本发明专利技术提供了用于治疗癌症抗原的新型疫苗制剂。该疫苗含有修饰的ＭＡＧＥ－３抗原、ＮＹ－ＥＳＯ－１抗原和佐剂，该佐剂包含皂苷和免疫刺激寡核苷酸。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及新型疫苗制剂，其含有(a)抗原成分，其含有修饰的MAGE-3抗原和NY-ESO-1抗原的组合，或其衍生物，和(b)佐剂。尽管投入了大量的财力和人力资源，但癌症仍然是主要的死亡原因之一。在本领域，描述癌症免疫疗法已经很多年了，包括那些给患者主动接种肿瘤相关抗原的疗法，其旨在提高这些个体中的免疫反应，该免疫反应识别和消灭癌细胞。针对该目的已描述了许多癌症抗原，包括MAGE家族抗原和NY-ESO-1抗原。尽管这些疗法已经研究了很长时间，但实际上仍然需要改进策略以增强对抗原的免疫反应。这类策略包括将肿瘤抗原与有效的疫苗佐剂组合。睾丸癌(CT)抗原是在多种癌症中优势表达的免疫原性蛋白，但其在除了配子形成组织(睾丸)之外的正常组织中并不表达(Kirkin，A等人，Cancer Investigation，2002，20(2)，222-236)。MAGE-3和NY-ESO-1被称为是原型CT抗原。CT抗原的家族也包括NY-ESO-1的成员、PRAME、GAGE家族、PAGE家族、BAGE、XAGE家族、LAGE、SSX家族的成员(其中SSX-1、-2也称为HOM-MEL-40、-4、-5)、SCP-1(也称为HOM-TES-14)、SART-1和SART-3、HOM-TES-85、精子蛋白Sp17、CTp11、TSP50、CT9/BRDT、TRAG-3(紫杉醇抗性相关基因-3)、OY-MS-4MAGE(参见Kirkin A.等人，CancerInvestigation，2002，20(2)，222-236中的表1)。专利技术概述本专利技术涉及新型疫苗制剂，其含有(a)抗原成分，其含有修饰的MAGE-3抗原和NY-ESO-1抗原的组合，或其衍生物，和(b)免疫刺激佐剂，其含有以下成分的一种或多种明矾盐、胆固醇、水包油(oil-in-water)乳剂(O/W乳剂)、水包油乳剂低剂量型(low dose)、免疫刺激寡核苷酸、生育酚、脂质体、皂苷和脂多糖。也提供了通过施用本专利技术的疫苗治疗个体的方法，并且在具体的实施方案中，该疫苗用于治疗黑素瘤、非小细胞肺癌(NSCLC)或膀胱癌。本专利技术的一个方面提供了疫苗组合物，其含有(a)抗原成分，其含有SEQ ID NO1(如本文及WO 99/40188中所述)的MAGE3与截短的蛋白D载体蛋白的融合蛋白(MAGE3-蛋白D 1/3)，NY-ESO-1蛋白抗原，和(b)佐剂组合物，其含有包含胆固醇和QS21的脂质体结构，所述结构结合了包含至少一个未甲基化的寡核苷酸的免疫刺激寡核苷酸。与仅包含一种由肿瘤细胞表达的抗原的疫苗相比，本专利技术的疫苗可以增强癌症疫苗的抗肿瘤作用。该增强的疫苗不但必然具有更大的患者覆盖范围(即，使得可用一种疫苗靶定更多的癌症)，而且使针对靶定的肿瘤发生的免疫反应更好。另外，本专利技术的疫苗可减少肿瘤逃避(evasion)或逃脱(escape)的机会，即使在接种后其中一种抗原的表达减弱了。专利技术详述本专利技术涉及以下成分的具体组合(i)修饰的MAGE蛋白(MAGE3-蛋白D1/3)，如SEQ ID NO1中所示(ii)NY-ESO1基因产物的“免疫原性区域”，例如NY-ESO1蛋白；由包含NY-ESO1的I类(Class I)和/或II类(Class II)表位的蛋白C-末端部分组成或包含所述部分的蛋白、多肽或肽；含有该区域的重叠长肽；和/或特异的CD8肽。(iii)免疫刺激佐剂，其含有以下成分的一种或多种明矾盐、胆固醇、水包油乳剂(O/W乳剂)、水包油乳剂低剂量型、免疫刺激寡核苷酸(如CpG)、生育酚、脂质体、皂苷(如QS21)和脂多糖(如MPL)。适于本专利技术用途的佐剂实例包括含有或由以下成分组成的那些a.CpG；O/W乳剂/3D-MPL/QS21(高剂量)；b.CpG/O/W乳剂低剂量型/3D-MPL/QS21；c.CpG/脂质体/QS21；和d.CpG/3D-MPL/QS21/脂质体；e.