【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及植物组织培养，具体为一种佛手山药组培苗快速繁殖方法。
技术介绍
1、佛手山药是以武穴市为主的鄂东地区大面积种植的优良地方山药，其食用品质和药用品质均较佳，是国家地理标志农产品，山药富含淀粉、多糖、黏液蛋白、矿物质及其他营养物质，是一种食、药兼用的经济作物，中国、美国、英国和日本等国家均将山药列入药典，山药气味平和，温补而不骤，微香而不燥，是中医常用的一味健脾补气良药，其药理作用主要集中在抗氧化、抗衰老、降血糖、肝损伤保护、免疫调节等方面。佛手山药是鄂东地区传统特色经济作物，单位产值较高，风味品质佳，开发潜力较大。
2、佛手山药生产中一般以地下块茎作种，但该方法繁育的种芋，品种混杂，性状不稳定，品质产量差异大，种性难以保持。而以茎尖或茎段作为繁殖材料，进行组培无性快繁时，虽然可以得到目标性选择强，性状品质一致的种苗，但存在增殖倍数低，无菌体系建立难等技术问题。
3、因此，我们提出了一种佛手山药组培苗快速繁殖方法，以便于解决上述中提出的问题。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种佛手山药组培苗快速繁殖方法，以解决上述
技术介绍
提出的目前市场上现有的佛手山药生产上主要采用上一年的块茎切块作为下一年的种芋，但该方法繁育的种芋，品种混杂，性状不稳定，品质产量差异大，种性难以保持。而以茎尖或茎段作为繁殖材料，进行组培无性快繁时，虽然可以得到目标性选择强，性状品质一致的种苗，但存在增殖倍数低，无菌体系建立难等技术问题。本方法通过研究不同植物生长调节剂
2、为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种佛手山药组培苗快速繁殖方法，包括以下步骤：
3、步骤（1）、取材：以田间生长的佛手山药茎蔓顶端10 cm左右的幼嫩部分为试材，并将佛手山药茎蔓顶端10 cm的幼嫩部分进行切断，剪成3 cm左右的带节茎段；
4、步骤（2）、茎段消毒：先用自来水将带节茎段冲洗干净，用纱布轻轻擦干，然后在超净工作台上，按下列程序消毒：用75%的酒精浸润30-60 s，无菌水冲洗1次；
5、步骤（3）、培养愈伤组织和不定芽：选用ms培养基，将无菌佛手山药茎段放置在ms培养基内，并且选用6-ba与naa组合、zt与naa组合，以及30 g/l蔗糖、5g/l琼脂、ph 5.8置于ms培养基中，促进佛手山药诱导愈伤组织及不定芽，30-40天后依次统计形成愈伤组织频率和形成不定芽频率；
6、形成愈伤组织频率=(形成愈伤的材料数/试验材料数)×100%；
7、形成不定芽频率=(形成不定芽的材料数/试验材料数)×100%；
8、步骤（4）、不同植物生长调节剂配比对佛手山药不定芽增殖的影响：将步骤（3）中诱导出的带芽材料转入继代培养基中，以ms为基本培养基，添加不同浓度的6-ba和naa组合，以及30 g/l蔗糖、5g/l琼脂、ph 5.8，研究不同植物生长调节剂配比对佛手山药不定芽增殖的影响，培养45天后观察不定芽的生长情况，计算出增殖系数；
9、步骤（5）、佛手山药不定芽生根试验：将继代培养后3 cm左右的佛手山药不定芽转入ms附加不同浓度的naa或iba的生根培养基中培养，30天后观察生根状态，计算出生根率；
10、生根率=(生根的不定芽数/接种的不定芽数)×100%；
11、步骤（6）、佛手山药组织培养中褐化现象控制研究：以ms+ ba 0.2 mg/l+ naa0.02 mg/l+ 蔗糖30 g/l+琼脂5g/l，ph 5.8为基本培养基，分别添加100、150、200 mg/l的聚乙烯吡咯烷酮(pvp)或0、50、100、200 mg/l的维生素c(vc)，将获得的无菌佛手山药1 cm左右的带节切段分别置于上述培养基中，观察不同培养基对佛手山药切段生长的褐化现象的影响；
12、步骤（7）、带伤的侧芽培养：将佛手山药的茎尖带伤的侧芽放置在ms培养基中进行培养，带伤的侧芽继续增殖，从而使带伤的侧芽的侧芽在增殖后形成带愈伤团的丛生芽；
13、步骤（8）、丛生芽培养：将步骤（7）中的带愈伤团的丛生芽上切下单个丛生芽，将单个丛生芽放置在步骤（7）中的培养基中继续培养，继而形成带愈伤团的丛生芽；
14、步骤（9）、重复操作：将步骤（8）中培养得出的带愈伤团的丛生芽中继续切下单个丛生芽，继续放置在放置在步骤（7）中的培养基中培养，循环往复，从而实现对佛手山药组培苗快速繁殖，繁殖系数可达4.2。
15、优选的，所述步骤（1）中在取材时，可选用长势正常的佛手山药茎蔓顶端位置。
16、采用上述技术方案，便于在对佛手山药进行培养的过程中，对比佛手山药生长、出芽生根率，提高实验对比数据的准确度，提高后期对佛手山药扩繁数据的实验数据的准确度，从而提高佛手山药的扩繁效率。
17、优选的，所述步骤（3）中，基本培养基为ms，以及30 g/l蔗糖、5 g/l琼脂、ph值5.8，采用ms+6-ba 0.4 mg/l+naa 0.04 mg/l组合优化佛手山药不定芽的形成，ms+zt 0.2 mg/l+naa 0.2 mg/l利于佛手山药诱导不定芽。
