因可以进一步包含编码用于使基于该基因生成的嵌合fcεriα链在细胞膜上表达的信号序列的第三碱基序列。

7、所述第三碱基序列可以包含与序列id no.2的碱基序列具有70%以上的序列同源性的碱基序列。

8、所述嵌合fcεriα链基因可以具有与序列id no.1的碱基序列具有50%以上的序列同源性的碱基序列。

9、所述非人动物可以为啮齿类的动物。

10、另外,本专利技术还提供一种嵌合fcεriα链蛋白质,所述嵌合fcεriα链蛋白质包含人fcεriα链中的胞外结构域和非人动物fcεriα链中的至少跨膜结构域。

11、所述胞外结构域可以包含与序列id no.14的氨基酸序列具有70%以上的序列同源性的氨基酸序列。

12、所述跨膜结构域可以包含与序列id no.12的氨基酸序列具有70%以上的序列同源性的氨基酸序列。

13、所述嵌合fcεriα链蛋白质可以进一步包含非人动物fcεriα链中的胞内结构域,

14、该胞内结构域可以包含与序列id no.13的氨基酸序列具有70%以上的序列同源性的氨基酸序列。

15、所述嵌合fcεriα链蛋白质可以具有与序列id no.8的氨基酸序列具有70%以上的序列同源性的氨基酸序列。

16、另外,本专利技术还提供一种载体,所述载体包含所述嵌合fcεriα链基因。

17、另外,本专利技术还提供一种所述非人动物的细胞,所述非人动物的细胞包含所述嵌合fcεriα链基因、所述嵌合fcεriα链蛋白质或所述载体。

18、所述细胞可以进一步包含所述非人动物细胞的fcεri的γ链的基因。

19、所述细胞可以形成包含基于所述嵌合fcεriα链基因生成的嵌合fcεriα链和所述细胞的fcεri的γ链的缔合体。

20、所述细胞可以进一步包含通过所述缔合体彼此的交联诱导表达的报告基因。

21、另外,本专利技术还提供一种分析用试剂盒,所述分析用试剂盒包含所述细胞。

22、另外,本专利技术还提供一种分析方法,所述分析方法使用所述细胞。

23、所述分析方法可以包括执行孵育所述细胞的孵育工序、以及分析所述细胞的应答的分析工序。

24、所述孵育工序可以包括在孵育用材料中孵育所述细胞。

25、所述分析工序可以包括基于所述应答进行选自由过敏原性的评价、过敏的有无或风险的评价、针对ige的分析、过敏抑制活性的评价、以及药物筛选组成的组中的至少一项。

26、所述分析工序可以包括进行i型过敏的有无或风险的评价。

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【技术保护点】

1.一种嵌合FcεRIα链基因,其包含编码人FcεRIα链中的胞外结构域的第一碱基序列和编码非人动物FcεRIα链中的至少跨膜结构域的第二碱基序列。

2.如权利要求1所述的嵌合FcεRIα链基因,其中,所述第一碱基序列包含与序列IDNo.7的碱基序列具有70%以上的序列同源性的碱基序列。

3.如权利要求1或2所述的嵌合FcεRIα链基因,其中,所述第二碱基序列至少包含与序列ID No.5的碱基序列具有70%以上的序列同源性的碱基序列。

4.如权利要求1至3中任一项所述的嵌合FcεRIα链基因,其中,所述第二碱基序列进一步包含与序列ID No.6的碱基序列具有70%以上的序列同源性的碱基序列。

5.如权利要求1至4中任一项所述的嵌合FcεRIα链基因,其中,所述嵌合FcεRIα链基因进一步包含编码用于使基于该基因生成的嵌合FcεRIα链在细胞膜上表达的信号序列的第三碱基序列。

6.如权利要求5所述的嵌合FcεRIα链基因,其中,所述第三碱基序列包含与序列IDNo.2的碱基序列具有70%以上的序列同源性的碱基序列。

<p>7.如权利要求1至6中任一项所述的嵌合FcεRIα链基因,其中,所述嵌合FcεRIα链基因具有与序列ID No.1的碱基序列具有50%以上的序列同源性的碱基序列。