包含QS21的ISCOMS；f.含有QS21和QS7的ISCOMS在一个实施方案中，佐剂为CpG/MPL/QS21/脂质体。成分(i)和(ii)可与成分(iii)共同配制以便伴随施用，或每一种单独与成分(iii)一起配制以便伴随施用或顺序施用。在本专利技术的一个实施方案中，成分(i)与含有CpG/MPL/QS21/脂质体的佐剂成分(iii)一起配制，且成分(ii)与含有ISCOMS(如包含QS21的ISCOMS或含有QS21和QS7的ISCOMS)的佐剂成分(iii)一起配制。因此，成分(i)和(ii)提供用于伴随施用或顺序施用。成分(i)和(ii)可表达为单独的成分，或表达为融合蛋白。还可以考虑DNA/病毒载体的疫苗，其中疫苗含有编码成分(i)和(ii)的核酸，而成分(iii)为DNA疫苗的合适佐剂。疫苗组合物包括MAGE-3衍生抗原。在本专利技术的一个实施方案中，衍生物是包含了连接到异源配偶体上的MAGE-3抗原的融合蛋白。蛋白可被化学缀合，或表达为重组的融合蛋白，从而相比于非融合蛋白允许在表达系统中产生增加的水平。因此融合配偶体有助于提供T辅助表位(免疫融合配偶体)，例如由人识别的T辅助表位，或有助于表达比天然重组蛋白更高产量的蛋白(表达增强子)。在一个实施方案中，融合配偶体既是免疫融合配偶体又是表达增强配偶体。在本专利技术的一种形式中，MAGE-3免疫融合配偶体源自蛋白D，蛋白D为革兰氏阴性杆菌B型流感嗜血菌(Haemophilus influenza)(WO 91/18926)的表面蛋白。在一个实施方案中，蛋白D衍生物含有大约前1/3的蛋白，具体而言为大约N-末端前100-110个氨基酸。在一个实施方案中，蛋白D衍生物是脂质化的(lipidated)。在一个实施方案中，脂蛋白D融合配偶体的前109个残基包括在N-末端上，以提供具有附加的外源T细胞表位的疫苗候选抗原，并增强在大肠杆菌(E.coli)中的表达水平(因此也可作为表达增强子)。脂质尾巴确保了抗原向抗原呈递细胞的最佳呈递。其他的MAGE-3融合配偶体包括流感病毒的非结构蛋白NS1(血凝素)。一般可利用N末端81个氨基酸，然而可利用不同的片段，前提是它们包括T-辅助表位。在另一个实施方案中，MAGE-3免疫融合配偶体为称做LYTA的蛋白。在一个实施方案中，利用了分子的C末端部分。Lyta源自肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)，后者合成N-乙酰-L-丙氨酸酰胺酶，即酰胺酶LYTA，(其由lytA基因编码{Gene，43(1986)第265-272页}，是一种能特异地降解肽聚糖主链上某些键的自溶素。LYTA蛋白的C-末端结构域负责对胆碱或一些胆碱类似物如DEAE的亲和力。已经利用该特性来开发用于表达融合蛋白的大肠杆菌C-LYTA表达质粒。已经描述了在其氨基酸末端包含C-LYTA片段的杂交蛋白的纯化{Biotechnology10，(1992)第795-798页}。如本文所用，本专利技术的一个实施方案利用了Lyta分子从残基178开始在C末端的重复部分。一种可利用的形式并入了残基188-305。在本专利技术的一个实施方案中，修饰后的MAGE-3组合物包括WO99/40188中所公开的抗原，或免疫本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种疫苗组合物，其包括：（ａ）抗原成分，其含有修饰的ＭＡＧＥ－３抗原和ＮＹ－ＥＳＯ－１抗原的组合，或其衍生物，和（ｂ）佐剂成分，其包括含有以下成分中的一种或多种的免疫刺激佐剂：明矾盐、胆固醇、水包油乳剂（Ｏ／Ｗ乳剂）、水包油乳剂低剂量型、免疫刺激寡核苷酸、生育酚、脂质体、皂苷、ＩＳＣＯＭＳ和脂多糖。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：CEM布鲁克，V布里查德，RM帕尔曼捷，M米德尔斯，
申请(专利权)人：葛兰素史密丝克莱恩生物有限公司，
类型：发明
国别省市：BE[比利时]
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