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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于植物基因工程,本专利技术涉及一种干旱诱导的文冠果mir171e基因及其应用。
技术介绍
1、文冠果(xanthoceras sorbifolium bunge),无患子科文冠果属的落叶小乔木,树皮灰褐色,枝褐紫色,小枝被短柔毛;单数羽状复叶,互生;小叶有短柄或无柄,披针形或近卵形,边缘有尖锐锯齿,花先叶或同时开放,圆锥花序,有多数花,花瓣白色,基部红色或黄色,内面有紫红色斑点·普片长椭圆形,葫果似棉桃,壳硬,绿色,种子圆形,暗褐色,坚硬,光滑。花期为4~5月,果期为7~8月。因其果皮在开裂前三瓣、四瓣的外形酷似旧时文官的帽子,故称“文冠果”。文冠果原产于中国北部干旱寒冷地区,分布于中国东北、华北、西北及山东等地。文冠果耐严寒、耐干旱,耐半阴,喜阳,对土壤适应性很强,野生于丘陵、山坡等处。文冠果以种子繁殖为主,也可根插繁殖。文冠果是中国特有的一种食用油料树种。
2、mirna是一些长度为22个核苷酸左右的非编码调控rna,可通过对靶mrna的互补配对在转录后水平调控基因表达,促使mrna降解或抑制其翻译。mir171家族是植物中成员众多的mirna基因家族之一,其靶基因主要是gras转录因子中scarecrow-like(scl)成员,它可通过与下游基因结合,从而广泛参与调控植物生长发育、响应逆境等生物学过程。scl基因主要参与植物生长发育、逆境胁迫响应、叶绿素合成以及赤霉素信号转导调控等。文冠果mir171家族共有13个成员。但对其成员功能研究及其应用还鲜有报道,严重限制了mirna在文冠果产业中的应用
3、干旱已成为制约我国农作物生长发育的瓶颈,随着近年来对文冠果的深入研究,mirna在植物抗旱过程中发挥的重要作用已被陆续报道。挖掘文冠果抗逆关键mirna,弄清其抗干旱机理,利用其改善作物的抗干旱性能,具有重要的理论意义和现实意义。
技术实现思路
1、为了克服现有技术的不足,本专利技术提供本专利技术涉及一种干旱诱导的文冠果mir171e基因及其应用,弥补了mir171家族成员在文冠果分子育种研究中的空白,有利于创制抗逆新种质。
2、本专利技术的第一个目的在于提供一种来源于文冠果的与抗干旱有关的mir171e基因前体及其成熟体序列。本专利技术的第一个目的在于提供mir171e基因成熟体沉默载体的构建方法。本专利技术的第三个目的在于提供mir171e基因前体及其成熟体在培育植物抗干旱品种中的应用。
3、本专利技术的上述目的是通过以下技术方案实现的:
4、一种干旱诱导的文冠果mir171e基因前体,是具有如seq id no.1所示的核苷酸序列。
5、本专利技术还提供上述干旱诱导的文冠果mir171e基因的成熟体,是具有如seq idno.2所示的核苷酸序列。
6、本专利技术还提供上述mir171e基因成熟体沉默载体的构建及侵染方法,具体步骤为:
7、设计短串联模拟靶标序列,是具有如seq id no.3所示的核苷酸序列。将片段连入病毒诱导基因沉默载体中并将其转入农杆菌,利用农杆菌介导法侵染文冠果。
8、本专利技术还提供一种上述mir171e基因前体以及其成熟体在提高植物抗干旱的抗性方面的应用。
9、本专利技术与现有技术相比的有益效果是:
10、本专利技术提供了一个干旱诱导的文冠果mir171e基因前体;构建了mir171e基因成熟体的沉默表达载体;通过本专利技术文冠果mir171e基因成熟体的沉默,可以实现对文冠果抗性基因的调控。具体地,mir171e基因成熟体的沉默可以增强植物体内xsscl6基因的表达,而scl基因与植物体内叶绿素合成相关,能间接影响植株的抗旱性。本专利技术通过构建mir171e基因成熟体沉默载体的方法获得的文冠果沉默植株中mir171e基因的表达量高于野生型植株,其抗旱效果更优。本专利技术通过沉默mir171e基因使文冠果对干旱的抗性增强,对培育抗旱文冠果品种具有重要意义。
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1.一种干旱诱导的文冠果miR171e基因前体,其特征是,是具有如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。
2.一种干旱诱导的文冠果miR171e基因的成熟体,其特征是,是具有如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。
3.如权利要求2所述的干旱诱导的文冠果miR171e基因成熟体沉默载体的构建及侵染方法,其特征是,设计短串联模拟靶标序列,是具有如SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列,将序列片段连入病毒诱导基因沉默载体中并将其转入农杆菌,利用农杆菌介导法侵染文冠果。
【技术特征摘要】
1.一种干旱诱导的文冠果mir171e基因前体,其特征是,是具有如seq id no.1所示的核苷酸序列。
2.一种干旱诱导的文冠果mir171e基因的成熟体,其特征是,是具有如seq id no.2所示的核苷酸序列。
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【专利技术属性】
技术研发人员:刘淑宁,李景滨,洪雨慧,周慧,李澳,阮成江,
申请(专利权)人:大连民族大学,
类型:发明
国别省市:
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