8.如权利要求1至7中任一项所述的嵌合FcεRIα链基因,其中,所述非人动物为啮齿类的动物。

9.一种嵌合FcεRIα链蛋白质,其包含人FcεRIα链中的胞外结构域和非人动物FcεRIα链中的至少跨膜结构域。

10.如权利要求9所述的嵌合FcεRIα链蛋白质,其中,所述胞外结构域包含与序列IDNo.14的氨基酸序列具有70%以上的序列同源性的氨基酸序列。

11.如权利要求9或10所述的嵌合FcεRIα链蛋白质,其中,所述跨膜结构域包含与序列ID No.12的氨基酸序列具有70%以上的序列同源性的氨基酸序列。

12.如权利要求9至11中任一项所述的嵌合FcεRIα链蛋白质,其中,所述嵌合FcεRIα链蛋白质进一步包含非人动物FcεRIα链中的胞内结构域,该胞内结构域包含与序列ID No.13的氨基酸序列具有70%以上的序列同源性的氨基酸序列。

13.如权利要求9至12中任一项所述的嵌合FcεRIα链蛋白质,其中,所述嵌合FcεRIα链蛋白质包含与序列ID No.8的氨基酸序列具有70%以上的序列同源性的氨基酸序列。

14.一种载体,其包含权利要求1至8中任一项所述的嵌合FcεRIα链基因。

15.一种所述非人动物的细胞,其包含权利要求1至8中任一项所述的嵌合FcεRIα链基因、权利要求9至13中任一项所述的嵌合FcεRIα链蛋白质或权利要求14所述的载体。

16.如权利要求15所述的细胞,其进一步包含所述非人动物细胞的FcεRI的γ链的基因。

17.如权利要求16所述的细胞,其中,形成包含基于所述嵌合FcεRIα链基因生成的嵌合FcεRIα链和所述细胞的FcεRI的γ链的缔合体。

18.如权利要求17所述的细胞,其进一步包含通过所述缔合体彼此的交联诱导表达的报告基因。

19.一种分析用试剂盒,其包含权利要求15至18中任一项所述的细胞。

20.一种使用权利要求15至18中任一项所述的细胞的分析方法。

21.如权利要求20所述的分析方法,其中,所述分析方法包括执行孵育所述细胞的孵育工序、以及分析所述细胞的应答的分析工序。

22.如权利要求21所述的方法,其中,所述孵育工序包括在孵育用材料中孵育所述细胞。

23.如权利要求21或22所述的方法,其中,所述分析工序包括基于所述应答进行选自由过敏原性的评价、过敏的有无或风险的评价、针对IgE的分析、过敏抑制活性的评价、以及药物筛选组成的组中的至少一项。

24.如权利要求21至23任一项所述的方法,其中,所述分析工序包括进行I型过敏的有无或风险的评价。

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【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

1.一种嵌合fcεriα链基因,其包含编码人fcεriα链中的胞外结构域的第一碱基序列和编码非人动物fcεriα链中的至少跨膜结构域的第二碱基序列。

2.如权利要求1所述的嵌合fcεriα链基因,其中,所述第一碱基序列包含与序列idno.7的碱基序列具有70%以上的序列同源性的碱基序列。

3.如权利要求1或2所述的嵌合fcεriα链基因,其中,所述第二碱基序列至少包含与序列id no.5的碱基序列具有70%以上的序列同源性的碱基序列。

4.如权利要求1至3中任一项所述的嵌合fcεriα链基因,其中,所述第二碱基序列进一步包含与序列id no.6的碱基序列具有70%以上的序列同源性的碱基序列。

5.如权利要求1至4中任一项所述的嵌合fcεriα链基因,其中,所述嵌合fcεriα链基因进一步包含编码用于使基于该基因生成的嵌合fcεriα链在细胞膜上表达的信号序列的第三碱基序列。

6.如权利要求5所述的嵌合fcεriα链基因,其中,所述第三碱基序列包含与序列idno.2的碱基序列具有70%以上的序列同源性的碱基序列。

7.如权利要求1至6中任一项所述的嵌合fcεriα链基因,其中,所述嵌合fcεriα链基因具有与序列id no.1的碱基序列具有50%以上的序列同源性的碱基序列。

8.如权利要求1至7中任一项所述的嵌合fcεriα链基因,其中,所述非人动物为啮齿类的动物。

9.一种嵌合fcεriα链蛋白质,其包含人fcεriα链中的胞外结构域和非人动物fcεriα链中的至少跨膜结构域。

10.如权利要求9所述的嵌合fcεriα链蛋白质,其中,所述胞外结构域包含与序列idno.14的氨基酸序列具有70%以上的序列同源性的氨基酸序列。

11.如权利要求9或10所述的嵌合fcεriα链蛋白质,其中,所述跨膜结构域包含与序列id no.12的氨基酸序列具有70%以上的序列同源性的氨基酸序列。

12.如权...

【专利技术属性】
技术研发人员:中村亮介秋山晴代田所哲熊坂谦一
申请(专利权)人:学校法人帝京平成大学
类型:发明
国别省市:

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