18、采用上述技术方案，不同浓度的zt和naa配比对佛手山药茎尖的愈伤组织诱导、不定芽诱导效果不同，以ms为基本培养基，添加不同浓度的zt和naa，形成愈伤组织频率最高达92.00%，ms+ zt 0.2 mg/l+ naa 0.2 mg/l利于佛手山药诱导不定芽，形成不定芽频率高达82.67%。
19、优选的，所述步骤（4）中采用ms+6-ba 0.2mg/l+naa 0.04mg/l组合对佛手山药茎尖的不定芽增殖效果稳定，不定芽增殖系数最好，不定芽增殖系数高达4.2，且不定芽长势健壮。
20、采用上述技术方案，在ms为基本培养基、添加不同浓度的6-ba和naa配比的继代培养基中，佛手山药不定芽增殖情况不同，其中p1培养基的不定芽增殖系数最高且不定芽的长势粗壮，即ms+6-ba 0.2mg/l+naa 0.04mg/l对佛手山药茎尖的不定芽增殖效果最好。
21、优选的，所述步骤（5）中采用ms+naa 0.1mg/l组合对佛手山药不定芽生根培养最利于根的生长发育及形成完整的植株，生根植株移栽到合适基质中可以正常成活。
22、采用上述技术方案，在ms附加不同浓度的naa或iba的生根培养基中，ms+ naa 0.1mg/l对佛手山药不定芽生根培养是最佳的，最利于根的生长发育及形成完整的植株，不定芽生根率高达96.32%，从而提高不定芽在繁殖时的成活率。
23、优选的，所述步骤（6）中佛手山药茎段的褐化抑制剂优选为200 mg/l聚乙烯吡咯烷本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种佛手山药组培苗快速繁殖方法，其特征在于：包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的佛手山药组培苗快速繁殖方法，其特征在于：所述步骤（1）中在取材时，可选用长势正常的佛手山药茎蔓顶端位置。
3.根据权利要求1所述的佛手山药组培苗快速繁殖方法，其特征在于：所述步骤（3）中，基本培养基为MS，以及30 g/L蔗糖、5 g/L琼脂、pH值5.8，采用MS+6-BA 0.4 mg/L+NAA 0.04mg/L组合优化佛手山药不定芽的形成，MS+ZT 0.2 mg/L+NAA 0.2 mg/L利于佛手山药诱导不定芽。
4.根据权利要求1所述的佛手山药组培苗快速繁殖方法，其特征在于：所述步骤（4）中采用MS+6-BA 0.2mg/L+NAA 0.01mg/L组合对佛手山药茎尖的不定芽增殖效果稳定，不定芽增殖系数最好，不定芽增殖系数高达4.2，且不定芽长势健壮。
5.根据权利要求1所述的佛手山药组培苗快速繁殖方法，其特征在于：所述步骤（5）中采用MS+NAA 0.02mg/L组合对佛手山药不定芽生根培养最利于根的生长发育及形成完整的植株，生根
6.根据权利要求1所述的佛手山药组培苗快速繁殖方法，其特征在于：所述步骤（6）中佛手山药茎段的褐化抑制剂优选为200 mg/L聚乙烯吡咯烷酮。
7.根据权利要求1所述的佛手山药组培苗快速繁殖方法，其特征在于：所述步骤（7）和步骤（8）中选用的MS培养基中依次放置有MS+ZT 0.2 mg/L+NAA 0.2 mg/L、MS+6-BA 0.2mg/L+NAA 0.04mg/L组合和MS+NAA 0.1mg/L。
8.根据权利要求1所述的佛手山药组培苗快速繁殖方法，其特征在于：所述步骤（7）和步骤（8）中在带愈伤团的丛生芽中切下单个丛生芽时，单个丛生芽的根部含一部分愈伤团。
...【技术特征摘要】
1.一种佛手山药组培苗快速繁殖方法，其特征在于：包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的佛手山药组培苗快速繁殖方法，其特征在于：所述步骤（1）中在取材时，可选用长势正常的佛手山药茎蔓顶端位置。
3.根据权利要求1所述的佛手山药组培苗快速繁殖方法，其特征在于：所述步骤（3）中，基本培养基为ms，以及30 g/l蔗糖、5 g/l琼脂、ph值5.8，采用ms+6-ba 0.4 mg/l+naa 0.04mg/l组合优化佛手山药不定芽的形成，ms+zt 0.2 mg/l+naa 0.2 mg/l利于佛手山药诱导不定芽。
4.根据权利要求1所述的佛手山药组培苗快速繁殖方法，其特征在于：所述步骤（4）中采用ms+6-ba 0.2mg/l+naa 0.01mg/l组合对佛手山药茎尖的不定芽增殖效果稳定，不定芽增殖系数最好，不定芽增殖系数高达4.2，且不定芽长势健壮。
5.根据权...
【专利技术属性】
技术研发人员：徐为，桂宝川，向发云，刘金华，吕博，程剑，过聪，陈锋，
申请(专利权)人：湖北翔睿生态农业科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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