【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于基因工程和转基因，具体涉及一种基因编辑方法。
技术介绍
1、基因编辑技术能够对物种基因组进行精准的遗传操作，近年来是作物遗传改良的新兴技术手段。编辑系统的递送是影响基因编辑效率的重要因素，植物中常见的递送手段包括粒子轰击、农杆菌介导、聚乙二醇(peg)介导、脂质体介导、显微注射等，其中农杆菌介导依然是主流的方式。
2、使用含有编辑系统的农杆菌侵染植物愈伤组织，并将阳性愈伤组织培养成完整植株就可以获得靶位点成功编辑的植物材料。在水稻中，往往使用种子来诱导愈伤组织，继而进行后续的农杆菌侵染、共培养、愈伤筛选、分化和生根成苗的流程。虽然使用农杆菌侵染水稻种子诱导的愈伤组织已经成为培育转基因、基因编辑水稻的主流手段，且已经能够得到较高的编辑效率，但是更高效率的技术手段依然是需要的。
3、水稻花药培养是用组织培养技术，把发育到一定阶段的水稻花药，采用无菌操作技术，接种在人工培养基上，通过改变花药内花粉粒的发育程序诱导其脱分化，并连续进行有丝分裂形成细胞团，进而形成一团无分化的薄壁组织——愈伤组织，随后使愈伤组织再分化成胚状体或分化成完整的水稻植株。水稻花药通常被用来培育常规的水稻品种，但因其操作流程比较复杂且愈伤诱导效率较低，尚没有人将其用于农杆菌介导的遗传转化。
技术实现思路
1、为解决上述问题，本专利技术测试了农杆菌介导的种子愈伤途径和花药愈伤途径这两种基因编辑方式的编辑效率，意外发现花药愈伤途径的编辑效率更高。
2、为实现上述目的，本专
3、本专利技术提供一种水稻基因编辑方法，其特征在于，使用携带基因编辑载体的农杆菌侵染水稻花药培养诱导出的愈伤组织，并把成功侵染的愈伤组织培育成水稻植株。
4、在一些实施方案中，上述基因编辑载体的t-dna区由潮霉素抗性基因表达盒、cas9基因表达盒、两个grna表达盒构成，t-dna区的结构如图1b所示。
5、在一些实施方案中，上述两个grna可以结合到水稻叶绿素合成基因cao1(基因组序列见seq id no.1)，或赤霉素降解基因eui(基因组序列见seq id no.2)上。
6、在一些实施方案中，上述成功侵染的愈伤组织通过潮霉素抗生素筛选获得。
7、在一些实施方案中，上述的水稻为粳稻品种中花11。
8、在一些实施方案中，上述的农杆菌菌株为eha105。
9、本专利技术还提供上述的方法在水稻基因编辑中的应用。
10、本专利技术的优点及有益效果如下：本专利技术测试了农杆菌介导的种子愈伤途径和花药愈伤途径这两种基因编辑方式的编辑效率，意外发现花药愈伤途径的编辑效率更高。这有助于为水稻基因编辑提供一种新的操作流程。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种水稻基因编辑方法，其特征在于，使用携带基因编辑载体的农杆菌侵染水稻花药培养诱导出的愈伤组织，并把成功侵染的愈伤组织培育成水稻植株。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的基因编辑载体的T-DNA区由潮霉素抗性基因表达盒、Cas9基因表达盒、两个gRNA表达盒构成。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述成功侵染的愈伤组织通过潮霉素抗生素筛选获得。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的水稻为粳稻品种中花11。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的农杆菌菌株为EHA105。
6.权利要求1-6任一项所述的方法在水稻基因编辑中的应用。
【技术特征摘要】
1.一种水稻基因编辑方法，其特征在于，使用携带基因编辑载体的农杆菌侵染水稻花药培养诱导出的愈伤组织，并把成功侵染的愈伤组织培育成水稻植株。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的基因编辑载体的t-dna区由潮霉素抗性基因表达盒、cas9基因表达盒、两个grna表达盒构成。
3.根据权利要...
【专利技术属性】
技术研发人员：李昌焱，游艾青，李三和，周雷，吴艳，闸雯俊，吴边，陈志军，刘凯，杨国才，刘凯，徐华山，李培德，陈俊孝，石少阶，王卉颖，
申请(专利权)人：湖北省农业科学院粮食作物研究所，
类型：发明
国别省市：
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